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附子—次烏頭堿的含量測定方法—HPLC-UV

  
方法名稱:
  附子—次烏頭堿的含量測定—HPLC-UV
應(yīng)用范圍:
  用于附子中次烏頭堿的含量測定
方法原理:
 本品細(xì)粉用乙醚-氯仿一試液提取后,再用硫酸溶液提取,經(jīng)液相色譜儀分離,在235nm處測定,按外標(biāo)法計(jì)算含量。
儀器設(shè)備及實(shí)驗(yàn)條件:
 

儀器設(shè)備  HP-1050高效液相色譜儀。

色譜條件  色譜柱:Hypersil ODS (4.60mm×25 mm,5μm);流動相:0.2%冰醋酸(用三乙胺調(diào)pH6.25)-乙腈(63∶37);流速:1.0mL/ min;檢測波長:235nm;柱溫:室溫。
試樣制備:
 

對照品溶液的制備  精密稱取次烏頭堿適量。用甲醇溶解并分別配制成0. 0377mg/ml的對照品溶液。

供試品溶液的制備  精密稱取本細(xì)粉約5g的量,置具塞錐形瓶中,加入乙醚-氯仿(3∶1)的混合溶液50ml和氨試液4ml,搖勻,放置過夜,濾過,藥渣加混合溶液50ml,連續(xù)振搖1h,濾過,藥渣再用上述混合溶液洗滌3~4次,15ml/次,濾過,合并濾液與洗液,蒸干。殘?jiān)踊旌先芤?ml使溶解,轉(zhuǎn)移至分液漏斗中,用0.05mol/ml的硫酸溶液提取4次,10ml/次,合并硫酸液,加濃氨試液調(diào)pH值9~10,搖勻,用氯仿提取4次,10ml/次合并氯液,蒸干,殘?jiān)蛹状既芙獠⒍ㄈ葜?ml。
操作步驟:
  分別精密量取對照品溶液和供試品溶液各20μL,注入液相色譜儀,在上述色譜條件下,測定峰面積,按外標(biāo)法計(jì)算含量。
附件:
  點(diǎn)擊下載 (解壓密碼:bhskgw.cn)
備注:
 
參考文獻(xiàn):
  葉振強(qiáng),張輝珍.高效液相色譜法測定附子中次烏頭堿的含量.時(shí)珍國醫(yī)國藥.2006,17 (2) :197~198
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