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抗菌肽AD基因轉(zhuǎn)化酵母發(fā)酵生產(chǎn)方法

公開(kāi)(公告)號(hào) CN1173030C  
公開(kāi)(公告)日 2004.10.27  
申請(qǐng)(專(zhuān)利)號(hào) CN02134570.8  
申請(qǐng)日期 2002.08.16  
專(zhuān)利名稱(chēng) 抗菌肽AD基因轉(zhuǎn)化酵母發(fā)酵生產(chǎn)方法  
主分類(lèi)號(hào) C12N1/19  
分類(lèi)號(hào) C12N1/19;C12N15/12;C12N15/81;C07K14/435  
分案原申請(qǐng)?zhí)?  
優(yōu)先權(quán)  
申請(qǐng)(專(zhuān)利權(quán))人 廣州市微生物研究所  
發(fā)明(設(shè)計(jì))人 彭中健;楊冠東;杜少平;梁淑娃  
地址 510250 廣東省廣州市寶崗大道荔福路68號(hào)  
頒證日  
國(guó)際申請(qǐng)  
進(jìn)入國(guó)家日期  
專(zhuān)利代理機(jī)構(gòu) 廣州粵高專(zhuān)利代理有限公司  
代理人 何燕玲  
國(guó)省代碼 廣東;44  
主權(quán)項(xiàng) 一種抗菌肽AD基因轉(zhuǎn)化酵母發(fā)酵生產(chǎn)方法,把抗菌肽A及抗菌肽D基因克隆到酵母菌里所得到的抗菌肽AD基因轉(zhuǎn)化酵母進(jìn)行搖瓶培養(yǎng)和發(fā)酵罐培養(yǎng),其特征在于:(1)搖瓶培養(yǎng):將含抗菌肽AD基因質(zhì)粒轉(zhuǎn)化的酵母作為菌種接入三角瓶中,在28-32℃,搖床轉(zhuǎn)速150-300轉(zhuǎn)/分的條件下,培養(yǎng)24-72小時(shí);(2)發(fā)酵罐培養(yǎng):將(1)中已培養(yǎng)好的種子接入發(fā)酵罐,接種量為2-20%,在28-322,攪拌速度180-400轉(zhuǎn)/分,罐壓0.04-0.12兆帕,風(fēng)量1∶0.5-1∶1.8體積/體積/分,pH6.5-7.5的條件下,培養(yǎng)24-96小時(shí),培養(yǎng)過(guò)程中加入1%甲醇誘導(dǎo),將發(fā)酵所得抗菌肽在90-110℃下加熱8-20分鐘;其中所用的培養(yǎng)基組分及重量百分含量為:酵母粉0.1-3%、蛋白胨0.5-4%、糖0.1-3%,pH6.5-7.5。  
摘要 本發(fā)明屬于生物發(fā)酵領(lǐng)域,涉及一種抗菌肽AD基因轉(zhuǎn)化酵母發(fā)酵生產(chǎn)方法,將含抗菌肽AD基因質(zhì)粒轉(zhuǎn)化的工程酵母在合適的培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件下,表達(dá)抗菌肽基因并分泌抗菌肽到菌體外,發(fā)酵液中抗菌肽的殺菌活力高達(dá)7000單位/毫升,該方法生產(chǎn)的抗菌肽酵母制劑殺菌效價(jià)高,質(zhì)量穩(wěn)定,可大規(guī)模生產(chǎn),生產(chǎn)周期短且成本低。  
國(guó)際公布  
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