方法名稱： |
黃柏-小檗堿與黃柏堿的含量測定-HPLC-UV |
應(yīng)用范圍： |
用于黃柏中小檗堿與黃柏堿的含量測定 |
方法原理： |
本品細(xì)粉加1%醋酸-甲醇溶液水浴回流提取，經(jīng)液相色譜分離，分別在284nm和345nm處測定峰面積，按外標(biāo)法計算含量。 |
儀器設(shè)備及實驗條件： |
儀器設(shè)備 HP1100 Series 高效液相色譜儀；HP G1315A二極管陣列檢測器；HP Chem Station 4.0 色譜工作站。 色譜條件 Merck-Lichrospher RP-C18色譜柱 (250mm×4.6mm，5μm)，流動相為乙腈-0.3%磷酸二乙胺梯度洗脫{15/85（0～10min)；35/65（10～25min)}，檢測波長：284nm（用于檢測黃柏堿)；345 nm（用于檢測小檗堿)；流速：0.8ml·min - 1；柱溫：25℃。 |
試樣制備： |
對照品溶液的制備 精密稱取黃柏堿、小檗堿對照品適量，加甲醇溶解并定容，分別制成濃度為黃柏堿128μg·mL-1，小檗堿408μg·mL-1 的溶液，備用。精密吸取上述對照品溶液各1mL，置2mL 容量瓶中，充分混勻，制成對照品混和溶液，即得。 供試品溶液的制備 取黃柏藥材粉末約0.5g，精密稱定，加1%醋酸-甲醇溶液30ml，稱重，水浴回流提取2次，每次1h，冷卻后稱重，加溶劑補(bǔ)足重量，過濾，合并濾液，水浴蒸干溶劑，殘渣以甲醇溶解并定容至10ml，即得。 |
操作步驟： |
在選定的色譜條件下，分別吸取對照品和供試品溶液各10μl進(jìn)樣，測定峰面積值，按外標(biāo)法計算含量。 |
附件： |
點擊下載 (解壓密碼:bhskgw.cn) |
備注： |
|
參考文獻(xiàn)： |
祝晨，林朝展，莫建霞.HPLC測定黃柏藥材中小檗堿與黃柏堿的含量. 中藥新藥與臨床藥理. 2004，15(4)：262～264 |
