| 公開(kāi)(公告)號(hào) | CN1166684C |
| 公開(kāi)(公告)日 | 2004.09.15 |
| 申請(qǐng)(專利)號(hào) | CN02150919.0 |
| 申請(qǐng)日期 | 2002.11.28 |
| 專利名稱 | 制備強(qiáng)熒光藻藍(lán)蛋白的方法 |
| 主分類號(hào) | C07K14/405 |
| 分類號(hào) | C07K14/405;C07K1/14 |
| 分案原申請(qǐng)?zhí)? | |
| 優(yōu)先權(quán) | |
| 申請(qǐng)(專利權(quán))人 | 浙江大學(xué) |
| 發(fā)明(設(shè)計(jì))人 | 龔興國(guó);曾冬云;徐飛虎;周遠(yuǎn) |
| 地址 | 310027 浙江省杭州市西湖區(qū)玉古路20號(hào) |
| 頒證日 | |
| 國(guó)際申請(qǐng) | |
| 進(jìn)入國(guó)家日期 | |
| 專利代理機(jī)構(gòu) | 杭州求是專利事務(wù)所有限公司 |
| 代理人 | 韓介梅 |
| 國(guó)省代碼 | 浙江;33 |
| 主權(quán)項(xiàng) | 制備強(qiáng)熒光藻藍(lán)蛋白的方法，其特征是控制溫度在0～4℃下，包括以下步驟：1)新鮮藻泥加入pH值7.0-7.6、濃度50mmol/L、含0.1～0.5mmol/LEDTA的磷酸緩沖液，冰浴超聲波破，將破碎液離心后去沉淀，收集上清液； |
| 摘要 | 本發(fā)明制備強(qiáng)熒光藻藍(lán)蛋白的方法是以新鮮藻泥為原料，用含EDTA的磷酸緩沖液洗滌，經(jīng)超聲波破碎細(xì)胞，釋放出色素蛋白，通過(guò)離心分離，去除不溶性細(xì)胞膜及細(xì)胞器。收集上清液，經(jīng)分級(jí)鹽析，收集藻藍(lán)蛋白沉淀。沉淀溶于含EDTA的磷酸緩沖液中，通過(guò)Sephadex G-25脫鹽，上DEAE-Sepharose FF柱，去掉堿性雜質(zhì)蛋白，然后上羥基磷灰石柱，獲得藻藍(lán)蛋白洗脫液。接著上CM-Sepharose FF柱，去掉酸性雜質(zhì)蛋白。最后再上第二次羥基磷灰石，獲得高純度強(qiáng)熒光的藻藍(lán)蛋白。本發(fā)明既省力又省時(shí)，適合工業(yè)化大規(guī)模生產(chǎn)。 |
| 國(guó)際公布 |
