細胞色素C溶液—細胞色素C的測定—分光光度法

本方法采用分光光度法測定細胞色素C溶液中細胞色素C的含量。

本方法適用于細胞色素C溶液。

取本品適量，加磷酸鹽緩沖液溶解并定容，再加連二亞硫酸鈉，照紫外-可見分光光度法，在550nm波長處，以間隔0.5nm找出最大吸收波長，測定吸光度，按細胞色素C的吸收系數(shù)（E1m)為23.0計算，即得。

1. 連二亞硫酸鈉

2. 磷酸鹽緩沖液

1. 磷酸鹽緩沖液

取磷酸二氫鈉1.38g與磷酸氫二鈉31.2g，加水適量使溶解成1000mL，調(diào)節(jié)pH值至7.3。

2.供試品溶液的制備

精密量取本品適量（相當于細胞色素C100mg)，置10mL量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，即得供試品溶液。

注：“精密稱取”系指稱取重量應準確至所稱取重量的千分之一。“精密量取”系指量取體積的準確度應符合國家標準中對該體積移液管的精度要求。

供試品的測定

精密量取上述供試品溶液1mL置50mL的量瓶中，加磷酸鹽緩沖液溶解并定容，再加連二亞硫酸鈉15mg，照紫外-可見分光光度法，在550nm波長處，以間隔0.5nm找出最大吸收波長，依法測定吸光度，按細胞色素C的吸收系數(shù)（E1m)為23.0計算，即得。

中華人民共和國藥典，國家藥典委員會編，化學工業(yè)出版社，2005年版，二部，p.370。