1.AB0血型鑒定原理
常用鹽水凝集法檢測紅細(xì)胞上存在的血型抗原，以及血清中存在的血型抗體，依據(jù)抗原抗體存在的情況判定血型。常規(guī)的方法有：①正向定型：用已知抗體的標(biāo)準(zhǔn)血清檢查紅細(xì)胞上未知的抗原。②反向定型：用已知血型的標(biāo)準(zhǔn)紅細(xì)胞檢查血清中未知的抗體。結(jié)果判定：凡紅細(xì)胞出現(xiàn)凝集者為陽性，呈散在游離狀態(tài)為陰性。醫(yī)學(xué).全在.,線提,供bhskgw.cn
2.鑒定方法
�。�1)生理鹽水凝集法：①玻片法：操作簡單，適于大量標(biāo)本檢查，但反應(yīng)時間長；被檢查者如血清抗體效價低，則不易引起紅細(xì)胞凝集，因此，不適于反向定型。②試管法：由于離心作用可加速凝集反應(yīng)，故反應(yīng)時間短，而且，借助于離心力可以使紅細(xì)胞接觸緊密，促進(jìn)凝集作用，適于急診檢查。
紅細(xì)胞亞型抗原性弱，如抗A抗B標(biāo)準(zhǔn)血清效價低時，易造成漏檢或誤定。如加用O型（抗A、B)血清和反向定型，可避免此類錯誤。
玻片法凝集結(jié)果判斷：紅細(xì)胞呈均勻分布，無凝集顆粒，鏡下紅細(xì)胞分散。在低倍鏡下凝集程度強(qiáng)弱判斷標(biāo)準(zhǔn)：①呈一片或幾片凝塊，僅有少數(shù)單個游離紅細(xì)胞為（++++)。②呈數(shù)個大顆粒狀凝塊，有少數(shù)單個游離紅細(xì)胞為（+++)。③數(shù)個小凝集顆粒和一部分微細(xì)凝集顆粒，游離紅細(xì)胞約占1／2為（++)。④肉眼可見無數(shù)細(xì)沙狀小凝集顆粒。于鏡下觀察，每凝集團(tuán)中有5～8個以上紅細(xì)胞凝集為（+)。⑤可見數(shù)個紅細(xì)胞凝集在一起，周圍有很多的游離紅細(xì)胞（±)。⑥可見極少數(shù)紅細(xì)胞凝集，而大多數(shù)紅細(xì)胞仍呈分散分布為混合凝集外觀。⑦鏡下未見細(xì)胞凝集，紅細(xì)胞均勻分布為（-)。
�。�2)凝膠微柱法：是紅細(xì)胞抗原與相應(yīng)抗體在凝膠微柱介質(zhì)中發(fā)生凝集反應(yīng)的免疫學(xué)方法。血型抗體為單克隆抗體，加入試劑、標(biāo)本，用專用離心機(jī)離心后可直接用肉眼觀察結(jié)果或用血型儀分析。此法操作標(biāo)準(zhǔn)化，定量加樣，確保結(jié)果準(zhǔn)確性醫(yī),,學(xué)全在.線提.供bhskgw.cn。
3.抗A、抗B和抗AB標(biāo)準(zhǔn)血清標(biāo)準(zhǔn)
準(zhǔn)血清均采自健康人，并應(yīng)符合下述條件：①特異性：只能與相應(yīng)的紅細(xì)胞抗原發(fā)生凝集，無非特異性凝集。②效價：我國標(biāo)準(zhǔn)抗A和抗B血清效價均在1：128以上。③親和力：我國標(biāo)準(zhǔn)要求抗A對A1、A2及A2B發(fā)生反應(yīng)開始出現(xiàn)凝集的時間分別是15s、30s和45s；抗B對B型紅細(xì)胞開始出現(xiàn)凝集的時間為15s。凝集強(qiáng)度為3min時，凝塊不小于1mm2。④冷凝集素效價：在1：4以下。⑤無菌。⑥滅活補(bǔ)體。
4.血型鑒定操作時注意事項(xiàng)
一般注意事項(xiàng)：①所用器材必須干燥清潔、防止溶血，凝集和溶血的意義一樣。為避免交叉污染，建議使用一次性器材。標(biāo)準(zhǔn)血清從冰箱取出后，應(yīng)待其平衡至室溫后再用，用畢后應(yīng)盡快放回冰箱保存。②加試劑順序：一般先加血清，然后再加紅細(xì)胞懸液，以便核實(shí)是否漏加血清。③雖然IgM抗A和抗B與相應(yīng)紅細(xì)胞的反應(yīng)溫度以4℃最強(qiáng)，收集整理但為了防止冷凝集現(xiàn)象干擾，一般在室溫20℃～24℃內(nèi)進(jìn)行試驗(yàn)，而37℃條件，可使反應(yīng)減弱。④幼兒紅細(xì)胞抗原未發(fā)育完全、老年體弱者抗原性較弱，最好采用試管法鑒定血型。⑤玻片法反應(yīng)時間不能少于10min，否則較弱凝集不能出現(xiàn)，造成假陰性。⑥正、反定型結(jié)果一致才可發(fā)報告。⑦反定型法：先天性免疫球蛋白缺陷，長期大量應(yīng)用免疫抑制，血型抗體可減弱或消失；血清中存在自身免疫性抗體、冷凝集素效價增高、多發(fā)性骨髓瘤、免疫球蛋白異常均可造成反定型困難；新生兒體內(nèi)可存在母親輸送的血型抗體，且自身血型抗體效價又低，因而出生6個月以內(nèi)的嬰兒不宜做反定型。老年人血清中抗體水平大幅度下降或被檢者血清中缺乏抗A及（或)抗B抗體，可引起假陰性或血型鑒定錯誤。
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