公開(公告)號(hào)
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CN1824803A
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公開(公告)日
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2006.08.30
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申請(專利)號(hào)
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CN200510062395.9
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申請日期
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2005.12.31
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專利名稱
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一種可檢測和分型所有已知生殖道人乳頭瘤病毒的方法
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主分類號(hào)
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C12Q1/68(2006.01)I
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分類號(hào)
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C12Q1/68(2006.01)I
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分案原申請?zhí)? |
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優(yōu)先權(quán)
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申請(專利權(quán))人
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浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬婦產(chǎn)科醫(yī)院
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發(fā)明(設(shè)計(jì))人
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陳懷增;葉 楓;謝 幸;呂衛(wèi)國;洪 蝶;梁朝霞
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地址
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310006浙江省杭州市學(xué)士路1號(hào)
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頒證日
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國際申請
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進(jìn)入國家日期
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專利代理機(jī)構(gòu)
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杭州求是專利事務(wù)所有限公司
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代理人
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周 烽
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國省代碼
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浙江;33
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主權(quán)項(xiàng)
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一種可檢測和分型所有已知生殖道人乳頭瘤病毒的方法,其特征在于,包括如下步驟: (1)宮頸分泌物或組織標(biāo)本中提取DNA,作為PCR擴(kuò)增的模板。 (2)用共同引物MY09/11或其改進(jìn)引物進(jìn)行PCR擴(kuò)增。 (3)瓊脂糖凝膠電泳判斷PCR結(jié)果,出現(xiàn)442~458bp的電泳條帶者為陽性。 (4)用RsaI、MseI、PstI和HaeIII對陽性PCR產(chǎn)物分別進(jìn)行酶切。 (5)對各酶切產(chǎn)物進(jìn)行瓊脂糖凝膠電泳,測量各酶切片段長度。 (6)根據(jù)各酶的酶切產(chǎn)物的片段長度,對照生殖道HPV基因型MY09/11擴(kuò)增產(chǎn)物RMPH酶切數(shù)據(jù)庫進(jìn)行HPV基因型的判斷。
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摘要
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本發(fā)明公開了一種檢測和分型所有已知生殖道人乳頭瘤病毒的方法。該方法能區(qū)分目前已知可感染生殖道粘膜的48型HPV及其常見混合感染,同時(shí)在保證敏感性、特異性的前提下,根據(jù)最佳選擇、優(yōu)化搭配的原則選出Rsa I、MseI、Pst I和HaeIII四個(gè)常用內(nèi)切酶組合,并對照建立的生殖道HPV基因型MY09/11擴(kuò)增產(chǎn)物RMPH酶切數(shù)據(jù)庫進(jìn)行HPV基因型的判斷。此方法操作簡單方便、省時(shí),成本低,所需設(shè)備(PCR儀)已普及于縣級醫(yī)院,且費(fèi)用極為低廉,可以進(jìn)行高通量實(shí)驗(yàn),這為在我國開展HPV感染的流行病學(xué)調(diào)查提供了技術(shù)上的可操作性。
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國際公布
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