一種液體深層發(fā)酵生產(chǎn)大團(tuán)囊蟲草菌體的方法
公開(公告)號(hào)
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CN1302101C
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公開(公告)日
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2007.02.28
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申請(qǐng)(專利)號(hào)
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CN200510050196.6
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申請(qǐng)日期
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2005.06.22
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專利名稱
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一種液體深層發(fā)酵生產(chǎn)大團(tuán)囊蟲草菌體的方法
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主分類號(hào)
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C12N1/14(2006.01)I
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分類號(hào)
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C12N1/14(2006.01)I
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分案原申請(qǐng)?zhí)? |
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優(yōu)先權(quán)
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申請(qǐng)(專利權(quán))人
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浙江大學(xué)
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發(fā)明(設(shè)計(jì))人
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李永泉;鄭 靜
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地址
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310027浙江省杭州市玉古路20號(hào)
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頒證日
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國際申請(qǐng)
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進(jìn)入國家日期
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專利代理機(jī)構(gòu)
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杭州中成專利事務(wù)所有限公司
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代理人
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唐銀益
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國省代碼
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浙江;33
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主權(quán)項(xiàng)
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一種液體深層發(fā)酵生產(chǎn)大團(tuán)囊蟲草菌體的方法,其特征在于,以人工分離培養(yǎng)到的大團(tuán)囊蟲草純菌株(Cordycepsophioglossoides)為出發(fā)菌種,依次經(jīng)固體斜面培養(yǎng),搖床種子培養(yǎng)和發(fā)酵培養(yǎng)完成; 所述大團(tuán)囊蟲草純菌株保藏號(hào)是CGMCC No.1146; 所述固體斜面培養(yǎng)的方法為:從保藏菌種接種到配制的斜面培養(yǎng)基上,溫度20~30℃,培養(yǎng)200~240小時(shí);其中每1000毫升斜面培養(yǎng)基中包括:馬鈴薯100~300克、蔗糖或葡萄糖10~30克和瓊脂15~25克,培養(yǎng)基的pH值調(diào)為4.8~6.5; 所述搖床種子培養(yǎng)的方法為:菌種固體斜面培養(yǎng)200~240小時(shí)后,挑取菌絲體接種于裝有液體種子培養(yǎng)基的搖瓶中,在20~30℃培養(yǎng),轉(zhuǎn)速150~200rpm,培養(yǎng)60~72小時(shí);其中每1000毫升種子培養(yǎng)基中包括:蔗糖20~60克、酵母粉或酵母膏10~50克、蛋白胨10~50克、MgSO4·7H2O0.1~0.5克和KH2PO40.1~0.5克; 所述發(fā)酵培養(yǎng)采用液體深層通氣發(fā)酵培養(yǎng),其方法是:液體種子搖床培養(yǎng)60~72小時(shí)后接種至裝有發(fā)酵培養(yǎng)基的發(fā)酵罐中,接種量5~15%(V/V)、保持罐溫20~30℃、罐壓0.4~0.8kg/cm,攪拌速率100~250rpm,通氣量1∶0.3~1∶1.2,發(fā)酵時(shí)間85~110小時(shí);其中每1000毫升發(fā)酵培養(yǎng)基中包括:蔗糖50~100克、酵母粉或酵母膏10~60克,蛋白水解液20~100毫升、MgSO4·7H2O 0.2~1克和KH2PO4 0.2~1克,培養(yǎng)基的pH值調(diào)為4.8~6.5。
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摘要
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本發(fā)明公開了一種液體深層發(fā)酵生產(chǎn)大團(tuán)囊蟲草菌體的方法,以大規(guī)模液體深層發(fā)酵培養(yǎng)大團(tuán)囊蟲草菌體(Cordyceps ophioglossoides)為目標(biāo)。以人工分離培養(yǎng)到的大團(tuán)囊蟲草純菌株為出發(fā)菌種,經(jīng)斜面培養(yǎng)、搖瓶種子培養(yǎng)、最后到發(fā)酵罐培養(yǎng),發(fā)酵液中的菌絲體以干重計(jì)可達(dá)2~3%的。本發(fā)明中公開的液體種子培養(yǎng)基和發(fā)酵培養(yǎng)基分別由蔗糖、酵母粉(膏)、蛋白胨、鎂鹽、鉀鹽和蔗糖、酵母粉(膏)、蛋白水解液、鎂鹽、鉀鹽組成。兩種培養(yǎng)基分別適合液體種子階段培養(yǎng)和深層液體通氣培養(yǎng)大團(tuán)囊蟲草菌,合理滿足了大團(tuán)囊蟲草菌不同發(fā)酵時(shí)期所需的營養(yǎng)物質(zhì),促進(jìn)了菌體的生長和繁殖,提高了菌的活性。
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國際公布
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評(píng)論加載中...