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人工栽培南方紅豆杉—紫杉醇的測定方法—HPLC-UV

  
方法名稱:
  人工栽培南方紅豆杉—紫杉醇的測定—HPLC-UV
應(yīng)用范圍:
  用于對人工栽培南方紅豆杉枝、葉、皮、種子中紫杉醇含量的測定
方法原理:
 本品細粉用甲醇-二氯甲烷(1∶1)超聲提取,經(jīng)液相色譜儀分離,在227nm測定,外標法計算紫杉醇的含量
儀器設(shè)備及實驗條件:
 

儀器設(shè)備  A lltech 426 型高效液相色譜儀;200型紫外檢測器;Alltech 外置工作站。

色譜條件  色譜柱:A lltima C18柱(5mm×250mm,5 µm);柱溫: 室溫;流動相: 甲醇-水(65∶35);流速: 1mL/min;檢測波長: 227nm; 每次進樣量: 20µL

試樣制備:
 

對照品溶液制備

供試品溶液的制備  將人工栽培南方紅豆杉種子、枝條、葉子和皮于40℃干燥后碾成粉末(過孔徑為0.32 mm的篩),分別精確稱取2.5g于200mL三角瓶中,用100mL混合溶劑浸泡24 h,次日超聲震蕩提取30min,過濾,殘渣用甲醇沖洗3次,合并濾液,30℃下減壓濃縮,提取物用水(50mL×3) 和正己烷(50mL×3) 萃取,水層用二氯甲烷萃取3次,合并二氯甲烷萃取液,然后用活性炭(5g)脫色,過濾,濾液于25℃下減壓干燥,用甲醇1mL溶解,0.45µm微孔濾膜過濾,分別配制好種子、枝條、葉和皮的樣品制備液,

操作步驟:
  精密吸取對照液以及供試品溶液2Oμl,分別注入液相色譜儀,按上述色譜條件測定峰面積,計算含量。
附件:
  點擊下載 (解壓密碼:bhskgw.cn)
備注:
 
參考文獻:
  李俊,牙啟康,蘇小建等.人工栽培南方紅豆杉紫杉醇的含量分析. 廣西師范大學學報(自然科學版).2005,23(2):68~70
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