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虎杖不同組織部位及其愈傷組織-白藜蘆醇的含量測定方法-HPLC-UV

  
方法名稱:
  虎杖不同組織部位及其愈傷組織-白蘆醇的含量測定-HPLC-UV
應(yīng)用范圍:
  用于虎杖不同組織部位及其愈傷組織中白藜蘆醇的含量測定
方法原理:
 本品預(yù)凍后加乙酸乙酯超聲提取,經(jīng)液相色譜分離,在306nm處測定峰面積,外標(biāo)法計算含量
儀器設(shè)備及實(shí)驗(yàn)條件:
 

儀器設(shè)備  FD-1型真空冷凍干燥儀;AGE-220型萬分之一電光天平;FD-2300型紅外水分儀;B-8200型超聲波清洗儀;RE-540型薄膜旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀;LC-9A型高效液相色譜儀。

色譜條件  色譜柱: Dima Technologies(C18公司),規(guī)格:250mm×4.6mm;流動相: 43.2%的乙腈;流速為:1mL/min;柱溫30℃;檢測器:紫外檢測器,檢測波長為306nm。
試樣制備:
 

對照品溶液的制備

供試品溶液的制備

準(zhǔn)確稱取虎杖根狀莖中不同的組織部位各5.000g(其中髓的質(zhì)量為2.000g),分別加入乙酸乙酯,乙酸乙酯與組織比為901 (mLg,下同),進(jìn)行研磨勻漿,超聲波提取30min,定容至250mL后,靜置于4℃下浸提48h,并采用砂芯漏斗過濾。取1/5濾液在50℃條件下減壓濃縮至干,并用甲醇定容至5mL

將不同虎杖愈傷組織以超純水洗凈表面的培養(yǎng)基,用濾紙吸干表面水分后,置于-35℃的超低溫冰箱中預(yù)冷12h,然后真空冷凍干燥24h。稱取凍干后的愈傷組織0.1000g,研磨,分別加入乙酸乙酯(乙酸乙酯與組織比為90 ∶1)進(jìn)行研磨勻漿,超聲波提取30min后,靜置于4℃中浸提48 h,過濾,并減壓濃縮至干,以甲醇定容到1 mL
操作步驟:
  在選定的色譜條件下,分別吸取對照品和供試品溶液各20μl進(jìn)樣,測定峰面積值,按外標(biāo)法計算含量
附件:
  點(diǎn)擊下載 (解壓密碼:bhskgw.cn)
備注:
 
參考文獻(xiàn):
  雷勇,曹庸 陳雪香,李偉,. 虎杖不同組織部位及其愈傷組織中白藜蘆醇含量的測定,林產(chǎn)化學(xué)與工業(yè). 2007,27(增刊):109~112
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