方法名稱: |
甘草浸膏—甘草酸的測(cè)定—高效液相色譜法 |
應(yīng)用范圍: |
本方法采用高效液相色譜法測(cè)定甘草浸膏中甘草酸的含量。 本方法適用于生藥與制劑的分析。 |
方法原理: |
取甘草浸膏研細(xì),置50mL容量瓶中,加流動(dòng)相超聲提取,放冷,加流動(dòng)相至刻度,搖勻,濾過,進(jìn)入高效液相色譜儀進(jìn)行色譜分離,用紫外檢測(cè)器檢測(cè)甘草酸的吸收值,計(jì)算出其含量。 |
試劑: |
1.冰醋酸 2.甲醇(色譜純) 3.醋酸銨 |
儀器設(shè)備: |
1 儀器 1.1 高效液相色譜儀 1.2 色譜柱 C18柱(250×4.6mm )。 2 色譜條件 2.1 流動(dòng)相:0.2mol/L醋酸銨溶液 冰醋酸溶液 甲醇=33 1 67 2.3柱溫:28℃ 2.4 流速:1.0mL/min 2.5檢測(cè)波長(zhǎng):250nm |
試樣制備: |
1. 對(duì)照品溶液的制備 精密稱取甘草酸銨對(duì)照品20.9mg,置50ml量瓶中,加流動(dòng)相使溶解并稀釋至刻度,搖勻,得含甘草酸銨411.73μg/ml溶液(相當(dāng)于甘草酸403.3μg/ml),作為對(duì)照品儲(chǔ)備液。 5.3 標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備 分別精密吸取1、2、3、5、8ml于10ml容量瓶中,以流動(dòng)相稀釋至刻度,搖勻,得使成含甘草酸40.33、80.66、120.99、201.65、322.64、4.033μg/ml的濃度的對(duì)照品溶液。 2. 供試品溶液的制備 取甘草浸膏研細(xì),精密稱取粉末約0.1g,置50ml容量瓶中,加流動(dòng)相約40ml,超聲20min,取出,放冷,加流動(dòng)相至刻度,搖勻,濾過,作為供試品溶液。 注:“精密稱取”系指稱取重量應(yīng)準(zhǔn)確至所取重量的千分之一�!熬芰咳 毕抵噶咳◇w積的準(zhǔn)確度應(yīng)符合國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)中對(duì)該體積移液管的精度要求。 |
操作步驟: |
1.標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制 分別吸取各濃度溶液10μl注入高效液相色譜儀,測(cè)定峰面積。以甘草酸量(μg)為橫坐標(biāo),峰面積為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。的制備取續(xù)濾液,精密量取10μl注入高效液相色譜儀,測(cè)定峰面積。以外標(biāo)法計(jì)算含量。 6.2 供試品的測(cè)定 精密量取10ul 注入高效液相色譜儀,測(cè)定峰面積。以外標(biāo)法計(jì)算含量。用紫外檢測(cè)器測(cè)定甘草酸的吸收度,以標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度對(duì)峰面積繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,進(jìn)行線性回歸,得到回歸方程。 2. 供試品的測(cè)定 精密吸取上述供試品溶液10μL注入高效液相色譜儀,用紫外檢測(cè)器測(cè)定甘草酸的吸收度,計(jì)算出其含量。 |
參考文獻(xiàn): |
王紫秋,雷凱琴,包冬香,HPLC法測(cè)定甘草浸膏中甘草酸的含量,浙江化工,2002,33(2):20-21 |