公開(kāi)(公告)號(hào)
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CN1149292C
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公開(kāi)(公告)日
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2004.05.12
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申請(qǐng)(專(zhuān)利)號(hào)
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CN00133288.0
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申請(qǐng)日期
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2000.12.01
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專(zhuān)利名稱(chēng)
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一種畢赤氏甲基營(yíng)養(yǎng)酵母表達(dá)體系及其應(yīng)用
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主分類(lèi)號(hào)
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C12N15/81
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分類(lèi)號(hào)
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C12N15/81;C12N15/52;C12N9/00;//(C12N15/81,C12R1:84)
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分案原申請(qǐng)?zhí)? |
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優(yōu)先權(quán)
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申請(qǐng)(專(zhuān)利權(quán))人
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南京大學(xué)
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發(fā)明(設(shè)計(jì))人
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華子春;吳小陽(yáng)
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地址
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210093 江蘇省南京市漢口路22號(hào)
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頒證日
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2004.05.12
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國(guó)際申請(qǐng)
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進(jìn)入國(guó)家日期
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專(zhuān)利代理機(jī)構(gòu)
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南京知識(shí)律師事務(wù)所
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代理人
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胡錫瑜
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國(guó)省代碼
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江蘇;32
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主權(quán)項(xiàng)
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一種畢赤氏甲基營(yíng)養(yǎng)酵母表達(dá)體系,它由畢赤氏甲基營(yíng)養(yǎng)酵母宿主菌和畢赤氏甲基營(yíng)養(yǎng)酵母表達(dá)載體所組成,其特征在于其中所述的宿主菌含有在AOX1啟動(dòng)子和AOX1轉(zhuǎn)錄終止子控制下的、整合在酵母染色體上的T7RNA聚合酶基因,所產(chǎn)生的T7 RNA聚合酶具有轉(zhuǎn)錄活性;其中所述的表達(dá)載體含有T7啟動(dòng)子--α-因子信號(hào)肽--多克隆位點(diǎn)--T7終止子或T7啟動(dòng)子--多克隆位點(diǎn)--T7終止子這樣的DNA片段,該DNA片段的上、下游分別放置有畢赤氏甲基營(yíng)養(yǎng)酵母AOX1整合位點(diǎn)的上游DNA序列和下游DNA序列,并具有明顯的特定篩選標(biāo)記基因。
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摘要
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一種畢赤氏(Pichia)甲基營(yíng)養(yǎng)酵母表達(dá)體系,該表達(dá)系統(tǒng)包括能產(chǎn)生T7 RNA聚合酶的宿主酵母菌,和含有T7啟動(dòng)子、多克隆位點(diǎn)、T7終止子,及其畢赤氏(Pichia)甲基營(yíng)養(yǎng)酵母特定重組整合位點(diǎn)上游、下游DNA序列,以及特定篩選標(biāo)記基因的重組表達(dá)質(zhì)粒;該畢赤氏酵母表達(dá)體系能夠高效表達(dá)外源基因,用來(lái)生產(chǎn)制備重組蛋白質(zhì)或多肽。
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國(guó)際公布
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