附子—生物堿的含量測(cè)定方法—RP-ion-pair-HPLC

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方法名稱：	附子—生物堿的含量測(cè)定—RP-ion-pa ir- HPLC
應(yīng)用范圍：	用于附子中生物堿的含量測(cè)定
方法原理：	本品用濃氨水浸潤，再用二氯甲烷超聲提取，經(jīng)液相色譜儀分離，在230nm處測(cè)定，按外標(biāo)法計(jì)算含量。
儀器設(shè)備及實(shí)驗(yàn)條件：	儀器設(shè)備日本島津LC-10AT高效液相色譜儀；SPD-10A紫外檢測(cè)器；Class-VP色譜工作站。色譜條件　AichromBond-1 C18柱；流動(dòng)相：乙腈-5mmol·L^-1 NaH₂PO₄溶液（磷酸調(diào)至pH 4.5，50∶50，內(nèi)含7mmol·L^-1SDS；檢測(cè)波長：235nm；流速：1.0 mL·min^-1；柱溫：35℃。
試樣制備：	對(duì)照品溶液的制備　　精密稱取苯甲酰新烏頭原堿4.97mg、苯甲酰烏頭原堿2.02mg、北烏堿2.10mg、新烏頭堿1.89mg、烏頭堿2.02mg和次烏頭堿2.10mg，置10mL量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為混合對(duì)照品溶液A。精密吸取混合對(duì)照品溶液A 1mL，置25mL量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，作為混合對(duì)照品溶液B。供試品溶液的制備　將附子藥材粉碎，過3號(hào)篩，取藥材粉末10g，精密稱定，加濃氨試液2 mL使其潤濕，密塞放置1h。加氨水飽和的乙醚100 mL，超聲處理2min，放置過夜。過濾，并用氨水飽和的乙醚洗滌3次，每次15mL，收集、合并所有濾液，于水浴上揮干溶劑。精密加入甲醇10mL溶解殘?jiān)�，過濾，取續(xù)濾液作為供試品溶液。
操作步驟：	在選定的色譜條件下，分別吸取混合對(duì)照品溶液B和供試品溶液10μL,注入液相色譜儀，記錄色譜圖，測(cè)定峰面積，按外標(biāo)法計(jì)算各組分的含量。
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備注：
參考文獻(xiàn)：	劉秀秀，晁若冰等. 反相離子對(duì)色譜法測(cè)定附子中生物堿成分. 藥學(xué)學(xué)報(bào).2006，41 (4) :365～369