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表皮生長(zhǎng)因子工程菌及使用該菌制備表皮生長(zhǎng)因子的方法

醫(yī)藥數(shù)據(jù)庫中心 藥學(xué)論壇 中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)研究所/黃秉仁
公開(公告)號(hào) CN1138856C  
公開(公告)日 2004.02.18  
申請(qǐng)(專利)號(hào) CN97115284.5  
申請(qǐng)日期 1997.08.29  
專利名稱 表皮生長(zhǎng)因子工程菌及使用該菌制備表皮生長(zhǎng)因子的方法  
主分類號(hào) C12N1/19  
分類號(hào) C12N1/19;C12N15/81;C12N15/12;C12P21/02;//C12N1/19,C12R1:84  
分案原申請(qǐng)?zhí)?  
優(yōu)先權(quán)  
申請(qǐng)(專利權(quán))人 中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)研究所  
發(fā)明(設(shè)計(jì))人 黃秉仁  
地址 100005 北京市東單三條5號(hào)  
頒證日 2004.02.18  
國際申請(qǐng)  
進(jìn)入國家日期  
專利代理機(jī)構(gòu) 永新專利商標(biāo)代理有限公司  
代理人 程偉;過曉東  
國省代碼 北京;11  
主權(quán)項(xiàng) 一種甲基營養(yǎng)型酵母細(xì)胞,它含有三個(gè)拷貝的能夠編碼51個(gè)氨基酸的人表皮生長(zhǎng)因子的基因序列,其特征在于所述的人表皮生長(zhǎng)因子的基因序列的5’端連接一個(gè)α-因子前導(dǎo)肽,在該α-因子前導(dǎo)肽DNA序列前融合一個(gè)Kozak序列,然后再克隆到醇氧化酶啟動(dòng)子下游以構(gòu)建成整合型的能表達(dá)三拷貝人表皮生長(zhǎng)因子的序列,其中所述的編碼51個(gè)氨基酸的人表皮生長(zhǎng)因子的基因序列為:1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15Asn Ser Asp Ser Glu Cys Pro Leu Ser His Asp Gly Tyr Cys LeuAAC TCC GAC TCC GAA TGT CCA TTG TCC CAC GAC GGT TAC TGT TTGTTG AGG CTG AGG CTT ACA GGT AAC AGG GTG CTG CCA ATG ACA AAC16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30His Asp Gly Val Cys Met Tyr Ile Glu Ala Leu Asp Lys Tyr AlaCAC GAC GGT GTT TGT ATG TAC ATC GAA GCT TTG GAC AAG TAC GCCGTG CTG CCA CAA ACA TAC ATG TAG CTT CGA AAC CTG TTC ATG CGG31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45Cys Asp Cys Val Val Gly Tyr Ile Gly Glu Arg Cys Glu Tyr ArgTGT AAC TGT GTT GTT GGT TAC ATC GGT GAA AGA TGT CAA TAC AGAACA TTG ACA CAA CAA CCA ATG TAG CCA CTT TCT ACA GTT ATG TCT46 47 48 49 50 51Asp Leu Lys Trp Trp Glu 終止密碼1-2 EcoRIGAC TTG AAG TGG TGG GAA TAA TGA GAATTCCTG AAC TTC ACC ACC CTT ATT ACT CTTAAG。  
摘要 本發(fā)明涉及表皮生長(zhǎng)因子工程菌及使用該菌制備表皮生長(zhǎng)因子的方法,該工程菌為甲基營養(yǎng)型酵母細(xì)胞,它含有至少一個(gè)拷貝的能夠編碼51個(gè)氨基酸的人表皮生長(zhǎng)因子的基因序列,其特征在于于所述的人表皮生長(zhǎng)因子的基因序列的5’端連接一個(gè)a-因子前導(dǎo)肽,在該a-因子前導(dǎo)肽DNA序列前融合一個(gè)Kozak序列,然后再克隆到醇氧化酶啟動(dòng)子下游以構(gòu)建成整合型的能表達(dá)單拷貝人表皮生長(zhǎng)因子的序列。  
國際公布  
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