復(fù)方川貝精片－鹽酸麻黃堿的測(cè)定－薄層掃描法

本方法采用薄層掃描法測(cè)定復(fù)方川貝精片中鹽酸麻黃堿的含量。

供試品于錐形瓶中經(jīng)甲醇加熱回流，過(guò)濾，濾液蒸干，殘?jiān)�用甲醇溶解，制成供試液，點(diǎn)樣、展開(kāi)，以0.2%茚三酮乙醇溶液顯色，用薄層掃描儀進(jìn)行掃描，于波長(zhǎng)λ_S=520nm，λ_R=600nm測(cè)量鹽酸麻黃堿吸收度積分值，計(jì)算其含量。

1. 乙酸乙酯

2. 甲醇

3. 濃氨試液

4. 茚三酮

5. 乙醇

1. 儀器

1.1 薄層掃描儀

1.2點(diǎn)樣器

一般采用微升毛細(xì)管或與之相應(yīng)的點(diǎn)樣器材。

1.3展開(kāi)室

可用適合薄層板大小的專(zhuān)用玻璃缸，底部平底或雙槽，蓋子須密閉。

2.材料

高效硅膠G板。

1. 對(duì)照品溶液的制備

精密稱(chēng)取鹽酸麻黃堿對(duì)照品11.31mg，加甲醇溶解并轉(zhuǎn)移至100mL量瓶中，稀釋至刻度，搖勻，即得每1mL含各含鹽酸麻黃堿1.131mg的對(duì)照品溶液。

2. 供試品溶液的制備

精密稱(chēng)取供試品（取供試品20片，去糖衣，研成細(xì)粉)1.5g，置錐形瓶中，加甲醇50mL，加熱回流1h，濾過(guò)，用甲醇充分洗滌漏斗及殘?jiān)�，收集洗液及濾液，水浴蒸干，殘?jiān)�加甲醇使溶解，定量轉(zhuǎn)移至5mL量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，作為供試品溶液。

注：“精密稱(chēng)取”系指稱(chēng)取重量應(yīng)準(zhǔn)確至所稱(chēng)取重量的千分之一�！熬�密量取”系指量取體積的準(zhǔn)確度應(yīng)符合國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)中對(duì)該體積移液管的精度要求。

1.點(diǎn)樣

精密吸取供試品溶液和對(duì)照品溶液1μL，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，如用點(diǎn)樣器點(diǎn)樣到薄層板上，一般為圓點(diǎn)，點(diǎn)樣基線(xiàn)距底邊1.0～1.5cm，樣點(diǎn)直徑一般不大于2mm，點(diǎn)間距離可視斑點(diǎn)擴(kuò)散情況，以不影響檢出為宜。點(diǎn)樣時(shí)必須注意勿損傷薄層表面。

2.展開(kāi)

將點(diǎn)好樣品的薄層板放入展開(kāi)缸的展開(kāi)劑中，以乙酸乙酯-甲醇-濃氨試液（17:2:1)為展開(kāi)劑展開(kāi)，取出薄層板，晾干，噴以0.2%茚三酮乙醇溶液，在105℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰，取出，晾干。

3. 標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)繪制

精密吸取對(duì)照品溶液0.5，1.0，1.5，2.0，2.5μL點(diǎn)樣，展開(kāi)顯色后，掃描測(cè)定，以點(diǎn)樣量對(duì)積分面積繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)，進(jìn)行線(xiàn)性回歸，得到回歸方程。

4.含量測(cè)定

在薄層板上覆蓋同樣大小的玻璃板，周?chē)�用膠布固定，選擇反射方式，采用吸收法，用雙波長(zhǎng)進(jìn)行掃描，波長(zhǎng)：λ_S =520nm，λ_R=600nm，測(cè)量供試品吸收度積分值與對(duì)照品吸收度積分值，計(jì)算。

用外標(biāo)法測(cè)定時(shí)，若對(duì)照品各數(shù)據(jù)點(diǎn)在校正曲線(xiàn)上呈一通過(guò)原點(diǎn)的直線(xiàn)時(shí)，可用一點(diǎn)法校正，如不通過(guò)原點(diǎn)通常宜采用二點(diǎn)法校正，必要時(shí)用多點(diǎn)法校正。

洪立湘，周春蓮，沈麗娟. 雙波長(zhǎng)薄層掃描法測(cè)定復(fù)方川貝精片中鹽酸麻黃堿的含量. 吉林大學(xué)學(xué)報(bào)（醫(yī)學(xué)版)，2002，（4)：435.