公開(公告)號(hào)
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CN1723283A
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公開(公告)日
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2006.01.18
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申請(qǐng)(專利)號(hào)
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CN200480001950.0
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申請(qǐng)日期
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2004.01.07
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專利名稱
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用于生產(chǎn)重組多克隆蛋白質(zhì)的方法
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主分類號(hào)
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C12N15/10(2006.01)I
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分類號(hào)
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C12N15/10(2006.01)I;C12N5/10(2006.01)I;C12N15/85(2006.01)I;C12N15/64(2006.01)I;C07K16/00(2006.01)I;C07K14/705(2006.01)I;A61K39/395(2006.01)I;A61K38/17(2006.01)I
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分案原申請(qǐng)?zhí)? |
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優(yōu)先權(quán)
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2003.1.7 DK PA200300008;2003.1.7 US 60/438,403;2003.6.5 US 60/476,018
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申請(qǐng)(專利權(quán))人
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西福根有限公司
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發(fā)明(設(shè)計(jì))人
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J·S·豪魯姆;F·C·維比爾格;V·W·柯爾基;J·莎倫;楊秋英
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地址
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丹麥靈比
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頒證日
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國際申請(qǐng)
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2004-01-07 PCT/DK2004/000001
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進(jìn)入國家日期
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2005.07.07
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專利代理機(jī)構(gòu)
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中國國際貿(mào)易促進(jìn)委員會(huì)專利商標(biāo)事務(wù)所
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代理人
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程 泳
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國省代碼
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丹麥;DK
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主權(quán)項(xiàng)
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產(chǎn)生細(xì)胞集合的方法,所述細(xì)胞集合適合作為重組多克隆生產(chǎn)型細(xì)胞系,所述方法包括:a)提供了載體文庫,所述載體文庫包含不同核酸序列的群體,其中各所述載體包括:1)單拷貝的獨(dú)特核酸序列,所述核酸序列編碼多克隆蛋白質(zhì)的獨(dú)特成員,所述多克隆蛋白質(zhì)包含與特定抗原結(jié)合的不同成員;和2)一個(gè)或多個(gè)重組酶識(shí)別序列;b)將所述載體文庫導(dǎo)入宿主細(xì)胞系,其中所述宿主細(xì)胞系的各單個(gè)細(xì)胞的基因組包含重組酶識(shí)別序列,所述重組酶識(shí)別序列位于其基因組的單個(gè)特異性位點(diǎn),并與載體上的重組酶識(shí)別序列匹配。c)確保在所述細(xì)胞中存在一個(gè)或更多的重組酶,以使步驟(a)中的不同核酸序列位點(diǎn)特異性地整合到宿主細(xì)胞系的細(xì)胞中,其中所述一個(gè)或更多的重組酶是i)由導(dǎo)入了所述核酸序列的所述細(xì)胞表達(dá)的;ii)由步驟a中的載體有效地編碼;iii)通過第二載體表達(dá)而提供;或iv)作為蛋白質(zhì)提供給所述細(xì)胞;和d)選擇細(xì)胞,所述細(xì)胞含有來自所述不同核酸序列的文庫的整合的拷貝。
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摘要
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本發(fā)明涉及生產(chǎn)重組多克隆蛋白質(zhì)組合物,特別是重組多克隆抗體組合物的方法。所述方法包括:獲取用不同核酸序列的文庫轉(zhuǎn)染的細(xì)胞的集合,其中集合中每個(gè)細(xì)胞都由所述文庫中的一個(gè)成員轉(zhuǎn)染并且能夠表達(dá)該成員,所述成員編碼不同的結(jié)合特定抗原的多克隆蛋白質(zhì)成員并且在所述集合的個(gè)體細(xì)胞基因組內(nèi)位于相同的單一位點(diǎn),其中所述核酸序列不是天然地與集合中所述細(xì)胞相聯(lián)系。對(duì)所述細(xì)胞在適合于表達(dá)所述多克隆蛋白質(zhì)的條件下進(jìn)行培養(yǎng),所述多克隆蛋白質(zhì)從所述細(xì)胞或培養(yǎng)上清液中獲得。所述核酸序列通過使用用于位點(diǎn)特異性整合的載體文庫轉(zhuǎn)染而導(dǎo)入細(xì)胞內(nèi)。本發(fā)明方法適合用于生產(chǎn)重組多克隆抗體,因此可以得到優(yōu)于血漿來源治療性免疫球蛋白產(chǎn)物的替代品。
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國際公布
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2004-07-22 WO2004/061104 英
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