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一種尖吻蝮蛇血凝酶制備方法與用途

公開(公告)號 CN1766100A  
公開(公告)日 2006.05.03  
申請(專利)號 CN200510085173.9  
申請日期 2005.07.25  
專利名稱 一種尖吻蝮蛇血凝酶制備方法與用途  
主分類號 C12N9/74(2006.01)I  
分類號 C12N9/74(2006.01)I;A61K38/48(2006.01)I;A61P7/04(2006.01)I  
分案原申請?zhí)?  
優(yōu)先權  
申請(專利權)人 康辰醫(yī)藥發(fā)展有限公司  
發(fā)明(設計)人 王錫娟  
地址 100085北京市海淀區(qū)上地三街九號嘉華大廈A座七層  
頒證日  
國際申請  
進入國家日期  
專利代理機構  
代理人  
國省代碼 北京;11  
主權項 一種尖吻蝮蛇血凝酶的制備方法,其特征在于:該方法包括以下步驟: A.尖吻蝮蛇粗毒用磷酸緩沖液溶解離心,透析,經(jīng)DEAE-Sepharose層析,不同溶液的NaCl溶液梯度洗脫,收集得到組分; B.再透析在經(jīng)DEAE-Sepharose層析,得到精制的純度尖吻蝮蛇血凝酶; C.收精制的尖吻蝮蛇血凝酶,經(jīng)SephadexG25層析柱脫鹽后,得到尖吻蝮蛇血凝酶原料藥; D.收所得的尖吻蝮蛇血凝酶原料藥加賦形劑過濾、分裝和冷凍干燥,制得注射用尖吻蝮蛇血凝酶。  
摘要 本發(fā)明公開了一種尖吻蝮蛇血凝酶的制備方法與用途。它包括溶解蛇毒、低溫離心、透析、DEAE-Sepharose FF層析、透析、DEAE-SepharoseFF層析及Sephadex G25層析步驟。它從中國特有的尖吻蝮蛇蛇毒中分離純化得到的尖吻蝮蛇血凝酶,是由A和B兩個亞基組成,具有促進血液凝固和止血作用。A和B兩個亞基的分子量為15.0KD和14.2KD。A亞基N端第一至25位的基酸序列為DCSSGWSSYEGHCYKVFKQSKTWTA,B亞基N端第一至25位的氨基酸序列為DCPSDWSSYECHCYKPDEPKTWEDA。尖吻蝮蛇血凝酶可用于臨床上人的各種類型出血的止血。  
國際公布  
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