粘病毒(Orthomyxovirus)是指對人或某些動物紅細胞表面的粘蛋白有親和性的病毒,正、副粘病毒的分別以其核酸是否分節(jié)段為標準,分節(jié)段者為正粘病毒,不分節(jié)段者為副粘病毒;其實正粘bhskgw.cn/yaoshi/病毒bhskgw.cn/zhicheng/只有流行性感冒病毒(Influenza virus)一個種。
流行性感冒病毒
流行性感冒病毒簡稱流感病毒,是引起流感的病原體,流感是一種上呼吸道急性傳染病,它傳染性強、傳播快、潛伏期短、發(fā)病率高。已引起數(shù)次世界性大流行,僅1918~1919年的世界大流行,死亡人數(shù)就達2000萬,對人類的生命健康危害極大。
(一)形態(tài)與結(jié)構(gòu)
流感病毒具有多形態(tài),有的呈絲狀、有的呈桿狀,但一般為球形,病毒的直徑為80~120nm,內(nèi)有一直徑約為70nm 的電子致密核心,其實就是病毒的核衣殼。絲狀體長短不一,長度有時可達4000nm,直徑與球形病毒相同。流感病毒的結(jié)構(gòu)主要包括內(nèi)部的核心(即核衣殼)和外面的包膜(即病毒囊膜)兩部分。
1.甲、乙型流感病毒為8個節(jié)段,丙型為7個節(jié)段,每一個節(jié)段就是一個基因,決定流感病毒的遺傳特性,其基因組分節(jié)段的特點使本病毒具有高頻率基因重配,容易發(fā)生變異。流感病毒RNA外包繞的蛋白質(zhì)中,三種分子量較大的蛋白P1、P2、P3均為RNA多聚酶,與RNA的轉(zhuǎn)錄有關(guān),其他均為核蛋白。核蛋白的抗原穩(wěn)定,很少發(fā)生變異,具有型特異性。根據(jù)核蛋白抗原性的不同,可把感染人的流感病毒分為甲、乙、丙三型。
2.病毒囊膜流感病毒囊膜由內(nèi)向外,可分為內(nèi)膜蛋白、類脂和糖蛋白三層。內(nèi)膜蛋白(M蛋白)是包圍在病毒核心外的一層膜六結(jié)構(gòu),介于核蛋白與脂質(zhì)雙層膜之間,與組成脂質(zhì)雙層膜的類脂緊密結(jié)合,在維持病毒形狀與完整性上起重要作用。類脂層是脂質(zhì)雙層結(jié)構(gòu),它來自宿主細胞膜或核膜,其中鑲嵌的兩種糖蛋白向外突出脂質(zhì)雙層形成刺突,構(gòu)成了流感病毒囊膜的第三層一糖蛋白層。糖蛋白層由兩種糖蛋白刺突組成,一種是神經(jīng)氨酸酶(Neuraminidase NA),一種是血凝素 (Hemagglutinin HA)。
神經(jīng)氨酸酶是由4條相同的糖基化多肽所組成的蘑菇狀四聚體,具有酶活性,可水解宿主細胞表面糖蛋白末端的N-乙酰神經(jīng)氨酸,有利于成熟病毒的釋放(抗神經(jīng)氨酸酶抗體能抑制病毒從細胞釋放,但沒有中和作用);神經(jīng)氨酸酶的抗原結(jié)構(gòu)較易發(fā)生變異,它是流感病毒亞型的劃分依據(jù)之一。
血凝素:是由3條糖基化多肽分子以非共價形式聚合而成的三聚體,其C末端有一疏水區(qū)插入病毒囊膜的雙層脂質(zhì)膜中,是HA與病毒囊膜的結(jié)合部位。N末端有一疏水區(qū),具有膜融合活性,對病毒侵入宿主細胞是必須的。HA能與多種動物(如雞、豚鼠)和人的紅細胞表面的糖蛋白受體相結(jié)合,引起紅細胞凝集,我們把這種現(xiàn)象叫血凝。若在病毒與細胞混合前先加抗血凝素抗體,使該抗體首先與病毒血凝素結(jié)合,當再加入紅細胞時,由于病毒血凝集上結(jié)合的抗體的阻斷作用,血凝素就不能再與紅細胞上的受體結(jié)合,紅細胞就不出現(xiàn)凝集,這種現(xiàn)象我們稱為血凝抑制。血凝和血凝抑制,是病毒學(xué)研究常用的檢測指標。
血凝集是流感病毒的主要中和抗原,其抗原性最易發(fā)生變異。它是流感病毒亞型劃分的另一依據(jù)。
(二)分型、變異與流行
按核蛋白的可溶性補體結(jié)合抗原的不同,流感病毒被分為甲(A)、乙(B)和丙(C)三型;各型流感病毒又根據(jù)其表面血凝素及神經(jīng)氨酸酶抗原性的不同再分為若干亞型。從世界上過去流感流行的資料分析,認為乙型和丙型流感病毒抗原性比較穩(wěn)定;甲型的表面抗原HA、HA最易變異,二者可同時變異,也可分別發(fā)生。自1934年分離出甲型流感病毒以來,已發(fā)生多次世界性的大流行(見表24-2)以及大流行間期的小流行。其流行規(guī)模的大小,主要取決于病毒表面抗原變異幅度大;幅度小,屬于量變稱抗原漂移(Antigen drift),是核酸序列的點突變,致使HA或HA抗原決定簇發(fā)生某些改變,并在免疫人群中被選擇出來,可引起中小流行。若變異幅度大,即新毒株的HA和/或NA完全與前次流行株失去聯(lián)系,形成新的亞型,系質(zhì)變稱抗原轉(zhuǎn)(Antigenic shift),是由核酸序列不斷的突變積累或外來基因片斷重組所致。這種抗原性的轉(zhuǎn)變使人群原有的特異性免疫力失效,因此可以引起大規(guī)模甚至世界性的流感流行。
表24-2 甲型流感病毒在不同年代的表現(xiàn)抗原變化
流行年代 | 病毒亞型 | 病毒株名 | H抗原 | N抗原 |
1934~1946 1946~1957 1957~1968 1968年以后 1977 | 甲型(原甲型) 甲1型(亞甲型) 甲2型(亞洲甲型) 甲3型(香港甲型) 甲1型(亞甲型) | A/PR/8/34 A/FM/1/47 A/Singapore/1/57 A/Hong Kong/1/68 A/USSR/90/77 | H0 H1 H2 H3 H1 | N1 N1 N2 N2 N1 |
(三)培養(yǎng)特性
流感病毒在雞胚中生長良好,一般初次分離應(yīng)先接種羊膜腔中傳代適應(yīng)后方接種尿囊腔。病毒在雞胚中并不引起明顯病變。用血凝試驗可判斷羊水或與尿囊液中有無病毒生長。人流感病毒能感染多種動物,但只有雪貂的表現(xiàn)類似人類流感。另外,甲、乙型流感在原代人胚腎、猴腎等組織細胞中也能生長。
(四)抵抗力
流感病毒抵抗力較弱,不耐熱,56℃30分鐘即被滅活,室溫下感染性很快消失;對干燥、日光、紫外線及乙醚、甲醛等敏感;酸性條件下更易滅活,但在-70℃或冷凍干燥后活性可長期保存。
流感病毒經(jīng)過飛沫傳播,侵入呼吸道,通過其HA吸附于呼吸道粘膜上皮細胞膜上的HA受體上,然后浸入這些細胞進行增殖。經(jīng)1~2天的潛伏期,感染者即可出現(xiàn)流感癥狀。病毒在呼吸道粘膜上皮細胞內(nèi)增殖,造成這些細胞變性,壞死脫落,粘膜充血水腫,腺體分泌增加;出現(xiàn)噴嚏、鼻塞、咳嗽等癥狀。病毒在上皮細胞內(nèi)復(fù)制,很少入血,但可釋放內(nèi)毒素樣物質(zhì)入血,引起全身中毒癥狀:發(fā)熱、頭痛、全身酸痛、疲乏無力、白細胞數(shù)下降等。流感病毒感染一般數(shù)日內(nèi)自愈,但幼兒或年老體弱病人易繼發(fā)細菌感染,如合并肺炎等,病死率高。
病后對同型病毒有免疫力,可維持1~2年,主要為分泌型lga 和血清中和抗體lgM、lgG共同的作用;這些抗體有兩類:一是抗病毒血凝素抗體,能阻止病毒侵入易感細胞,在抗感染中起重要作用,另一類是抗神經(jīng)氨酸酶抗體,能少細胞排毒和病毒擴散。此外CTL可殺傷流感病毒感染細胞,在促進受染機體的康復(fù)方面也起重要作用。
(一)病毒分離與鑒定采取發(fā)病初期(發(fā)病3天)病人鼻咽洗液或含漱液,加青、鏈霉素殺菌后,接種于雞胚羊膜腔內(nèi)及尿囊腔中,35℃孵育2~4日,取羊水、尿囊液做血凝試驗,檢查有無病毒增殖。若試驗為陰性,需在雞胚中盲目傳代三次后再試驗。若血凝試驗為陽性,可用已知流感病毒各型特異性抗體與新分離病毒進行血凝抑制試驗,鑒定型別。
(二)血清學(xué)試驗取病人急性期(發(fā)病3日內(nèi))和恢復(fù)期(發(fā)病2~4周)雙份血清,同樣與已知各亞型流感病毒進行血凝抑制試驗或其他試驗。恢復(fù)期血清的抗體效價是急性期的4倍或4倍以上,具有協(xié)助診斷意義。
免疫熒光技術(shù)直接檢測鼻分泌物中病毒抗原,能夠達到快速診斷的目的。
流感病毒傳染性強,播散迅速,在易感人群中易形成大流行,故做好預(yù)防是必要的。
流行期間應(yīng)盡量避免人群聚集,公共場所如劇院、宿舍應(yīng)常通風(fēng)換氣,必要時空氣消毒:常用乳酸,100m3空間用2~4ml乳酸溶于10倍水中加熱熏蒸,無乳酸時用食醋亦可。
流感疫苗有滅活疫苗和減毒活疫苗,但因流感病毒抗原易變,及時掌握變異動態(tài)及選育毒株使制成的疫苗抗原性與流行株相同或近似極為重要。
治療尚無特效方法,金剛烷胺對甲型流感病毒復(fù)制有抑制作用,在預(yù)防和治療上有一定效果,但此藥能引起中樞神經(jīng)癥狀和耐藥毒株出現(xiàn)未被廣泛使用。目前主要是對癥治療及預(yù)防繼發(fā)細菌感染。