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醫(yī)學(xué)微生物學(xué):第一節(jié) 甲型肝炎病毒

1973年Feinslone 首先bhskgw.cn/jianyan/用免疫電鏡技術(shù)在急性期患者的糞便中發(fā)現(xiàn)甲型肝炎病毒(Hapatitis A virus,HAV ) 。屬微小RNA病毒科,新型腸道病毒72型。人類感染HAV后,大多表現(xiàn)為亞臨床或隱性感染,僅少數(shù)人表現(xiàn)為急性甲型肝炎。一般可完全恢復(fù),不轉(zhuǎn)為慢…

1973年Feinslone 首先bhskgw.cn/jianyan/用免疫電鏡技術(shù)在急性期患者的糞便中發(fā)現(xiàn)甲型肝炎病毒(Hapatitis A virus,HAV ) 。屬微小RNA病毒科,新型腸道病毒72型。人類感染HAV后,大多表現(xiàn)為亞臨床或隱性感染,僅少數(shù)人表現(xiàn)為急性甲型肝炎。一般可完全恢復(fù),不轉(zhuǎn)為慢性肝炎,亦無慢性攜帶者。

一、生物學(xué)性狀

(一)形態(tài)與結(jié)構(gòu)

病毒呈球形,直徑約為27nm。無囊膜。衣殼由60個殼微粒組成,呈20面體立體對稱,有HAV的特異性抗原(HAVAg),每一殼微粒由4種不同的多肽即VP1、VP2、VP3和VP4所組成。

在病毒的核心部位,為單股正鏈RNA。除決定病毒的遺傳特性外,兼具信使RNA的功能,并有傳染性。

HAV的單股RNA,其長度相當(dāng)于7400個核苷酸。在RNA的3′末端有多聚的腺苷序列,在5′末端以共價形式連接一由病毒基因編碼的細小蛋白質(zhì),稱病毒基因組蛋白(Viral protein ,genomic,VPG)。

它在病毒復(fù)制過程中,能使病毒核酸附著于宿主細胞的核蛋白體上進行病毒蛋白質(zhì)的生物合成。

(二)病毒感染模型與培養(yǎng)

黑猩猩和猴對HAV易感,且能傳代,經(jīng)口或靜脈注射可使動物發(fā)生肝炎,并能在肝細胞凍中檢出HAV。在潛伏期和急性期的早期,HAV可隨糞便排出。恢復(fù)期血清中能檢出HAV的相應(yīng)抗體。

1979年P(guān)rovost 等首次成功地將已適應(yīng)在狨猴傳代的毒株培養(yǎng)于原狨猴肝細胞或恒河猴胚腎細胞FPhK6株中。我國學(xué)者也先后成功地使HAV在肝癌細胞株中增殖。病毒在組織培養(yǎng)細胞中雖可增殖。但不引起細胞病變,且增殖與細胞釋放均甚緩慢。應(yīng)用免疫熒光試驗,可檢出組織細胞中的HAV,亦可用放射免疫方法,自細胞溶解物中檢出HAV。

(三)抵抗力

初步實驗證明,HAV對乙醚、60℃加熱1小時及pH3的作用均有相對的抵抗力(在4℃可存活數(shù)月)。但加熱100℃5分鐘呈用甲醛溶液、氯等處理,可使之滅活。非離子型去垢劑不破壞病毒的傳染性。

二、致病性與免疫性

(一)傳染源與傳播途徑

甲型肝炎病毒主要通過糞-口途徑傳播,傳染源多為病人。甲型肝炎的潛伏期為15~45天,病毒常在患者轉(zhuǎn)氨酸升高前的5~6天就存在于患者的血液和糞便中。發(fā)病2~3周后,隨著血清中特異性抗體的產(chǎn)生,血液和糞便的傳染性也逐漸消失。長期攜帶病毒者極罕見。

HAV隨患者糞便排出體外,通過污染水源、食物、海產(chǎn)品(如毛等)、餐具等的傳播可造成散發(fā)性流行或大流行。也可通過輸血或注射方式傳播,但由于HAV在患者血液中持續(xù)時間遠較乙型肝炎病毒為短,故此種傳播方式較為少見。

(二)致病機理與免疫

根據(jù)臨床和流行病學(xué)觀察,甲型肝炎病毒多侵犯兒童及青年,發(fā)病率隨年齡增長而遞減。臨床表現(xiàn)多從發(fā)熱、疲乏和食欲不震開始,繼而出現(xiàn)肝腫大、壓痛、肝功能損害,部份患者可出現(xiàn)黃疸。多數(shù)情況下,無黃疸病例發(fā)生率要比黃疸型高許多倍,但大流行時黃疸型比例增高。40歲上成人中,80%左右均有抗HAV抗體。HAV經(jīng)糞一口途徑侵入人體后,先在腸粘膜和局部淋巴結(jié)增殖,繼而進入血流,形成病毒血癥,最終侵入靶器官肝臟,在肝細胞內(nèi)增殖。由于在組織培養(yǎng)細胞中增殖緩慢并不直接引起細胞損害,故推測其致病機理,除病毒的直接作用外,機體的免疫應(yīng)答可能在引起肝組織損害上起一定的作用,F(xiàn)可應(yīng)用狨猴作為實驗感染模型以研究HAV的致病機理。動物經(jīng)大劑型病毒感染后1周,肝組織呈輕度炎癥反應(yīng)和有小量的局灶性壞死現(xiàn)象。此時感染動物雖然肝功能異常,但病情穩(wěn)定。可是在動物血清中出現(xiàn)特異性抗體的同時,動物病情反而轉(zhuǎn)劇,肝組織出現(xiàn)明顯的炎癥和門脈周圍細胞壞死。由此推論早期的臨床表現(xiàn)是HAV本身的致病作用,而隨后發(fā)生的病理改變是一種免疫病理損害。

在甲型肝炎的顯性感染或隱性感染過程中,機體都可產(chǎn)生抗HAV的lgm 和lgG抗體。前者在急性期和恢復(fù)期出現(xiàn),后者在恢復(fù)后期出現(xiàn),并可維持多年,對同型病毒的再感染有免疫力。另外有活力的NK細胞,特異性細胞毒T細胞(CD8+)在消滅病毒、控制HAV感染中亦很重要。

三、微生物學(xué)診斷

目前對甲型肝炎的微生物學(xué)檢查,以HAV的抗原和抗體為主。應(yīng)用的方法包括免疫電鏡、補體結(jié)合試驗、免疫粘附血凝試驗、固相放射免疫和酶聯(lián)免疫吸附試驗、多聚酶鏈反應(yīng)、cDNA-RNA分子雜交技術(shù)等?笻AVLgm 具有出現(xiàn)早、短期達高峰與消失快的特點,故它測得是甲型肝炎新近感染的標志?笻AVLgG 的檢測有助于流行病學(xué)檢查。

四、防治原則

HAV的預(yù)防應(yīng)搞好飲食衛(wèi)生,保護水源,加強糞便管理,并做好衛(wèi)生宣教工作。注射丙種球蛋白及胎盤球蛋白,應(yīng)急預(yù)防甲型肝炎有一定效果。我國生產(chǎn)的甲肝活疫苗只注射一次即可獲得持久免疫力;蚬こ桃呙缪兄埔嘁殉晒。

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