豬病常用的血清學(xué)診斷方法中酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)的夾心法如何操作?
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操作(以檢測(cè)豬瘟病毒抗原為例):第一,抗體包被:將一定濃度的豬瘟高免血清(用碳酸鹽 緩沖液進(jìn)行稀釋)包被酶聯(lián)板,每孔1〇〇微升,置37C下2小 時(shí),或冰箱中過夜。第二,洗滌:同間接法。第三,加被檢樣品,除調(diào)零孔外,每份樣品加2個(gè)孔,每孔 加100微升,同時(shí)設(shè)立陽(yáng)性抗原、陰性抗原對(duì)照,酶結(jié)合物對(duì)(抗體加磷酸鹽緩沖鹽水加酶結(jié)合物),置37度下反應(yīng) 1.5?2小時(shí)。
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