豬圓環(huán)病毒病的診斷方法
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本病的診斷必須將臨床癥狀、病理變化和實驗室的病原或抗體檢測相結(jié)合才能得到可靠的結(jié)論。最可靠的方法為病毒分離與鑒定! 〔±韺W(xué)檢查 此法在病豬死后極有診斷價值。當(dāng)發(fā)現(xiàn)病死豬全身淋巴結(jié)腫大,肺退化不全或形成固化、致密病灶時,應(yīng)懷疑本病?梢娏馨徒M織內(nèi)
淋巴細胞減少,單核吞噬細胞類細胞浸潤及形成多核巨細胞,若在這些細胞中發(fā)現(xiàn)嗜堿性或兩性染色的細胞質(zhì)內(nèi)包涵體,則基本可以確診。 血清學(xué)檢查 是生前診斷的一種有效手段。診斷本病的方法有:間接免疫熒光法(IIF),免疫過氧化物單層培養(yǎng)法,ELISA方法,聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)方法,核酸探針雜交及原位雜交試驗(ISH)等方法! 1 IIF方法 宜檢測細胞培養(yǎng)物中的PCV。用組織病料以蓋玻片在PK-15細胞培養(yǎng),丙酮固定,用
兔抗PCV高免血清與細胞培養(yǎng)物中的PCV反應(yīng),可對PCV進行檢測和分型! 2 ELISA診斷方法 可用于檢測血清中的病毒抗體。用細胞培養(yǎng)的病毒(PCV2)作為抗原,用PCV2特異性單克隆抗體作為競爭試劑建立競爭ELISA方法,競爭ELISA方法的檢出率為99.58%,而間接免疫熒光法的檢出率僅為97.14%。該方法可用于PCV2抗體的大規(guī)模監(jiān)測。 3 PCR方法 是一種快速、簡便、特異的診斷方法。采用PCV2特異的或群特異的引物從病豬的組織、鼻腔分泌物和糞便進行基因擴增,根據(jù)擴增產(chǎn)物的限制酶切圖譜和堿基序列,確認PCV感染,還有一種簡單的復(fù)合PCR(multiplex PCR)法。 4 ISH方法 此法可以檢查PCV核酸。但不能區(qū)分PCV1和PCV2,具有群特異性,可以精確定位PCV在組織器官中的部位,可用于檢測臨診病料和病理分析。
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實驗室診斷
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實驗室確診
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