糞產(chǎn)堿桿菌青霉素G酰化酶在大腸桿菌中的高效表達(dá)
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公開(公告)號
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CN1244699C
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公開(公告)日
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2006.03.08
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申請(專利)號
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CN200310108792.6
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申請日期
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2003.11.21
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專利名稱
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糞產(chǎn)堿桿菌青霉素G�；冈诖竽c桿菌中的高效表達(dá)
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主分類號
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C12N15/52(2006.01)I
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分類號
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C12N15/52(2006.01)I;C12N15/63(2006.01)I;C12N1/20(2006.01)I;C12R1/19(2006.01)N
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分案原申請?zhí)? |
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優(yōu)先權(quán)
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申請(專利權(quán))人
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中國科學(xué)院上海生命科學(xué)研究院
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發(fā)明(設(shè)計(jì))人
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袁中一;楊志建;蔡 謹(jǐn)
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地址
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200031上海市岳陽路320號
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頒證日
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國際申請
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進(jìn)入國家日期
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專利代理機(jī)構(gòu)
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上海智信專利代理有限公司
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代理人
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肖劍南
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國省代碼
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上海;31
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主權(quán)項(xiàng)
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含有糞產(chǎn)堿桿菌青霉素G酰化酶基因，即AfPGA基因，及其信號肽核苷酸序列的重組表達(dá)質(zhì)粒psmlfpga，其特征在于，所述表達(dá)質(zhì)粒由trc啟動(dòng)子、AfPGA基因及其信號肽核苷酸序列、四環(huán)素抗性基因和p15a復(fù)制子連接而成。
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摘要
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本發(fā)明公開了一種糞產(chǎn)堿桿菌青霉素G酰化酶(AfPGA)高效表達(dá)質(zhì)粒psmlfpga的構(gòu)建方法；利用該方法得到的質(zhì)粒psmlfpga轉(zhuǎn)化大腸桿菌宿主DH5α，得到大腸桿菌基因工程菌株CGMCC No.1023，其不需誘導(dǎo)便能高效表達(dá)AfPGA；本發(fā)明還公開了一種用于上述大腸桿菌基因工程菌的發(fā)酵培養(yǎng)基的配方，其采用糊精或淀粉作為發(fā)酵培養(yǎng)基主要碳源，可以大大提高重組蛋白的生產(chǎn)率；經(jīng)搖瓶發(fā)酵，青霉素G�；冈贒H5α/psmlfpga中的表達(dá)水平可達(dá)3500U/L。
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國際公布
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