公開(公告)號
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CN1291015C
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公開(公告)日
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2006.12.20
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申請(專利)號
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CN200410098041.5
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申請日期
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2004.12.02
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專利名稱
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重組生產(chǎn)和純化蛋白激酶的改進(jìn)方法
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主分類號
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C12N9/12(2006.01)I
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分類號
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C12N9/12(2006.01)I;C12N15/11(2006.01)I
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分案原申請?zhí)? |
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優(yōu)先權(quán)
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2003.12.2 EP 03027755.2
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申請(專利權(quán))人
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霍夫曼—拉羅奇有限公司
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發(fā)明(設(shè)計)人
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胡貝特·赫騰貝格爾;康拉德·霍諾爾德;克里斯蒂安·克萊因;彼得拉·呂格爾
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地址
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瑞士巴塞爾
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頒證日
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國際申請
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進(jìn)入國家日期
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專利代理機構(gòu)
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中科專利商標(biāo)代理有限責(zé)任公司
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代理人
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程金山
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國省代碼
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瑞士;CH
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主權(quán)項
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一種重組生產(chǎn)和純化蛋白激酶的方法,所述蛋白激酶選自由酪氨酸蛋白激酶和絲氨酸和蘇氨酸激酶組成的組,所述方法通過在微生物宿主細(xì)胞中表達(dá)編碼所述激酶的核酸,形成包含所述激酶的內(nèi)含體,分離,溶解,復(fù)性,和純化所述激酶來進(jìn)行,其特征在于所述純化是通過在至少70%所述正確折疊的蛋白激酶不結(jié)合所述吸附劑的條件下與疏水吸附劑進(jìn)行疏水相互作用而進(jìn)行和回收不結(jié)合所述吸附劑的蛋白激酶,其中所述條件的特征在于將所述激酶施加到包含至少0.1M KCl或NaCl的水溶液中的疏水吸附劑上,并且其中所述疏水吸附劑是固體或凝膠材料,其由用疏水殘基修飾的纖維素、交聯(lián)葡聚糖、交聯(lián)瓊脂糖組成。
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摘要
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一種重組生產(chǎn)和純化蛋白激酶的方法,所述蛋白激酶選自由酪氨酸蛋白激酶和絲氨酸/蘇氨酸激酶組成的組,所述方法通過在微生物宿主細(xì)胞中表達(dá)編碼所述激酶的核酸,形成包含所述激酶的內(nèi)含體,分離,溶解,復(fù)性,和純化所述激酶來進(jìn)行,其特征在于所述純化是通過在至少70%所述蛋白激酶不結(jié)合所述吸附劑的條件下與疏水吸附劑進(jìn)行疏水相互作用而進(jìn)行和回收不結(jié)合所述吸附劑的蛋白激酶。
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國際公布
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