方法名稱： |
苦地丁－紫堇靈的測(cè)定－高效液相色譜法 |
應(yīng)用范圍： |
本方法采用高效液相色譜法測(cè)定苦地丁中紫堇靈的含量。 本方法適用于罌粟科植物紫堇Corydalis bungeana Turcz.的干燥全草。 |
方法原理： |
本品加甲醇超聲處理，放冷，補(bǔ)重，搖勻，濾過，續(xù)濾液進(jìn)入高效液相色譜儀進(jìn)行色譜分離，用紫外吸收檢測(cè)器，于波長(zhǎng)289nm處檢測(cè)紫堇靈的吸收值，計(jì)算出其含量。 |
試劑： |
1. 甲醇 2. 0.015mol/L磷酸鹽緩沖液（pH6.7)：取磷酸二氫鉀1.58g和磷酸氫二鉀0.76g，加水1000mL溶解，混勻，用氫氧化鈉試液調(diào)節(jié)pH值至6.7。 |
儀器設(shè)備： |
1 儀器 1.1 高效液相色譜儀 1.2 色譜柱 十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，理論塔板數(shù)按紫堇靈峰計(jì)算應(yīng)不低于6000。 1.3 紫外吸收檢測(cè)器 2色譜條件 2.1流動(dòng)相：甲醇 0.015mol/L磷酸鹽緩沖液（pH6.7)＝70 30 2.2檢測(cè)波長(zhǎng)：289nm 2.3柱溫：室溫 |
試樣制備： |
1. 稱取供試品 精密稱定本品粉末（過三號(hào)篩)0.5g，為供試品。 2. 對(duì)照品溶液的制備 精密稱取紫堇靈對(duì)照品適量，加甲醇制成每1mL含40mg的溶液。 3. 供試品溶液的制備 取本品粉末（過三號(hào)篩)約0.5g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇25mL，密塞，稱定重量，浸泡1小時(shí)，超聲處理（功率250W，頻率33kHz)30分鐘，取出，放冷，再稱定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，續(xù)濾液作為供試品溶液。 |
操作步驟： |
分別精密吸取對(duì)照品溶液和供試品溶液各20mL，注入高效液相色譜儀，用紫外吸收檢測(cè)器于波長(zhǎng)289nm處測(cè)定紫堇靈（C21H21O5N)的峰面積，計(jì)算出其含量。 |
參考文獻(xiàn)： |
中華人民共和國(guó)藥典，國(guó)家藥典委員會(huì)編，化學(xué)工業(yè)出版社，2005版，一部，p139。 |
