灰黃霉素原料藥－灰黃霉素－高效液相色譜法

本方法采用高效液相色譜法測(cè)定灰黃霉素原料藥中灰黃霉素的含量。

本方法適用于灰黃霉素原料藥。

供試品加流動(dòng)相溶解并稀釋，進(jìn)入高效液相色譜儀進(jìn)行色譜分離，用紫外吸收檢測(cè)器，于波長(zhǎng)254nm處檢測(cè)灰黃霉素的峰面積，計(jì)算出其含量。

1. 乙腈

2. 甲醇

3. 0.05mol/L磷酸二氫鉀溶液

4. 磷酸

1. 儀器

1.1 高效液相色譜儀

1.2 色譜柱

十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，理論塔板數(shù)按灰黃霉素峰計(jì)算應(yīng)不低于800。

1.3 紫外吸收檢測(cè)器

2. 色譜條件

2.1 流動(dòng)相：0.05mol/L磷酸二氫鉀溶液 乙腈 甲醇=57 38 5，用磷酸調(diào)節(jié)pH值為3.7±0.2

2.2 檢測(cè)波長(zhǎng)：254nm

2.3 柱溫：室溫

1. 對(duì)照品溶液的制備

精密稱取灰黃霉素對(duì)照品約50mg，置50mL量瓶中，加流動(dòng)相溶解并稀釋至刻度，精密量取5mL，置50mL量瓶中，加流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，即為對(duì)照品溶液。

2. 供試品溶液的制備

取供試品10片，精密稱定，研細(xì)，精密稱取適量（約相當(dāng)于灰黃霉素100mg)，置100mL量瓶中，加流動(dòng)相適量，超聲處理30分鐘，放冷至室溫，加流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，用0.45µm微孔濾膜濾過，精密量取續(xù)濾液5mL，置50mL量瓶中，加流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，即為供試品溶液。

注：“精密稱取”系指稱取重量應(yīng)準(zhǔn)確至所稱取重量的千分之一。“精密量取”系指量取體積的準(zhǔn)確度應(yīng)符合國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)中對(duì)該體積移液管的精度要求。

分別精密吸取對(duì)照品溶液和供試品溶液各10mL，注入高效液相色譜儀，用紫外吸收檢測(cè)器于波長(zhǎng)254nm處測(cè)定灰黃霉素（C₁₇H₁₇ClO₆)的峰面積，計(jì)算出其含量。

中華人民共和國(guó)藥典，國(guó)家藥典委員會(huì)編，化學(xué)工業(yè)出版社，2005版，二部，p.192。