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海螵蛸多糖CPS-1及其制備方法和用途

公開(公告)號(hào) CN1837243A  
公開(公告)日 2006.09.27  
申請(qǐng)(專利)號(hào) CN200510110082.6  
申請(qǐng)日期 2005.11.07  
專利名稱 海螵蛸多糖CPS-1及其制備方法和用途  
主分類號(hào) C08B37/00(2006.01)I  
分類號(hào) C08B37/00(2006.01)I;A61K31/715(2006.01)I;A61P1/04(2006.01)I  
分案原申請(qǐng)?zhí)?  
優(yōu)先權(quán)  
申請(qǐng)(專利權(quán))人 中國(guó)人民解放軍軍第二軍醫(yī)大學(xué)  
發(fā)明(設(shè)計(jì))人 張建鵬;馮偉華;焦炳華;劉軍華;魏江洲;王 俊;徐紅麗  
地址 200433上海市楊浦區(qū)翔殷路800號(hào)  
頒證日  
國(guó)際申請(qǐng)  
進(jìn)入國(guó)家日期  
專利代理機(jī)構(gòu) 上海新天專利代理有限公司  
代理人 衷誠(chéng)宣  
國(guó)省代碼 上海;31  
主權(quán)項(xiàng) 海螵蛸多糖CPS-1的制備方法,步驟如下: (1)制備水提取物溶液:將海螵蛸固體粉碎成粉末,加水煮沸8-10小時(shí),趁熱抽濾得到濾液,將濾液濃縮,離心棄沉淀;上清液用氯仿與正丁醇的體積比為4∶1的sevage法萃取多次除蛋白,至水相不含蛋白質(zhì),得到水提取物溶液; (2)制備海螵蛸多糖粗品:將上述提取物溶液加乙醇沉淀過夜,離心棄上清,將沉淀復(fù)溶于蒸餾水,離心去不溶物,將上清再次醇沉,離心去上清;沉淀加蒸餾水溶解,流水透析至少36小時(shí);將透析液冷凍干燥,得海螵蛸多糖粗品; (3)分離純化,制備海螵蛸多糖CPS-1:將所得海螵蛸多糖粗品熱水浴中溶于蒸餾水,離心收集上清,將不溶物再次熱水浴中溶于蒸餾水,離心棄沉淀,將兩次上清液合并,上樣于DEAESepharoseF.F離子交換柱,依次用蒸餾水、0.3mol/L氯化鈉溶液進(jìn)行洗脫,并用自動(dòng)部分收集儀將洗脫液依次收集于試管中;使用體積比5∶1的硫酸-苯酚法分別對(duì)各個(gè)試管中的洗脫液取樣進(jìn)行顯色反應(yīng),然后用分光光度計(jì)測(cè)480nm處OD值;依次以管號(hào)為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),作洗脫曲線;根據(jù)洗脫曲線,將氯化鈉溶液洗脫峰部位的洗脫液合并并且濃縮之,流水透析至少36小時(shí),冷凍干燥,得淡黃色固體;將淡黃色固體復(fù)溶于蒸餾水,用同樣方法依次上樣于SephacrylS-300分子凝膠柱和SepharoseCL-6B凝膠柱進(jìn)行分離純化,合并洗脫峰部位的洗脫液,然后取樣用HPLC檢測(cè)純度,觀察電腦生成的洗脫曲線,若為單一對(duì)稱峰,表明純度好,如果不是單一對(duì)稱峰,則將洗脫液濃縮后,再次用SephacrylS-300分子凝膠柱和SepharoseCL-6B凝膠柱進(jìn)行分離純化,直到HPLC的洗脫曲線為單一對(duì)稱峰;再將該洗脫液濃縮后冷凍干燥,即得本發(fā)明海螵蛸多糖CPS-1。  
摘要 本發(fā)明涉及醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域,是從海螵蛸中提取的多糖CPS-1及其制備方法和用途。制法為:將海螵蛸粉末水煮得提取液;將提取液醇沉,透析,冷凍干燥,得海螵蛸多糖粗品;再依次用DEAESepharose F.F離子交換柱、Sephacryl S-300分子凝膠柱、Sepharose CL-6B凝膠柱分離純化,得本發(fā)明海螵蛸多糖CPS-1。經(jīng)動(dòng)物實(shí)驗(yàn),本發(fā)明多糖CPS-1具有治療潰瘍性結(jié)腸炎的作用,因此可用于制備治療潰瘍性結(jié)腸炎的藥物。  
國(guó)際公布  
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