公開(公告)號 | CN1478903A |
公開(公告)日 | 2004.03.03 |
申請(專利)號 | CN02136716.7 |
申請日期 | 2002.08.29 |
專利名稱 | 一種制備人載脂蛋白基因重組蛋白的方法 |
主分類號 | C12P21/02 |
分類號 | C12P21/02;C12N15/09;C12N15/63 |
分案原申請?zhí)? | |
優(yōu)先權 | |
申請(專利權)人 | 上海凱曼生物科技有限公司 |
發(fā)明(設計)人 | 周鳴南;龔邦強 |
地址 | 200233上海市田林路219號 |
頒證日 | |
國際申請 | |
進入國家日期 | |
專利代理機構 | 上海開祺專利代理有限公司 |
代理人 | 費開逵 |
國省代碼 | 上海;31 |
主權項 | 一種人載脂蛋白ApoAIMilano的制備方法,其特征在于1-采用RT-PCR技術從人肝細胞中獲得人載脂蛋白基因片段;1-2、通過PCR直接位點突變的方法制得人載脂蛋白基因;1-3、將上述獲得的人載脂蛋白基因克隆到PMD-T載體上,進行DNA序列測定,然后從PMD-T載體上切下,克隆到表達載體PMZG上,建成表達重組質(zhì)粒pMZG-3,將此構建的表達人載脂蛋白重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化進入宿主菌大腸桿菌內(nèi),組建成工程菌;1-4、表達工程菌發(fā)酵、發(fā)酵液處理、純化,得人載脂蛋白;1-5、純化的人載脂蛋白用谷胱甘肽、還原型谷胱甘肽處理,形成人載脂蛋白的二聚體肽。 |
摘要 | 本發(fā)明公開了一種人載脂蛋白ApoAIMilano二聚體肽的制備方法,它采用基因重組技術將人的ApoAIMilano基因克隆到表達載體上,構建成表達重組質(zhì)粒,并轉(zhuǎn)化進入大腸桿菌,組建成表達工程菌,經(jīng)發(fā)酵、純化工藝獲得人ApoAIMilano蛋白,它可用于治療急性動脈粥樣硬化斑塊形成而導致的心絞痛、心肌梗死等冠狀動脈綜合癥。 |
國際公布 |