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川黃柏-小檗堿、黃柏堿的含量測定方法-HPLC-UV

  
方法名稱:
  川黃柏-小檗堿、黃柏堿的含量測定-HPLC-UV
應用范圍:
  用于川黃柏中小檗堿、黃柏堿的含量測定
方法原理:
 本品細粉加甲醇-鹽酸(100∶1)超聲提取,經(jīng)液相色譜分離,在350nm(小檗堿)、286nm(黃柏堿)處測定峰面積,外標法計算含量
儀器設(shè)備及實驗條件:
 

儀器設(shè)備  LC-10A高效液相色譜儀;SPD-10A檢測器;C-R7Aeplus處理器(日本島津公司)。

色譜條件  色譜柱:Luna C18 (2)色譜柱(150.0mm ×6.0mm,5μm,Phenomenex公司);小檗堿的流動相:甲醇-磷酸緩沖液-十二烷基硫酸鈉(60∶40∶0.1);柱溫:30℃;檢測波長:350nm;流速1ml·min-1;黃柏堿的流動相:乙腈-0.4mol·L-1氯化(12∶88),柱溫:30℃;檢測波長:286nm;流速1ml·min- 1 。

試樣制備:
 

對照品溶液的制備  取小檗堿對照品和黃柏堿對照品適量,精密稱定,分別用甲醇配成58.0μg·ml-1小檗堿和159.2μg·ml-1黃柏堿對照品溶液

供試品溶液的制備  精密稱取各供試品粉末0.2g(過40目篩),甲醇-鹽酸(100∶1)10ml超聲振蕩60min,過濾,精密量取續(xù)濾液0.5ml,減壓旋蒸至干,加入15ml甲醇溶解,0.45μm微孔濾膜過濾,作為測定小檗堿供試液。另精密稱取各供試品粉末0.1g(過40目篩),甲醇10ml浸泡過夜(大于12h),超聲振蕩30min,過濾,續(xù)濾液用0.45μm微孔濾膜過濾。作為測定黃柏堿供試液。

操作步驟:
  在選定的色譜條件下,分別吸取對照品和供試品溶液各5μl進樣,測定峰面積值,按外標法計算含量
附件:
  點擊下載 (解壓密碼:bhskgw.cn)
備注:
 
參考文獻:
  彭愛華,楊宏,楊林等.RP-HPLC測定不同采收期川黃柏中小檗堿、黃柏堿的含量.華西藥學雜志. 2006,21(4):377~379
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