腫瘤壞死因子α(TNF-α)、干擾素1β(IL-1β)是引起組織細(xì)胞損傷的重要細(xì)胞因子,兩者均參與急性胰腺炎的病理過程。近年來已有關(guān)于血必凈對血液中細(xì)胞因子影響的報道[1-2],但血必凈對急性胰腺炎時胰腺組織TNF-α、IL-1β的表達有無影響尚未見報道。本實驗旨在通過觀察血必凈注射液對大鼠胰腺組織TNF-α、IL-1β表達的影響,探討血必凈對大鼠急性胰腺炎的保護作用及可能機制。
1 材料和方法
1.1 動物模型與分組 將SD大鼠48只(體重200~250 g, 由徐州醫(yī)學(xué)院實驗動物中心提供)隨機分為假手術(shù)組、胰腺炎組和治療組(n=16),假手術(shù)組僅行開關(guān)腹手術(shù),胰腺炎組經(jīng)胰膽管逆行注射5%;悄懰徕c(2 ml/kg,美國Sigma公司)制作胰腺炎模型,治療組在胰腺炎模型基礎(chǔ)上予血必凈干預(yù)。術(shù)前3天,治療組經(jīng)尾靜脈注射血必凈注射液4 ml·kg-1·d-1(天津紅日藥業(yè)股份有限公司生產(chǎn));假手術(shù)組、胰腺炎組同時間點給予等量生理鹽水。3組分別于制模術(shù)后4h、8 h時點處死大鼠,取胰腺標(biāo)本進行檢驗。
1.2 組織病理學(xué)檢查 切取胰腺標(biāo)本制成石蠟切片后行蘇木精-伊紅染色,光鏡下觀察胰腺組織病理學(xué)變化。
1.3 TNF-α、IL-1β表達檢測 免疫組化染色法(試劑盒均購自武漢博士德生物工程有限公司)測胰腺組織TNF-α、IL-1β表達,結(jié)果應(yīng)用計算機進行圖像灰度分析,以積分光密度值(D)作計量分析,每張片選4個視野。
1.4 統(tǒng)計學(xué)處理 使用SPSS 11.0統(tǒng)計軟件進行統(tǒng)計,數(shù)據(jù)以±s表示。計量資料采用t檢驗,計數(shù)資料采用χ2檢驗,P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。醫(yī).學(xué).全.在.線bhskgw.cn
2 結(jié) 果
2.1 組織病理學(xué)結(jié)果 假手術(shù)組胰腺組織肉眼及鏡下結(jié)構(gòu)無明顯異常。胰腺炎組肉眼觀胰腺明顯腫脹,伴有出血壞死;鏡下見間質(zhì)血管擴張、淤血,灶狀胰腺腺泡與脂肪壞死,大量炎性細(xì)胞浸潤,紅細(xì)胞滲出,胰腺細(xì)胞結(jié)構(gòu)消失。治療組肉眼病變及鏡下觀察組織結(jié)構(gòu)破壞明顯減輕。
2.2 免疫組化測定 治療組TNF-α、IL-1β含量顯著低于胰腺炎組(P<0.01 ),見表1、2。表1 各組TNF-α的D值表2 各組IL-1β的D值(n=8,±s)與假手術(shù)組比較: