 |
 |
1 材料和方法
1.1 實(shí)驗(yàn)藥物 鹽酸異丙基腎上腺素( isopreterenol, ISO; SIGMA;Lot No: I5627 );美托洛爾(metoprolol; AstraZeneca;Lot No: 0604045)。
1.2 造模及分組 9周齡清潔級(jí)雄性SD大鼠80只，購(gòu)于南京中醫(yī)藥大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心。將大鼠隨機(jī)分為2組：模型組70只，皮下注射ISO (170 mg·kg-1, 分2次, 間隔24 h)，空白組10只，皮下注射生理鹽水(NS)0.25 ml[4]。造模6周后，應(yīng)用彩色超聲監(jiān)測(cè)儀(型號(hào):HP SONOS 5500, 探頭頻率7.5 MHz)以二維成像模式在左室短軸切面位于乳頭肌水平測(cè)量相關(guān)指標(biāo)，測(cè)定值均為5個(gè)心動(dòng)周期測(cè)定的均值。左室射血分?jǐn)?shù)(LVEF)≤45%即為造模成功[5]。將造模成功大鼠隨機(jī)分為心衰對(duì)照組(NS 0.1 ml· kg-1·d-1灌胃,n=13)和美托洛爾組(美托洛爾8 mg· kg-1·d-1灌胃,n=14)，同室常規(guī)飼養(yǎng)18周，飼養(yǎng)環(huán)境( 22±2 ) ℃，常規(guī)飼料喂養(yǎng)，自由飲水，觀察大鼠的飲食、毛色、活動(dòng)、紫紺、水腫等一般性狀，每周稱體質(zhì)量(BW)。
1.3 血流動(dòng)力學(xué)檢測(cè) 18周實(shí)驗(yàn)結(jié)束，將各組大鼠腹腔注射麻醉，以自制充滿肝素生理鹽水的導(dǎo)管，經(jīng)頸動(dòng)脈插入左室腔，并連接壓力換能器。分別測(cè)量左心室收縮壓(LVSP)、左心室舒張末期壓(LVEDP)、左心室內(nèi)壓最大上升和下降速率(±dp∕dtmax)，所有信息由BL-410生物機(jī)能檢測(cè)系統(tǒng)記錄并采用BL-New Century軟件進(jìn)行分析。檢測(cè)結(jié)束后頸動(dòng)脈放血，低溫離心，分離血漿，密封，- 20℃ 冷存(備用)。
1.4 血漿TNF-α檢測(cè) 采用放免法檢測(cè)血漿TNF-α，放免試劑盒購(gòu)于解放軍總醫(yī)院科技開(kāi)發(fā)中心放免所(批號(hào)：20070203)。操作嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書進(jìn)行。
1.5 心臟組織病理學(xué)檢查 采血完畢，采用脫頸法處死所有動(dòng)物，迅速摘取心臟，肉眼觀察后，剪去周圍大血管，在冰生理鹽水中洗凈血液，濾紙吸干，稱重。沿房室交界處去除左右心房，用電子天平(精確度0.000 1 g)稱取心室質(zhì)量(VW)，再剪去右心室游離壁，保留左心室及室間隔，稱取左心室質(zhì)量(LVW)。分別計(jì)算心室質(zhì)量指數(shù)(VWI，VW/BW)、左心室質(zhì)量指數(shù)(LVWI，LVW/BW)。所有標(biāo)本于10%甲醛中固定24 h (4℃)，常規(guī)取材、脫水、石蠟包埋，沿左室長(zhǎng)軸線每隔1 mm橫斷面切取5 張(層厚4 μm)切片，切片經(jīng)蘇木精-伊紅染色、Masson三色染色。光學(xué)顯微鏡下觀察：①心肌纖維有無(wú)肥大、變性、壞死;②間質(zhì)有無(wú)充血、水腫、炎細(xì)胞浸潤(rùn)、結(jié)締組織增生;③心內(nèi)膜、心外膜有無(wú)充血、水腫、炎細(xì)胞浸潤(rùn)。各種病變按由輕到重的程度分別評(píng)分為1、2、3、4分，無(wú)病變?yōu)?分[6]，累加每組每只動(dòng)物所有分?jǐn)?shù)，并進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。
1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS 11.5 軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。計(jì)量資料以±s表示，組間均數(shù)比較采用t檢驗(yàn)，率的比較采用χ2 檢驗(yàn)，以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
2 結(jié) 果
2.1 一般性狀 與空白組相比，心衰對(duì)照組大鼠普遍出現(xiàn)：毛色暗黃，納食減少，體質(zhì)量增加緩慢，口鼻紫紺、有血性分泌物，明顯氣喘，足爪水腫，活動(dòng)減少，抓取反應(yīng)差。與心衰對(duì)照組相比，美托洛爾組大鼠心衰癥狀明顯好轉(zhuǎn)。
2.2 血流動(dòng)力學(xué)檢測(cè)結(jié)果 見(jiàn)表1。心衰對(duì)照組與空白組相比HR、LVEDP顯著增加(P<0.01)，LVSP、±dp/dtmax明顯下降(P<0.01)。美托洛爾組與心衰對(duì)照組相比HR、LVEDP 顯著下降(P<0.01)，±dp/dtmax明顯上升(P<0.05)。表1 18周大鼠血流動(dòng)力學(xué)檢測(cè)結(jié)果與心衰對(duì)照組比較：
