公開(公告)號
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CN1298845C
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公開(公告)日
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2007.02.07
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申請(專利)號
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CN200510097996.3
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申請日期
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2005.09.02
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專利名稱
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表達禽流感病毒H5亞型HA蛋白的重組新城疫LaSota弱毒疫苗株
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主分類號
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C12N7/01(2006.01)I
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分類號
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C12N7/01(2006.01)I;C12N15/12(2006.01)I;A61K39/12(2006.01)I
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分案原申請?zhí)? |
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優(yōu)先權(quán)
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申請(專利權(quán))人
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中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院哈爾濱獸醫(yī)研究所
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發(fā)明(設(shè)計)人
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步志高;陳化蘭
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地址
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150001黑龍江省哈爾濱市市南崗區(qū)馬端街427號
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頒證日
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國際申請
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進入國家日期
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專利代理機構(gòu)
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中科專利商標代理有限責(zé)任公司
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代理人
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程金山
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國省代碼
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黑龍江;23
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主權(quán)項
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一種生產(chǎn)表達編碼野生型或突變型禽流感病毒H5亞型血凝素(HA)蛋白的基因的重組新城疫LaSota弱毒疫苗株的方法,該方法包括: (1)構(gòu)建轉(zhuǎn)錄質(zhì)粒,其中所述轉(zhuǎn)錄質(zhì)粒是pBRN-FL-H5wtHA或pBRN-FL-H5mutHA,其核苷酸序列分別如圖11和13所示; (2)構(gòu)建轉(zhuǎn)錄輔助質(zhì)粒,其中所述轉(zhuǎn)錄輔助質(zhì)粒包括如下三個質(zhì)粒:包括編碼所述新城疫LaSota弱毒疫苗株的核蛋白(NP)的cDNA序列的質(zhì)粒、包括編碼所述新城疫LaSota弱毒疫苗株的磷酸蛋白(P)的cDNA序列的質(zhì)粒、和包括編碼所述新城疫LaSota弱毒疫苗株的大聚合酶蛋白(L)的cDNA序列的質(zhì)粒; (3)將所述轉(zhuǎn)錄質(zhì)粒和轉(zhuǎn)錄輔助質(zhì)粒共轉(zhuǎn)染所述病毒復(fù)制許可的宿主細胞,培養(yǎng)轉(zhuǎn)染后的宿主細胞; (4)收獲上清液,過濾后繼續(xù)敏感細胞傳代或接種雞胚尿囊腔救獲重組病毒株, 其中所述宿主細胞是穩(wěn)定表達T7聚合酶的細胞系。
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摘要
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本發(fā)明涉及一種表達野生型或突變型禽流感病毒H5亞型血凝素(HA)蛋白的重組新城疫LaSota弱毒疫苗株,更具體地,重組新城疫LaSota弱毒疫苗株是rLasota-H5wtHA和rLasota-H5mutHA。本發(fā)明還公開了制備所述重組新城疫LaSota弱毒疫苗株的方法和該重組新城疫LaSota弱毒疫苗株在制備預(yù)防禽流感的疫苗中的應(yīng)用。
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國際公布
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