公開(公告)號 | CN1727470A |
公開(公告)日 | 2006.02.01 |
申請(專利)號 | CN200410021560.1 |
申請日期 | 2004.07.27 |
專利名稱 | 重組復合干擾素工程菌的構建方法 |
主分類號 | C12N1/21(2006.01)I |
分類號 | C12N1/21(2006.01)I;C12N15/20(2006.01)I;C12N15/70(2006.01)I |
分案原申請?zhí)? | |
優(yōu)先權 | |
申請(專利權)人 | 遼寧衛(wèi)星生物制品研究所(有限公司) |
發(fā)明(設計)人 | 陳林生;時 彪 |
地址 | 110044遼寧省沈陽市大東區(qū)東站街51-3號 |
頒證日 | |
國際申請 | |
進入國家日期 | |
專利代理機構 | 沈陽科威專利代理有限責任公司 |
代理人 | 張述學 |
國省代碼 | 遼寧;21 |
主權項 | 一種重組復合干擾素工程菌的構建方法,其特征是:將含重組復合干擾素DNA序列的雜交質粒,轉入大腸桿菌K12,進行擴增雜交質粒,經過培養(yǎng)傳代篩選抗四環(huán)素但對氨卞青霉素敏感的細菌克隆,采用雜交翻譯法挑選含有重組復合干擾素cDNA的克隆,將重組復合干擾素cDNA克隆轉入表達載體在大腸桿菌中進行高效表達。 |
摘要 | 一種重組復合干擾素工程菌的構建方法,其特征是將含重組復合干擾素DNA序列的雜交質粒,轉入大腸桿菌K12,進行擴增雜交質粒,經過篩選抗四環(huán)素但對氨卞青霉素敏感的細菌克隆,采用雜交翻譯法挑選含有重組復合干擾素cDNA的克隆,將重組復合干擾素cDNA克隆轉入表達載體在大腸桿菌中進行高效表達。本發(fā)明的優(yōu)點是構建的基因工程菌能夠在LB培養(yǎng)基或M9培養(yǎng)基中生長良好。產物以包含體形式存在于細胞內,外源基因最大表達量可占細胞總蛋白的50%。生產中,可以用乳糖作為誘導劑,降低發(fā)酵成本。該工程菌所表達的產物,臨床研究表明,對治療病毒性肝炎療效穩(wěn)定,提高療效,使用的劑量低,減少副反應,使用上更為廣泛和方便。 |
國際公布 |