方法名稱:
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方法名稱: |
三妙丸-脫皮甾酮含量的測定-薄層掃描法 |
應(yīng)用范圍: |
本方法采用薄層掃描法測定三妙丸中脫皮甾酮的含量。 本方法適用于三妙丸、牛膝等成藥。 |
方法原理: |
將原藥中的有效成分提取后,所得溶液點樣展開,經(jīng)薄層掃描法測定相應(yīng)峰面積,所得圖譜與對照品圖譜進(jìn)行對比分析,采用外標(biāo)二點法計算三妙丸中脫皮甾酮的含量。 |
試劑: |
1. 甲醇、正丁醇、乙醇、氧化鋁、乙酸乙酯(分析純) 2. 脫皮甾酮對照品 |
儀器設(shè)備: |
1 儀器 1.1 CS-9301雙波長薄層掃描儀(日本島津)(Waters公司) 1.2 PBQ-型薄層鋪板儀(重慶) 2 薄層展開條件 乙酸乙酯:乙醇=4:1 3 薄層掃描條件 3.1波長:雙波長反射法鋸齒掃描,λs=251nm,λR=340nm 3.2狹縫:1.2×1.2mm,SX=3,靈敏度中。 |
試樣制備: |
1 供試品溶液的制備 取干燥至恒重的三妙丸粗粉15g,精密測定,加乙醇150mL,于索氏提取器中水浴提取7小時,過濾后濾液水浴揮至少量時加沸水40mL,冷卻后用水飽和正丁醇萃至近無色時,合并萃取液,水浴上揮散至近干時加入氧化鋁1g,低溫烘干,研細(xì)后裝入制備好的氧化鋁(中性氧化鋁,25℃活化2h)柱中,柱內(nèi)徑0.8cm,柱長7cm,樣品約高1cm,先用乙酸乙酯6mL,洗脫后棄去。再用乙醇洗脫收集黃色洗脫液棄去,收集隨后的無色乙醇洗脫液15mL,揮干,用甲醇定容至2mL,所得溶液作為供試品溶液,待用。 2 對照品溶液的配制 精密稱取脫皮甾酮對照品5.32mg,至5mL容量瓶中,加甲醇溶解并稀釋至刻度,搖勻,所得溶液作為對照品溶液待用。 注:“精密稱取”系指稱取重量應(yīng)準(zhǔn)確至所取重量的千分之一!熬芰咳 毕抵噶咳◇w積的準(zhǔn)確度應(yīng)符合國家標(biāo)準(zhǔn)中對該體積移液管的精度要求。 |
操作步驟: |
1.標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制 用定量毛細(xì)管分別精密吸取對照品溶液2、4、6、8、10μL分別點于同一硅膠薄層板上,用乙酸乙酯-乙醇(4:1)飽和30min后展開,晾干,紫外燈下定位,置薄層掃描儀中按上述掃描條件測定,將峰面積與進(jìn)樣量進(jìn)行線性回歸,標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,得到回歸方程。 2. 供試品的測定 精密吸取上述供試品溶液以及對照品溶液各一定體積,點于同一硅膠薄層板上,用乙酸乙酯(4:1)展開,用外標(biāo)二點法按上述掃描條件進(jìn)行測定。 |
參考文獻(xiàn): |
宋閆軍,尚聰敏. 牛膝及三妙丸中脫皮甾酮的薄層掃描測定.河南中醫(yī)藥學(xué)刊,2000,15(6):9-10. |