方法名稱： |
復(fù)方黃連素片－鹽酸小檗堿的測(cè)定－高效液相色譜法 |
應(yīng)用范圍： |
本方法采用高效液相色譜法測(cè)定復(fù)方黃連素片中鹽酸小檗堿的含量。 本方法適用于中成藥復(fù)方黃連素片。
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方法原理： |
供試品細(xì)粉溶于沸水中，加鹽酸處理，上清液用流動(dòng)相稀釋，進(jìn)入高效液相色譜儀進(jìn)行色譜分離，用紫外吸收檢測(cè)器，于波長(zhǎng)265nm處檢測(cè)鹽酸小檗堿的峰面積，計(jì)算出其含量。 |
試劑： |
1.乙腈 2.稀鹽酸 取鹽酸234mL,加水稀釋至1000mL 3. 磷酸二氫鉀溶液，0.033mol/L |
儀器設(shè)備： |
1 儀器 1.1 高效液相色譜儀 1.2 色譜柱 十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，理論塔板數(shù)按鹽酸小檗堿峰計(jì)算應(yīng)不低于3000。 1.3 紫外吸收檢測(cè)器 2 色譜條件 2.1 流動(dòng)相：乙腈 0.033mol/L磷酸二氫鉀溶液 = 40 60 2.2 檢測(cè)波長(zhǎng)：265nm 2.3 柱溫：室溫 |
試樣制備： |
1.稱取供試品 取本品20片，除去糖衣，精密稱定，求出平均片重，研細(xì)，精密稱取總重量的1/20，為供試品。 2.對(duì)照品溶液的制備 精密稱取在100°C干燥的鹽酸小檗堿對(duì)照品約25mg，置250ml燒杯中，加沸水約150ml使溶解，稍冷后加入稀鹽酸3ml，攪勻，放冷，轉(zhuǎn)移至250ml量瓶中，加水至刻度，搖勻，精密量取2ml，用流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻（每1mL含鹽酸小檗堿0.008mg)。 3,供試品溶液的制備 供試品置250ml燒杯中，加沸水約150ml使溶解，稍冷后加入稀鹽酸3ml，攪勻，放冷，轉(zhuǎn)移至250ml量瓶中，加水至刻度，搖勻，離心（每分鐘轉(zhuǎn)速位4000轉(zhuǎn))，精密量取上清液2ml，置25ml量瓶中，用流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻,作為供試品溶液。 注：“精密稱取”系指稱取重量應(yīng)準(zhǔn)確至所稱取重量的千分之一�！熬芰咳 毕抵噶咳◇w積的準(zhǔn)確度應(yīng)符合國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)中對(duì)該體積移液管的精度要求。 |
操作步驟： |
分別精密吸取對(duì)照品溶液和供試品溶液各10mL，注入高效液相色譜儀，用紫外吸收檢測(cè)器于波長(zhǎng)265nm處測(cè)定鹽酸小檗堿（C20H17NO4 · HCl)的峰面積，計(jì)算出其含量。 |
參考文獻(xiàn)： |
中華人民共和國(guó)藥典，國(guó)家藥典委員會(huì)編，化學(xué)工業(yè)出版社，2005版，一部，p534。 |
