方法名稱： |
注射用雙黃連（凍干)－連翹苷的測(cè)定－高效液相色譜法 |
應(yīng)用范圍： |
本方法采用高效液相色譜法測(cè)定注射用雙黃連（凍干)中連翹苷的含量。 本方法適用于中成藥注射用雙黃連（凍干)。 |
方法原理： |
供試品用65%乙醇溶解，過(guò)中性氧化鋁柱洗脫，洗脫液經(jīng)稀釋進(jìn)入高效液相色譜儀進(jìn)行色譜分離，用紫外吸收檢測(cè)器，于波長(zhǎng)278nm處檢測(cè)連翹苷的峰面積，計(jì)算出其含量。 |
試劑： |
1.乙醇 2.冰醋酸 3. 乙腈 |
儀器設(shè)備： |
1 儀器 1.1 高效液相色譜儀 1.2 色譜柱 十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，理論塔板數(shù)按連翹苷峰計(jì)應(yīng)不低于4000。 1.3 紫外吸收檢測(cè)器 2 色譜條件 2.1 流動(dòng)相：乙腈 水 冰醋酸 = 25 75 0.1 2.2 檢測(cè)波長(zhǎng)：278nm 2.3 柱溫：室溫 |
試樣制備： |
1. 稱取供試品 取裝量差異項(xiàng)下的本品內(nèi)容物，混勻，取0.1g，精密稱定，為供試品。 2. 對(duì)照品溶液的制備 精密稱取連翹苷對(duì)照品適量，加甲醇制成每1mL含20μg的溶液。 3. 供試品溶液的制備 供試品用65％乙醇5mL分次溶解，加在中性氧化鋁柱 （100~120目，5g，內(nèi)徑約1cm)上，用65％乙醇洗脫，收集洗脫液近25mL，置25mL量瓶中，加65％乙醇至刻度，搖勻，作為供試品溶液。 注：“精密稱取”系指稱取重量應(yīng)準(zhǔn)確至所稱取重量的千分之一。“精密量取”系指量取體積的準(zhǔn)確度應(yīng)符合國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)中對(duì)該體積移液管的精度要求。 |
操作步驟： |
分別精密吸取對(duì)照品溶液10mL和供試品溶液20mL，注入高效液相色譜儀，用紫外吸收檢測(cè)器于波長(zhǎng)278nm處測(cè)定連翹苷（C29H36O15)的峰面積，計(jì)算出其含量。 |
參考文獻(xiàn)： |
中華人民共和國(guó)藥典，國(guó)家藥典委員會(huì)編，化學(xué)工業(yè)出版社，2005版，一部，p505。 |
