香連丸－小檗堿的測(cè)定－薄層掃描法

本方法采用薄層掃描法測(cè)定香連丸中小檗堿的含量。

本方法適用于中成藥香連丸的測(cè)定。

1. 鹽酸

2 .甲醇

3 .苯

4.醋酸乙酯

5.異丙醇

6.氨水

1儀器

1.1薄層掃描儀

1.2涂布器

應(yīng)能使吸附劑在玻璃板上手工或自動(dòng)涂成一層符合厚度要求的均勻薄層。

1.3點(diǎn)樣器

一般采用微升毛細(xì)管或與之相應(yīng)的點(diǎn)樣器材。

1.4展開(kāi)室

可用適合薄層板大小的專(zhuān)用玻璃缸，底部平底或雙槽，蓋子須密閉。

2材料

2.1玻板

用10cm×10cm、10cm×15cm、20cm×10cm或20cm×20cm的規(guī)格，要求光滑、平整，洗凈后不附水珠，晾干。

2.2吸附劑

硅膠G其顆粒大小一般要求直徑為10～40μm。

1.對(duì)照品溶液的制備

精密稱(chēng)取干燥至恒重的鹽酸小檗堿對(duì)照品適量，加鹽酸-甲醇(1:100)溶解并配成濃度為14.4，28.8，43.2，57.6，72.0，86.4，115.2，161.1μg/mL的標(biāo)準(zhǔn)溶液。

2.供試品溶液的制備

精密稱(chēng)取香連丸適量（相當(dāng)于黃連0.1g)置100mL量瓶中，加鹽酸-甲醇（1：100)95mL，60℃水浴溫浸30min，強(qiáng)超聲處理1h，室溫放置24h，加鹽酸-甲醇（1：100)定容于5mL量瓶中，作為供試品溶液。

注：“精密稱(chēng)取”系指稱(chēng)取重量應(yīng)準(zhǔn)確至所稱(chēng)取重量的千分之一�！熬�密量取”系指量取體積的準(zhǔn)確度應(yīng)符合國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)中對(duì)該體積移液管的精度要求。

1薄層板制備

將吸附劑1份和水3份在研缽中向一方向研磨混合，去除表面的氣泡后，倒入涂布器中，在玻板上平穩(wěn)地移動(dòng)涂布器進(jìn)行涂布（厚度為0.25～0.5mm)取下涂好薄層的玻板，于室溫下，置水平臺(tái)上晾干，在反射光及透射光下檢視，表面應(yīng)均勻，平整，無(wú)麻點(diǎn)、無(wú)氣泡、無(wú)破損及污染，于110℃烘30分鐘，冷卻后立即使用或置干燥箱中備用，或用商品預(yù)制板。

2點(diǎn)樣

2.1對(duì)照品點(diǎn)樣

各吸取標(biāo)準(zhǔn)系列濃度的鹽酸小檗堿溶液1μL點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，如用點(diǎn)樣器點(diǎn)樣到薄層板上，一般為圓點(diǎn)，點(diǎn)樣基線距底邊1.0～1.5cm，樣點(diǎn)直徑一般不大于2mm，點(diǎn)間距離可視斑點(diǎn)擴(kuò)散情況，以不影響檢出為宜。點(diǎn)樣時(shí)必須注意勿損傷薄層表面。

2.2供試品點(diǎn)樣

精密吸取69.2μg/mL供試品溶液和161.2μg/mL對(duì)照品溶液各1μL，分別交叉點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，如用點(diǎn)樣器點(diǎn)樣到薄層板上，一般為圓點(diǎn)，點(diǎn)樣基線距底邊1.0～1.5cm，樣點(diǎn)直徑一般不大于2mm，點(diǎn)間距離可視斑點(diǎn)擴(kuò)散情況，以不影響檢出為宜。點(diǎn)樣時(shí)必須注意勿損傷薄層表面。

3展開(kāi)

將點(diǎn)好樣品的薄層板放入展開(kāi)缸的展開(kāi)劑中，以苯-醋酸乙酯-異丙醇-甲醇-濃氨水（46:15:12:5:4滴)為展開(kāi)劑，上行展開(kāi)揮干溶劑后測(cè)定。

4含量測(cè)定

4.1標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制

在薄層板上覆蓋同樣大小的玻璃板，周?chē)�用膠布固定，進(jìn)行熒光掃描測(cè)定，激發(fā)光波長(zhǎng)343nm，測(cè)量對(duì)照品熒光強(qiáng)度，以鹽酸小檗堿點(diǎn)樣量(μg)對(duì)熒光強(qiáng)度積分值回歸，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

4.2供試品測(cè)定

在薄層板上覆蓋同樣大小的玻璃板，周?chē)�用膠布固定，進(jìn)行熒光掃描測(cè)定，激發(fā)光波長(zhǎng)343nm，測(cè)量供試品熒光強(qiáng)度，計(jì)算含量。

張小榮，刑黎明，王蘭，等. 熒光薄層法測(cè)定香連丸中小檗堿.西北藥學(xué)雜志，1998,13(6):284