第一節(jié) 狂犬病病毒
狂犬病病毒（rabiesvirus)是一種嗜神經(jīng)病毒，系急性致死性中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病(狂犬病)的病原體，歸類于彈狀病毒科（Rhabdoviridae)的狂犬病病毒屬（Lyssavirus)。主要傳播于狼、狐貍、臭鼬和蝙蝠等野生動物和犬、貓等家養(yǎng)寵物中，人可因帶毒動物咬傷或搔傷而感染。
一、生物學(xué)特性
狂犬病病毒形似子彈狀，大小為75×100-300nm。病毒核心系由12000個核苷酸構(gòu)成的單負鏈RNA，其外繞有螺旋對稱的核衣殼（nucleoprotein,N蛋白)，表面尚有嵌著糖蛋白刺突（glycoprotein,G蛋白)的包膜，刺突與病毒感染性和毒力有關(guān)。
除G蛋白和N蛋白外，狂犬病病毒還有衣殼基質(zhì)蛋白（matrixprotein1,M1蛋白)、包膜基質(zhì)蛋白（matrixprotein2,M2蛋白)、轉(zhuǎn)錄酶蛋白（largeprotein,L蛋白)以及P43、P40微小蛋白。其中，M蛋白分子量為62000，是病毒最主要的組成成分之一，構(gòu)成病毒衣殼；分子量為80000的G蛋白，系病毒的表面成分，具有嗜神經(jīng)細胞的特性，可刺激機體產(chǎn)生中和抗體，被作為疫苗研究的重要成分；L蛋白，分子量為190000，系RNA轉(zhuǎn)錄酶；M1蛋白，分子量40000，是病毒屬、群特異性抗原；M2也是病毒的表面抗原，分子量約25000。
病毒的動物感染范圍較廣，在易感細胞（動物和人的中樞神經(jīng)細胞)，如大腦海馬回錐體細胞中增殖時，可形成胞漿內(nèi)嗜酸性包涵體（Negribody，內(nèi)基小體)，在狂犬病的診斷上有重要價值。
過去曾認為狂犬病病毒僅有一個血清型，然而近年來研究表明，從不同動物分離的病毒株的胞膜抗原結(jié)構(gòu)、培養(yǎng)特性等有著明顯差異。進一步應(yīng)用單克隆抗體技術(shù)可將病毒分為6個血清型，包括：血清1型（典型標準病毒株)、血清2型（標準拉各斯蝙蝠病毒,Lagos-batvirus)、血清3型（莫科拉病毒,Mokolavirus)、血清4型為花紋海格病毒（Duvenhagevirus)、血清5型（Obodhiang病毒原型株)和血清6型（Kotonkan病毒原型株)。
該病毒對外界的抵抗力不強，可被有機溶劑或表面活性劑等滅活。病毒對蛋白溶解酶、紫外線和X線敏感，pH4.0以下和pH10以上均可抑制病毒活性；不耐熱，40℃4小時或60℃30分鐘可滅活病毒，但于-70℃或冷凍干燥條件下能存活數(shù)年。
二、致病性與免疫性
狂犬病病毒感染導(dǎo)致狂犬病，多系狂犬或其他帶毒動物咬傷所致�？袢蛶Ф緞游锏耐僖褐泻胁《�，人被咬傷后，病毒可經(jīng)傷口侵入人體并在傷口局部增殖，增殖的病毒進入周圍神經(jīng)并沿傳入神經(jīng)軸索和其外間隙上行，經(jīng)背根節(jié)和脊髓至中樞神經(jīng)系統(tǒng)，病毒在神經(jīng)細胞內(nèi)大量增殖損傷腦干和小腦等中樞神經(jīng)系統(tǒng)。此后，病毒又經(jīng)傳出神經(jīng)播散至全身，大量分布于唾液腺、舌部味蕾、毛囊、皮脂腺、嗅神經(jīng)上皮細胞等處。因迷走神經(jīng)核、舌咽神經(jīng)核、舌下神經(jīng)核損傷，可出現(xiàn)呼吸肌、舌咽肌痙攣而表現(xiàn)出呼吸困難和吞咽困難等癥狀，甚至聞水聲即引起痙攣發(fā)作，故有恐水癥（hydrophobia)之稱；脊髓等處損傷則導(dǎo)致各種癱瘓；交感神經(jīng)可因病毒感染的刺激而使唾液腺和汗腺分泌增加。上述興奮性表現(xiàn)經(jīng)3-5天后轉(zhuǎn)入麻痹狀態(tài)，病人可出現(xiàn)昏迷、呼吸和循環(huán)衰竭，病死率幾乎是100%。該病的潛伏期約為1～3個月，但也有不到一周或長達數(shù)年之久的病例，潛伏期的長短與被狂犬咬傷部位距頭部的遠近相關(guān)，也取決于傷口內(nèi)感染的病毒量。
病毒的N蛋白和G蛋白含有刺激中和抗體產(chǎn)生及T細胞識別表位。動物試驗研究表明，感染狂犬病病毒后機體可產(chǎn)生特異性的體液和細胞免疫，可能系這些蛋白誘導(dǎo)機體產(chǎn)生中和抗體和CD4陽性或CD8陽性T細胞的結(jié)果，這在對抗或預(yù)防狂犬病病毒感染方面發(fā)揮著重要作用。
三、微生物學(xué)檢查法
人被狂犬咬傷是感染狂犬病病毒的主要途徑，一旦被犬咬傷，及時檢查動物是否患有狂犬病十分重要。做法是：①隔離觀察，因病毒感染動物后，于發(fā)病前5天其唾液中便可存有病毒，故觀察7～10天仍不發(fā)病，則表明該動物并非狂犬或其唾液中無病毒。②檢查病毒抗原，即將觀察期間發(fā)病的動物處死，取其大腦海馬回部位組織作印片和作組織切片，用免疫熒光法檢測病毒抗原和染色后觀察內(nèi)基小體。
對患者可應(yīng)用免疫熒光方法和免疫酶技術(shù)檢測患者唾液或某些組織標本中的病毒抗原；也可通過RT-PCR法擴增病毒的RNA，或采取病人唾液、腦脊液以及死后腦組織接種動物，以分離病毒，但需時長、敏感性低；患者血清中存在抗病毒抗體，可應(yīng)用中和試驗、補體結(jié)合試驗、間接血凝試驗、免疫熒光和ELISA進行測定，尤其是ELISA應(yīng)用廣泛，抗體僅在患者出現(xiàn)臨床癥狀后方可檢出，對臨床診斷意義不大。
四、防治原則
一旦患有狂犬病則難以治愈，因此狂犬病的預(yù)防十分重要。主要預(yù)防措施是捕殺野犬、嚴管家犬、給家犬注射疫苗。發(fā)現(xiàn)人被犬咬傷應(yīng)立即采取以下措施：①立即20%的肥皂水、0.1%新潔爾滅或清水反復(fù)沖洗犬咬傷口，然后用70%乙醇和碘酒涂擦。②于傷口周圍浸潤注射高效價狂犬病病毒抗血清，也可采取肌肉注射，以進行被動免疫，注射劑量為20IU/kg。③接種狂犬疫苗。該病的潛伏期較長，因此早期接種疫苗可預(yù)防發(fā)病，若抗血清與疫苗聯(lián)用則更為有效。目前，我國使用的疫苗，系用地鼠腎原代細胞或二倍體細胞培養(yǎng)制備的滅活疫苗，分別于1、3、7、14、28天各肌注一次，其免疫效果好且副作用少。應(yīng)用痘苗或腺病毒作載體，構(gòu)建表達狂犬病病毒G蛋白的重組疫苗，正試用于志愿者和動物，其效果和安全性尚待進一步研究確定。此外，對有接觸狂犬病病毒可能的人員（獸醫(yī)、動物管理員及野外工作者等)，也應(yīng)進行狂犬病疫苗的預(yù)防接種。
第二節(jié) 人乳頭瘤病毒
人乳頭瘤病毒（humanpapillomavirus,HPV)，歸類于乳多空病毒科（Papovaviridae)的乳頭瘤病毒屬，是引起皮膚、黏膜的尋常疣、扁平疣和尖銳濕疣（生殖器疣/性病疣)的病原體，并與宮頸癌的發(fā)生有密切關(guān)系。
一、生物學(xué)特性
HPV系無包膜球形病毒，直徑為50nm；病毒的核心為雙鏈DNA；病毒衣殼由兩種結(jié)構(gòu)蛋白構(gòu)成的72個殼微粒組成，為20面體。因為HPV的分離培養(yǎng)尚未成功，故其分類是基于DNA的同源性。根據(jù)病毒的DNA測序，HPV至少可分為77個型，各型間的基因相似度小于50%；若相似度大于50%，而限制性內(nèi)切酶譜不同者為HPV亞型。
病毒基因組有三種存在形式，即共價結(jié)合的閉合環(huán)狀DNA超螺旋結(jié)構(gòu)、開放的環(huán)狀結(jié)構(gòu)和線狀結(jié)構(gòu)。由三個基因區(qū)組成，包括含有7個早期開放讀框的早期區(qū)（E)，有2個晚期開放讀框的晚期區(qū)（L)和無編碼的上游調(diào)節(jié)區(qū)（URR)。早期區(qū)編碼與HPV復(fù)制、轉(zhuǎn)錄和細胞轉(zhuǎn)化相關(guān)的蛋白（E5、E6、E7)；晚期區(qū)編碼HPV的結(jié)構(gòu)蛋白，諸如組成病毒衣殼的主要衣殼蛋白L1和次要衣殼蛋白L2。E6和E7基因與受染細胞的轉(zhuǎn)化和腫瘤發(fā)生有密切關(guān)系，發(fā)揮癌基因功能，其基因產(chǎn)物可與宿主細胞抑癌基因編碼蛋白P53和Rb基因產(chǎn)物P110rh結(jié)合，阻礙P53和P110rh抑制細胞的分裂和增殖，使細胞從正常向惡性轉(zhuǎn)變。
HPV對皮膚及黏膜上皮細胞具有高親嗜性，病毒在細胞內(nèi)的復(fù)制受其分化階段的影響。病毒的感染和復(fù)制，誘導(dǎo)上皮細胞增生，使表皮變厚、可伴有棘層增生和一定程度的表皮角質(zhì)化，顆粒層可見核內(nèi)嗜堿性包涵體。上皮增生所形成的乳頭狀瘤即稱為疣（warts)。這種增生呈局部的且通常自發(fā)性退行性變，HPV的基因組存在于轉(zhuǎn)化的細胞內(nèi)，也可通過促進細胞增殖或延長上皮細胞的壽命，維持腫瘤生長。目前，HPV的體外培養(yǎng)尚未成功。
二、致病性與免疫性
HPV的傳播，主要是通過與感染者病變部位或被污染物品的直接接觸。生殖器感染主要是性接觸傳播；有增多趨勢的嬰幼兒尖銳濕疣，多系分娩過程或出生后與母體的密切接觸傳染所致；少數(shù)患者則可通過內(nèi)褲、浴巾、浴盆等生活用品感染。近年來，我國HPV帶毒者明顯增多，生殖器感染已占我國性病的第二位。病毒感染局限于局部，不引起病毒血癥。
HPV感染性疾病的潛伏期通常為3個月，也有短至1個月或長達6個月以上者。男性生殖器（陰囊少見)及周圍皮膚，女性生殖道、宮頸及肛周等部位均是疾病的好發(fā)部位。其臨床表現(xiàn)限于感染局部，可因病變發(fā)生的部位不同而異：①皮膚損傷的改變：在皮膚黏膜交界處可見多發(fā)性乳頭瘤樣或疣狀損傷；在溫度較低和干燥部位則表現(xiàn)為小而扁平的疣狀改變（如生殖器疣)；溫濕部位的病變常呈絲狀或乳頭樣，易融合成團。②其他表現(xiàn)：如小的濕疣可有患處痛癢感；直腸內(nèi)大濕疣有里急后重之感；陰道、宮頸濕疣可呈白帶增多或引起性交疼痛。此外，不同HPV型別侵犯的部位和所致疾病不盡相同（表34-1)。
HPV在細胞內(nèi)的存在方式與細胞發(fā)生癌變的可能性相關(guān)。病毒DNA若游離存在于宿主細胞，病變往往為良性，若病毒DNA整合于受染細胞則易導(dǎo)致細胞癌變。病毒E6、E7基因及其表達產(chǎn)物與細胞發(fā)生癌變密切相關(guān)。
HPV感染后可刺激機體產(chǎn)生特異性抗體，但對機體并無保護作用。機體的細胞免疫與抗HPV感染相關(guān)，細胞免疫功能低下者易發(fā)此病。
三、微生物學(xué)檢查法
疣可以通過顯微鏡觀察其組織學(xué)特性而證實，包括細胞增殖和角質(zhì)化。見有中空細胞的鱗狀上皮細胞聚集成團，提示有HPV感染。免疫熒光和免疫過氧化物酶技術(shù)可用以檢測HPV抗原，并借助電鏡觀察病毒體形態(tài)（圖34-2)。應(yīng)用HPV分子探針作核酸雜交，用于檢測病毒的DNA，有助于宮頸拭子和組織標本中有無HPV基因組的判斷；PCR法也可用以擴增標本中的HPV核酸。HPV不能生長于體外培養(yǎng)的細胞中，因此病毒的分離培養(yǎng)尚未開展。HPV抗體的測定可用于該病毒感染的流行病學(xué)調(diào)查，但很少用于疾病的診斷。
四、防治原則
接種福爾馬林滅活的HPV疫苗或病人損傷部位制備的自身疫苗可發(fā)揮一定的效應(yīng)，但未被廣泛應(yīng)用。鑒于HPV與腫瘤發(fā)生的關(guān)系，疫苗的研究和應(yīng)用更顯得十分重要。目前，最好的預(yù)防HPV感染的方法，仍然是避免與感染組織的直接接觸。
疣可自發(fā)消失，但需數(shù)月乃至數(shù)年的時間，故常采取人工干預(yù)的辦法，尤其對有痛感的和大塊的損傷。通過外科冷凍療法、電烙術(shù)或化學(xué)方法除疣是有效的，但�？稍侔l(fā)。應(yīng)用鬼臼樹脂（podophylline)或水楊酸伴福爾馬林或戊二醛外用也可奏效。注射干擾素同樣是臨床應(yīng)用的有效方法。對喉乳頭狀瘤必須采取外科手術(shù)療法。
第三節(jié) 細小病毒
細小病毒（Parvoviruses)是廣泛分布的鳥類和哺乳類動物病毒，已知有50多個型，其中最常見的導(dǎo)致人類疾病者為細小病毒B19。細小病毒歸類于細小病毒科（Parvoviridae)的細小病毒亞科(Parvovirinae)，該亞科包括三個屬，即細小病毒屬（代表種為小鼠細小病毒)、依賴性病毒屬（以腺聯(lián)病毒2型為代表)和紅病毒屬（Erythrovirus)，細小病毒B19為紅病毒屬的代表種。
細小病毒B19是紅斑傳染病（Erythemainfectiosum,也稱第五疾病)的病原體，也與慢性貧血病人再障危象的發(fā)作、溶血性貧血、AIDS、關(guān)節(jié)炎和宮內(nèi)感染相關(guān)。
一、生物學(xué)特性
細小病毒B19是一種非常細小的病毒，直徑18-26nm，20面體結(jié)構(gòu)，無包膜。病毒基因組為線性單鏈DNA，長為5.5kb（分子量約1.5-1.8×106)，編碼三種結(jié)構(gòu)蛋白和一種非結(jié)構(gòu)蛋白。
細小病毒B19的受體分子是一種位于紅細胞表面的糖脂抗原。病毒的轉(zhuǎn)錄、復(fù)制和裝配均發(fā)生在宿主細胞核內(nèi)。細胞代謝的“S”期有利于病毒的復(fù)制，提示病毒培養(yǎng)需要有絲分裂活化的宿主細胞。
二、致病性與免疫性bhskgw.cn
約90%以上的成人可檢測到細小病毒抗體，病毒感染多發(fā)于40歲以內(nèi)，25%的感染者可無臨床癥狀、50%伴有皮疹。傳染性紅斑最常見于4-15歲的兒童，有冬、春發(fā)病的趨勢。傳播途徑可能是呼吸道，也可能是通過其他胃腸道外途徑傳播。
細小病毒B19鼻腔接種志愿者提示，病毒首先在上呼吸道復(fù)制，接著發(fā)生病毒血癥，并在骨髓中的紅系前體細胞內(nèi)復(fù)制。病毒的復(fù)制抑制了紅細胞前體的增殖。宿主感染后可表現(xiàn)輕微的非特異性的癥狀，如咽喉疼痛、身體不適、肌痛、血紅蛋白輕度降低等，可持續(xù)1周左右，此后，癥狀自發(fā)減退。伴有慢性溶血性貧血（如鐮刀形紅細胞貧血)的患者，可出現(xiàn)危及生命的網(wǎng)織紅細胞減少，與再生障礙危象的發(fā)生相關(guān)。上述臨床癥狀出現(xiàn)于細小病毒B19感染健康兒童的最初過程，系溶細胞病毒感染所致。在此之后，呈現(xiàn)出接近2-3周的免疫期。免疫期包括紅疹和關(guān)節(jié)疼痛，故有傳染性紅斑之稱。此癥狀伴有IgM和循環(huán)免疫復(fù)合物的出現(xiàn)，提示與免疫介導(dǎo)有關(guān)。在感染過程中產(chǎn)生抗體推測可致終身免疫。
傳染性紅斑bhskgw.cn/pharm/的主要臨床表現(xiàn)為：早期在面部出現(xiàn)特征性的紅疹，似被打過的面頰。紅疹通常擴散，尤其是擴散至四肢暴露的部位，雖可自發(fā)消退，但常常復(fù)發(fā)。成人患者，易出現(xiàn)手、腕、膝或踝關(guān)節(jié)等關(guān)節(jié)炎，而紅疹可不出現(xiàn)或出現(xiàn)于關(guān)節(jié)炎之前。此外，妊娠婦女感染此病毒可引起胎兒畸形；慢性癥狀還有神經(jīng)病變、慢性貧血和脈管炎等。
三、微生物學(xué)檢查法
細小病毒B19不能用組織培養(yǎng)的方法分離鑒定，但可應(yīng)用酶和放射免疫分析、核酸雜交、免疫電鏡等方法，直接檢測血清或咽喉洗漱液的病毒；PCR是檢測該病毒的非常敏感的方法，但病毒感染之后的母體仍可保持陽性數(shù)月；骨髓中存在特征性的“巨大的”原始紅細胞，可以證實系細小病毒導(dǎo)致的再障危象。
診斷傳染性紅斑和再障危象患者更易開展的方法是病毒特異性IgM的檢測。在病毒增殖、排出后數(shù)日，病人出現(xiàn)紅疹及關(guān)節(jié)疼痛，此時是檢測IgM類抗體的最佳時間；但對AIDS患者此試驗無診斷意義，因為患者機體免疫障礙，不能針對病毒產(chǎn)生足量的抗體。
四、防治原則
控制呼吸道感染可減少細小病毒B19的傳播。目前尚無特異性的抗病毒療法，但慢性細小病毒B19誘導(dǎo)的貧血可施用免疫球蛋白。
