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在芽孢桿菌屬細(xì)胞中生產(chǎn)多肽的方法

公開(公告)號(hào) CN1174101C  
公開(公告)日 2004.11.03  
申請(qǐng)(專利)號(hào) CN99803331.6  
申請(qǐng)日期 1999.02.26  
專利名稱 在芽孢桿菌屬細(xì)胞中生產(chǎn)多肽的方法  
主分類號(hào) C12N15/75  
分類號(hào) C12N15/75;C12N15/52;C12N15/57;C12N9/54;C12N1/21;//C07K14/325(C12N1/21,C12R1:07)  
分案原申請(qǐng)?zhí)?  
優(yōu)先權(quán) 1998.2.26 US 09/031,442  
申請(qǐng)(專利權(quán))人 諾沃奇梅茲生物技術(shù)有限公司  
發(fā)明(設(shè)計(jì))人 W·威德內(nèi);A·斯羅馬;M·D·托馬斯  
地址 美國(guó)加利福尼亞  
頒證日  
國(guó)際申請(qǐng) PCT/US1999/004360 1999.2.26  
進(jìn)入國(guó)家日期 2000.08.25  
專利代理機(jī)構(gòu) 中國(guó)國(guó)際貿(mào)易促進(jìn)委員會(huì)專利商標(biāo)事務(wù)所  
代理人 陳文平  
國(guó)省代碼 美國(guó);US  
主權(quán)項(xiàng) 制備多肽的方法,其包括:(a)將芽孢桿菌屬(Bacillus)細(xì)胞培養(yǎng)于有利于生產(chǎn)多肽的培養(yǎng)基中,其中該芽孢桿菌屬細(xì)胞含有一具有串聯(lián)啟動(dòng)子的核酸構(gòu)建體,所述串聯(lián)啟動(dòng)子中的每個(gè)啟動(dòng)子序列均可操作地與單拷貝編碼該多肽的核酸序列連接,該串聯(lián)啟動(dòng)子的兩個(gè)或多個(gè)啟動(dòng)子序列同時(shí)促進(jìn)該核酸序列的轉(zhuǎn)錄,并且使用串聯(lián)啟動(dòng)子時(shí)所產(chǎn)生的多肽的量比單獨(dú)使用串聯(lián)啟動(dòng)子的各啟動(dòng)子序列時(shí)要更高;和(b)從培養(yǎng)基中分離該多肽。  
摘要 本發(fā)明涉及生產(chǎn)多肽的方法,其包括:(a)將芽孢桿菌屬(Bacillus)宿主細(xì)胞培養(yǎng)于有利于生產(chǎn)多肽的培養(yǎng)基中,其中該芽孢桿菌屬細(xì)胞含有一種核酸構(gòu)建體,該核酸構(gòu)建體具有(i)一個(gè)串聯(lián)啟動(dòng)子,其中該串聯(lián)啟動(dòng)子的每個(gè)啟動(dòng)子序列均與一單拷貝多肽編碼核酸序列可操作地連接,或還含有(ii)一個(gè)位于該串聯(lián)啟動(dòng)子下游和該多肽編碼核酸序列上游的mRNA加工/穩(wěn)定序列;和(b)從培養(yǎng)基中分離多肽。本發(fā)明還涉及一種生產(chǎn)多肽的方法,其包括:(a)將芽孢桿菌屬宿主細(xì)胞培養(yǎng)于有利于生產(chǎn)多肽的培養(yǎng)基中,其中該芽孢桿菌屬細(xì)胞含有一種核酸構(gòu)建體,該核酸構(gòu)建體具有(i)一個(gè)包含“-35”區(qū)TTGACA序列和“-10”區(qū)TATAAT序列的“共有序列”啟動(dòng)子,該串聯(lián)啟動(dòng)子可操作地連接一個(gè)單拷貝編碼多肽的核酸序列,以及(ii)一個(gè)位于該“共有序列”啟動(dòng)子下游和該多肽編碼核酸序列上游的mRNA加工/穩(wěn)定序列;和(b)從培養(yǎng)基中分離多肽。  
國(guó)際公布 WO1999/043835 英 1999.9.2  
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