牛黃上清膠囊－大黃素的測(cè)定－高效液相色譜法

本方法采用高效液相色譜法測(cè)定牛黃上清膠囊中大黃素的含量。

本方法適用于中成藥牛黃上清膠囊。

本品依次加2.5mol/L硫酸溶液和三氯甲烷加熱回流，蒸干提取液，殘?jiān)�加甲醇溶解，搖勻，濾過，續(xù)濾液進(jìn)入高效液相色譜儀進(jìn)行色譜分離，用紫外吸收檢測(cè)器，于波長(zhǎng)254nm處檢測(cè)大黃素的吸收值，計(jì)算出其含量。

1. 2.5mol/L硫酸溶液

2 .甲醇

3 .三氯甲烷

4 .0.1%磷酸溶液

1 儀器

1.1 高效液相色譜儀

1.2 色譜柱

十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，理論塔板數(shù)按大黃素峰計(jì)算應(yīng)不低于3000。

1.3 紫外吸收檢測(cè)器

2色譜條件

2.1流動(dòng)相：甲醇 0.1%磷酸溶液＝90 10

2.2檢測(cè)波長(zhǎng)：254nm

2.3柱溫：室溫

1. 稱取供試品

取裝量差異項(xiàng)下的本品內(nèi)容物，混勻，取約0.3g，精密稱定，為供試品。

2. 對(duì)照品溶液的制備

精密稱取大黃素對(duì)照品適量，加甲醇制成每1mL含20mg的溶液。

3. 供試品溶液的制備

取裝量差異項(xiàng)下的本品內(nèi)容物，混勻，取約0.3g，精密稱定，加2.5mol/L硫酸溶液20mL，加熱回流2小時(shí)，放冷，加三氯甲烷30 mL，加熱回流1小時(shí)，分取三氯甲烷液，酸液繼續(xù)用三氯甲烷加熱回流3次，每次20 mL，每次1小時(shí)，合并三氯甲烷液，用水洗滌2次，每次40 mL，取三氯甲烷液蒸干，殘?jiān)�用甲醇溶解并轉(zhuǎn)移至25 mL量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，濾過，取續(xù)濾液作為供試品溶液。

分別精密吸取對(duì)照品溶液和供試品溶液各20mL，注入高效液相色譜儀，用紫外吸收檢測(cè)器于波長(zhǎng)254nm處測(cè)定大黃素（C₁₅H₁₀O₅)的峰面積，計(jì)算出其含量。

中華人民共和國(guó)藥典，國(guó)家藥典委員會(huì)編，化學(xué)工業(yè)出版社，2005版，一部，p379。