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睪丸特異性蛋白50人源抗體的制備及用途

公開(公告)號(hào) CN1824678A  
公開(公告)日 2006.08.30  
申請(qǐng)(專利)號(hào) CN200510016591.2  
申請(qǐng)日期 2005.02.25  
專利名稱 睪丸特異性蛋白50人源抗體的制備及用途  
主分類號(hào) C07K16/18(2006.01)I  
分類號(hào) C07K16/18(2006.01)I;A61K39/395(2006.01)I;A61P35/00(2006.01)I;G01N33/577(2006.01)I  
分案原申請(qǐng)?zhí)?  
優(yōu)先權(quán)  
申請(qǐng)(專利權(quán))人 李玉新;徐浩鵬;鮑永利  
發(fā)明(設(shè)計(jì))人 李玉新;鮑永利;徐浩鵬;劉 洋;魏景艷;李 惟;烏 垠;孟祥穎;張 靖;單繼東;易靜雯  
地址 130021吉林省長(zhǎng)春市人民大街5268號(hào)  
頒證日  
國(guó)際申請(qǐng)  
進(jìn)入國(guó)家日期  
專利代理機(jī)構(gòu) 吉林長(zhǎng)春新紀(jì)元專利代理有限責(zé)任公司  
代理人 陳宏偉  
國(guó)省代碼 吉林;22  
主權(quán)項(xiàng) 一種人源抗體AI,其基酸序列包含免疫球蛋白重鏈可變區(qū)和輕鏈可變區(qū),二者通過連接鏈連接,所說的人源抗體與人TSP50蛋白有較強(qiáng)的結(jié)合活性,其氨基酸序列為: MAEVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYAMSWVRQAPGKGLEWV50 SAISGSGGSTYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLREDTAVYYCARR100 QRLRHYANNWGQGTLVTVSSGGGGSGGGGSGGSALSSELTQDPAVSVALG150 QTVRITCQGDSLRSYYASWYQQKPGQAPVLVIYGKNNRPSGIPDRFSGSS200 SGNTASLTITGAQAEDEADYYCNSRDSSGFVFGGGTKLTVVLGAA245 其中氨基酸殘基77被P所替換的AI序列, 其中氨基酸殘基102-108(LRHYANN)被KSGRK所替換的AI序列, 其中氨基酸殘基99-108(RQRLRHYANN)被VRHRASRANL所替換的AI序列, 其中氨基酸殘基230被K或RV所替換的AI序列。  
摘要 本發(fā)明提供一種睪丸特異性蛋白50人源單鏈抗體的制備方法,利用噬菌體抗體呈現(xiàn)技術(shù),以人睪丸特異性蛋白50為靶抗原,通過免疫親和篩選法對(duì)重組噬菌體人抗體可變區(qū)基因文庫(kù)進(jìn)行篩選。分離并克隆TSP50特異性單鏈抗體基因AI、AII和C8。繼而把單鏈抗體基因AI、AII和C8分別插入到含有組氨酸尾的原核表達(dá)載體PelB中,轉(zhuǎn)化Rosetta菌,通過IPTG誘導(dǎo)表達(dá)外源蛋白,將菌體裂解后用Ni-NTA柱親和層析,得到純化的單鏈抗體,ELISA鑒定其可以和TSP50全蛋白和50肽特異結(jié)合;并用基因工程的手段將此人源單鏈抗體大量表達(dá)。本發(fā)明還公開了睪丸特異性蛋白50人源單鏈抗體在女性乳腺癌等TSP50相關(guān)性疾病的診斷和治療用途。  
國(guó)際公布  
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