1 免疫及攻擊
用生理鹽水將吸附破傷風類毒素標準品和待檢樣品以2倍稀釋法稀釋成3～5個稀釋度（中間的稀釋度必須在攻毒后能保護約半數(shù)動物)。每一稀釋度樣品免疫體重14～16g小白鼠14只（或250～350g豚鼠至少10只)。另外10只小白鼠不注射作為對照（另外5只豚鼠不注射作為對照)。免疫4周，每只免疫小白鼠攻擊破傷風毒素50LD50(免疫豚鼠攻擊100LD50)，皮下注射0.5ml。對照組健康小白鼠注射25倍稀釋的上述毒素（對照組豚鼠注射100倍稀釋的上述毒素)，每只皮下bhskgw.cn/jianyan/注射0.5ml，攻擊后觀察5日，每日記錄結果。
2 試驗成立應具備的條件
（1)檢品的最低稀釋度能保護半數(shù)以上動物。
（2)檢品的最高稀釋度能保護半數(shù)以下動物。
（3)對照組動物應部分死亡而不全部死亡。
（4)檢品和標準品的劑量反應曲線在平行性及直線性上沒有太大的偏差。
3 結果計算
用平行線分析法進行結果計算。
4 結果判定
待檢樣品的效價每個劑量應不少于40IUbhskgw.cn/kuaiji/。如95%可信限大于50%～200%則95%可信限的低限效價應大于40IU/1個人用劑量。
