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藍(lán)舌病病毒VP7基因重組表達(dá)質(zhì)粒載體、VP7表達(dá)抗原以及制備方法

公開(公告)號 CN1563383A  
公開(公告)日 2005.01.12  
申請(專利)號 CN200410008748.2  
申請日期 2004.03.17  
專利名稱 藍(lán)舌病病毒VP7基因重組表達(dá)質(zhì)粒載體、VP7表達(dá)抗原以及制備方法  
主分類號 C12N15/46  
分類號 C12N15/46;C12N15/62;C12N15/63;G01N33/53;A61K39/15  
分案原申請?zhí)?  
優(yōu)先權(quán)  
申請(專利權(quán))人 云南出入境檢驗(yàn)檢疫局檢驗(yàn)檢疫技術(shù)中心  
發(fā)明(設(shè)計(jì))人 花群義;徐自忠;董俊;楊晶焰;楊云慶;周曉黎;賈建軍;肖榮海;龍忠保  
地址 650228云南省昆明市滇池路盧家地  
頒證日  
國際申請  
進(jìn)入國家日期  
專利代理機(jī)構(gòu) 云南派特律師事務(wù)所  
代理人 張怡  
國省代碼 云南;53  
主權(quán)項(xiàng) 一種藍(lán)舌病病毒VP7基因重組表達(dá)質(zhì)粒載體,其特征在于命名為pBAD-B5重組表達(dá)質(zhì)粒載體,其表達(dá)VP7融合蛋白的核苷酸序列為:gacactatcgctgcaagagcacttactgtgatgcgagcatgtgctacgcttcaagaagcaagaattgtgttggaagctaacgtgatggagatactggggatagcaatcaacagatataatggattaactttacgaggggtgacgatgcgcccgacctcattggcgcagagaaatgagatgttttttatgtgtttagatatgatgctgtccgcggctgggataaacgtaggaccgatatctccagattatacccaacatatggctacaattggtgtactagcgacgccagagataccttttacaacggaagcggcgaatgagattgctcgcgtgactggggagacttcgacgtgggggccagcccgtcagccttatggtttcttccttgaaactgaggaaaccttccagcccggacgttggttcatgcgtgccgcccaagcagcaactgcggtagtgtgtggtccggatatgattcaagtgtcactgaatgctggagcaagaggagatgtgcagcagatatttcagggtcgtaacgaccccatgatgatatatctagtttggagaagaattgaaaacttcgcgatggcgcagggtaactcacagcaaactcaagcaggcgtgactgttagcgttggtggagtagatatgcgggcggggcgtatcatagcgtgggatggacaggctgctctacatgtgcgcaatccaacacaacagaatgcgatggttcagatacaggtcgtgttctacatttctatggataagaccttaaatcaataccctgccttgactgctgaaatctttaatgtttatagcttcagagatcacacatggcacgggcttagaacggctatacgcaacagaactacactgccgaatatgctgccacccatctttccaccaaacgatcgagatagtatcctgactcttttgcttttgtctacgcttgctgatgtttatactgttttaagacctgagttcgcgatgcacggcgtaaacccaatgccttggccgctcacagctgctattgcacgcgccgcctatgtg。  
摘要 本發(fā)明涉及一種對動物藍(lán)舌病進(jìn)行檢測的生物制劑以及這種生物制劑的制備方法。本制劑包括藍(lán)舌病病毒VP7基因重組表達(dá)質(zhì)粒載體以及由其表達(dá)所獲得的藍(lán)舌病病毒VP7重組抗原,其制備方法為:一、將BTV編碼群特異性抗原VP7基因片段克隆至pMD18-T質(zhì)粒載體中,構(gòu)建VP7基因克隆重組質(zhì)粒;二、亞克隆插入pBAD/Thio TOPO表達(dá)載體;三、轉(zhuǎn)化TOP10細(xì)胞;四、篩選獲得BTV VP7基因片段正向插入、有正確讀碼框的陽性克隆,即構(gòu)建了BTV群特異性抗原VP7的重組表達(dá)載體;五、該重組質(zhì)粒載體用含100μg/mL Amp的LB培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng),可穩(wěn)定、高效表達(dá)BTV VP7重組抗原,可作為藍(lán)舌病診斷試劑。  
國際公布  
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