八珍益母丸—芍藥苷的測(cè)定—高效毛細(xì)管電泳法

本方法采用高效毛細(xì)管電泳測(cè)定八珍益母丸中芍藥苷的含量。

本方法適用于八珍益母丸（水蜜丸)。

供試品于錐形瓶中，加50%乙醇浸漬，濃縮，濃縮液進(jìn)入高效毛細(xì)管電泳儀進(jìn)行分離，用紫外吸收檢測(cè)器，于波長(zhǎng)230nm處檢測(cè)芍藥苷的吸收值，計(jì)算出其含量。

1. 甲醇（色譜純)

2.硼砂（分析純)

3.芍藥苷對(duì)照品(中國(guó)藥品生物制品檢定所)

4.八珍益母丸(水蜜丸) (市售品)

1 儀器

1.1 高效毛細(xì)管電泳儀，微孔濾膜(0.45μm) 及過(guò)濾裝置，超純水器

1.2 色譜柱

融熔石英毛細(xì)管柱(未涂漬) 50μm ×50cm。

1.3 紫外吸收檢測(cè)器

2 色譜條件

2.1 流動(dòng)相：50mmol/L 硼砂緩沖液,用氫氧化鈉調(diào)pH為10.6。

2.2 檢測(cè)波長(zhǎng)：230nm

2.3柱溫： 20℃

1 稱(chēng)取供試品

水蜜丸約6g，精密稱(chēng)定。

2 對(duì)照品溶液的制備

精密稱(chēng)取在五氧化二磷減壓干燥器中干燥36h 的芍藥苷10.0mg ,用甲醇定容成濃度為1.0mg/ml 的對(duì)照品儲(chǔ)備液。取儲(chǔ)備液500μl ,置于1ml 容量瓶中,加運(yùn)行緩沖液至刻度,進(jìn)樣,測(cè)定。

3供試品溶液的制備

將供試品加5 g 硅藻土混合, 研細(xì), 置50 mL 具塞錐形瓶中,加50%乙醇40mL，于40℃水浴浸漬4h，時(shí)時(shí)振搖, 濾過(guò), 濾渣用50 %乙醇洗滌6次, 每次10 mL , 洗滌液與濾液合并, 濃縮,殘?jiān)��?0 %乙醇溶解, 轉(zhuǎn)移至10 mL 量瓶中, 用50 %乙醇稀釋至刻度, 搖勻, 即得。

1.標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的繪制

分別取芍藥苷儲(chǔ)備液62.5 、125、250 、500 、1 000μl ,用超純水定容至1ml ,依次進(jìn)樣后,以藥物濃度(C) 對(duì)峰面積與遷移時(shí)間之比值(X) 進(jìn)行回歸。

2.供試品的測(cè)定

運(yùn)行緩沖液:50mmol/L 硼砂緩沖液,用氫氧化鈉調(diào)pH為10.6 ; 操作電壓: 20KV , 極性由正到負(fù);采用壓力進(jìn)樣,壓力進(jìn)樣常數(shù)為10psi×S。運(yùn)行緩沖液和樣品溶液均經(jīng)0.45μm 微孔濾膜過(guò)濾后使用。

毛細(xì)管沖洗方法: 每次開(kāi)機(jī)用超純水沖洗3min , 后用0.1mol/L 氫氧化鈉沖洗3min ,再用超純水沖洗3min ,然后運(yùn)行緩沖液沖洗3min 。每次測(cè)定之間用運(yùn)行緩沖液沖洗1min 。

供試品溶液壓力進(jìn)樣各1nL到高效毛細(xì)管電泳儀，用紫外吸收檢測(cè)器，于波長(zhǎng)230nm處測(cè)定芍藥苷的吸收值，外標(biāo)法計(jì)算出其含量。

陳勇川，朱衛(wèi)民，劉松青.高效毛細(xì)管電泳法測(cè)定八珍丸和八珍益母丸中芍藥苷的含量.中國(guó)藥房，2003，13（7)：425-427