| 公開(公告)號 | CN101049508A |
| 公開(公告)日 | 2007.10.10 |
| 申請(專利)號 | CN200710052155.X |
| 申請日期 | 2007.05.11 |
| 專利名稱 | 攜帶結核分支桿菌Ag85B的減毒傷寒桿菌載體疫苗 |
| 主分類號 | A61K48/00(2006.01)I |
| 分類號 | A61K48/00(2006.01)I;A61K39/385(2006.01)I;A61K39/04(2006.01)I;C12N1/21(2006.01)I;C12N15/63(2006.01)I |
| 分案原申請?zhí)? | |
| 優(yōu)先權 | |
| 申請(專利權)人 | 武漢大學 |
| 發(fā)明(設計)人 | 章曉聯;王 坤 |
| 地址 | 430072湖北省武漢市武昌珞珈山 |
| 頒證日 | |
| 國際申請 | |
| 進入國家日期 | |
| 專利代理機構 | 湖北武漢永嘉專利代理有限公司 |
| 代理人 | 王守仁 |
| 國省代碼 | 湖北;42 |
| 主權項 | 一種減毒傷寒桿菌載體疫苗，其特征是一種攜帶結核分支桿菌Ag85B的減毒傷寒桿菌載體疫苗，該疫苗由包括以下步驟的方法制得： (1)原核重組表達質粒pGEX-Ag85B的制備： 利用PCR方法對目的基因即Ag85B的BX842578基因序列中的121-975位進行擴增，再提取原核表達質粒pGEX-KG，并經酶切回收及鑒定，獲得pGEX-Ag85B； (2)真核重組表達質粒pVAX1-Ag85B的構建： 將鑒定成功的原核重組質粒pGEX-KG-Ag85B轉化感受態(tài)細菌E.coliBL21，經培養(yǎng)、陽性克隆和酶切鑒定后，使含有重組表達質粒的E.coliBL21在LB(Amp+)培養(yǎng)液中培養(yǎng)、接種和誘導培養(yǎng)，再經離心收集菌體及超聲碎菌后，提取融合蛋白，然后經純化和鑒定分析，即得到真核重組表達質粒pVAX1-Ag85B； (3)攜帶結核分支桿菌Ag85B的減毒傷寒桿菌載體疫苗的制備： 將鑒定正確的pVAX-1-Ag85B電轉入減毒傷寒桿菌LB5000及SL7207菌株，并通過抗生素陽性克隆篩選及提取質粒酶切鑒定；再經動物攻毒實驗檢測疫苗的免疫保護效力，即得到所述疫苗。 |
| 摘要 | 本發(fā)明公開了一種攜帶結核分支桿菌Ag85B的減毒傷寒桿菌載體疫苗，其由包括原核重組表達質粒pGEX-Ag85B的制備、真核重組表達質粒pVAX1-Ag85B的構建以及所述抗結核的減毒傷寒桿菌載體疫苗的制備步驟的方法制得。本發(fā)明首次運用了以減毒鼠傷寒桿菌為載體的結核Ag85B疫苗的有效應用研究，開辟了一種新型有效的結核疫苗的途徑；與DNA疫苗等相比的優(yōu)點是，本疫苗能口服，臨床實用性強，制備簡易、成本低，通常一次免疫即可誘發(fā)有效抵抗結核感染的免疫應答，并具有安全、高效、簡便和經濟等優(yōu)點。 |
| 國際公布 |
