概述
雞新城疫(NewcastleDisease)是由副粘病毒引起的一種高度接觸性傳染病,主要侵害雞和火雞,其他禽類和野禽也能感染,亦可感染人。本病常呈敗血癥經(jīng)過,其特征是呼吸困難,下痢和神經(jīng)癥狀。主要病理變化為粘膜和漿膜出血,腺胃粘膜出血具有診斷意義。
本病于1926年首先發(fā)現(xiàn)于印度尼西亞,同年,發(fā)現(xiàn)于英國新城,經(jīng)Doyle研究證明,本病的病原與雞瘟病原(禽流感病毒)不同,為了有別于雞瘟,即根據(jù)發(fā)現(xiàn)地名而命名,故名新城疫,此后本病迅速向世界各地傳播。
我國首先報道雞新城疫,是1935年發(fā)生在河南,當(dāng)時認為是雞瘟流行。梁英、馬聞天等(1946)通過病原分離才證實我國流行的所謂雞瘟是新城疫,以后在四川、上海、廣西都發(fā)現(xiàn)有新城疫流行,50年代本病在全國各地廣泛流行。本病是雞病中危害最嚴重的一種,死亡率很高,造成較大經(jīng)濟損失,F(xiàn)在我國各地普遍開展免疫接種,免疫監(jiān)測和綜合防制措施,許多省區(qū)雞新城疫已基本得到控制。
最急性新城疫:死亡照片
病原
(1)、病毒的形態(tài)和結(jié)構(gòu)
雞新城疫病毒在分類上是屬于副粘病毒科(Paramyxoviridae)副粘病毒屬(Paramyxovirus)。成熟的病毒粒子近圓形,多數(shù)呈蝌蚪狀,直徑為120~300nm。具有囊膜,內(nèi)含有一長螺旋狀核衣殼,直徑17~18nm,囊膜外有長約8~12nm的糖蛋白(HN和F)纖突。螺旋形核衣殼是由一個與蛋白相聯(lián)結(jié)的單股RNA所形成,具有RNA聚合酶活性,它被一個雙層脂質(zhì)膜所包裹,脂質(zhì)膜內(nèi)襯有一層特殊的M蛋白,而脂質(zhì)膜的外層又被具有纖突的糖蛋白所覆蓋,使外形呈花穗狀。新城疫病毒的基因組包括6組基因,用于編碼6種病毒結(jié)構(gòu)蛋白。有3種與病毒的脂質(zhì)膜有關(guān),即覆蓋在病毒囊膜表面的纖突上的血凝素和神經(jīng)氨酸酶活性的(HN)糖蛋白、融合(F)糖蛋白,以及脂膜內(nèi)的非糖基化內(nèi)膜蛋白(M)。另外3種與基因組RNA有關(guān),它們是核殼蛋白(NP)、磷蛋白(P)、高分子量蛋白(L)。融合糖蛋白F是起病毒與細胞融合、溶血使其病毒穿過細胞膜作用。HN和F各有一個前身結(jié)構(gòu)HN0和F0,它們?nèi)狈ι飳W(xué)活性,但可通過蛋白裂解變成HN和F,F(xiàn)蛋白被認為是新城疫病毒毒株毒力的主要決定因素。新城疫病毒的HN糖蛋白含有血細胞凝集和神經(jīng)氨酸酶兩種活性,具有病毒粒子與細胞受體最初結(jié)合和受體破壞活性,HN特異性抗血清和單抗能抑制融合,證明病毒的吸附是融合的一種前提,這樣病毒的穿透才能發(fā)生。
最急性新城疫:病雞腸道出血,腫脹,外觀可見出血斑
(2)、病毒的培養(yǎng)特性
雞新城疫病毒能適應(yīng)于雞胚,病毒以尿囊腔接種于9~10日齡雞胚,在雞胚能迅速繁殖。雞胚接種病毒后的死亡時間,隨病毒毒力和接種劑量而不同,強毒株一般在28-72h死亡,多數(shù)在36-48h死亡;弱毒株感染雞胚死亡時間可延長至5~6天。死亡的胎兒全身充血或出血;頭部和足趾部出血更為常見。江漢湖等(1987)報道,應(yīng)用新城疫病毒的不同毒株感染雞胚,發(fā)現(xiàn)強毒株接種雞胚后,胚體的血凝價(HA)和尿囊液相同水平,而中等毒力和弱毒株尿囊液HA價都比胚體高,有的弱毒株感染雞胚后,胚體測不出HA價。鵪鶉胚和鵝胚對新城疫病毒也有易感性。新城疫病毒可以在多種細胞培養(yǎng)上生長繁殖,包括雞胚、猴腎和Hela細胞。最常用的是雞胚成纖維細胞,細胞培養(yǎng)中病毒感染的最初表現(xiàn)為合胞體形成的細胞致病作用,但細胞培養(yǎng)物的病毒HA價比雞胚低,有的測不出來。有的毒株在細胞培養(yǎng)時不出現(xiàn)細胞致病作用,但具有血吸附作用,可利用它來檢查其病毒在細胞培養(yǎng)上生長繁殖情況。由于病毒的細胞致病作用,使感染的細胞形成空斑,強毒株形成空斑大,低毒力的毒株或弱毒株如果培養(yǎng)中不加入鎂離子和乙二胺四乙酸二鈉(DEAE)則不能顯示出空斑。哈爾濱獸醫(yī)研究所李德山報道(1984),新城疫I系疫苗毒株在雞胚成纖維細胞上形成大小不等空斑,中等空斑占多數(shù),其毒力較強,小空斑對雛雞毒力弱,因此可以利用空斑技術(shù)來選擇毒力弱而免疫原性好的疫苗株。李一經(jīng)(1990)報道,從黑龍江不同地區(qū)分離7株新城疫強毒,經(jīng)空斑測定出現(xiàn)中、小清亮空斑,中空斑的毒力均大于同源的小空斑,這說明bhskgw.cn/shouyi/yu/shuichan/病毒株的毒力越強,空斑也越大?瞻哂袩o色和紅色之分,它與病毒毒力無關(guān)。
最急性新城疫:病雞出現(xiàn)神經(jīng)癥狀,扭頸,呈觀星狀
(3)、病毒對紅細胞的凝集特性
雞新城疫病毒具有一種血凝素,可與紅細胞表面受體連結(jié),使紅細胞凝集。所有新城疫病毒株都有凝集多種動物紅細胞的作用,但以雞的紅細胞為最好。豚鼠和人的‘O’型紅細胞亦能凝集,對牛、羊的紅細胞凝集不穩(wěn)定,馬和豬的紅細胞不凝集,但有個別弱毒株可以凝集馬的紅細胞。新城疫病毒在0.1%福爾馬林的作用下,血凝性明顯減弱,但Lasota弱毒株較為穩(wěn)定。病毒和紅細胞結(jié)合不是永久性的,經(jīng)過一定的時間,病毒與紅細胞脫離又懸于液體中,這稱為解脫現(xiàn)象,其原因是病毒表面有一種神經(jīng)氨酸酶,而紅細胞表面受體含有神經(jīng)氨酸,當(dāng)它被酶破壞后,病毒即與紅細胞脫離。因此,對新城疫病毒進行血凝試驗時,應(yīng)及時觀察其血凝反應(yīng),否則得不到正確的結(jié)果。隨著病毒株不同,其解脫的時問有差異,一般弱毒株解脫時間快,強毒株解脫較慢。新城疫病毒對紅細胞的凝集能力,可被抗新城疫血清所抑制,這種抑制作用具有特異性,因此可利用它進行病毒鑒定,診斷,與真性雞瘟(禽流感)類別診斷,還可用以測定疫苗的免疫效果,進行流行病學(xué)調(diào)查。
禽流感病毒也能凝集多種動物的紅細胞,由于它凝集動物的紅細胞范圍更為廣泛,據(jù)中國獸藥監(jiān)察所以甲系新城疫病毒與千葉系禽流感病毒的比較結(jié)果,可以看出凝集紅細胞的動物種類有明顯的差別。
最急性新城疫:病雞從口腔流出酸臭粘液
(4)、新城疫病毒的抗原性和毒力
根據(jù)我國各地分離病毒株進行病毒交互免疫試驗和中和試驗,未發(fā)現(xiàn)有不同血清型。但是從交叉血凝抑制試驗和雞胚中和試驗,證明不同地區(qū)病毒的抗原性是有差異的。據(jù)劉立人和中國獸藥監(jiān)察所報道,對國內(nèi)不同地區(qū)分離到15株強毒株,進行毒力比較,其毒力存在很大的差異,它隨宿主與外界條件之間的相互關(guān)系而發(fā)生改變,如在易感雞群中流行時,可使毒力增強,在具有不同程度免疫力的雞群中流行時,毒力有所減弱,出現(xiàn)有的毒株只能使雛雞發(fā)病,有的毒株對雛雞也不能引起嚴重癥狀或不致病,這樣可從雛雞中分離到自然弱毒株。新城疫病毒的毒力測定很難通過血清學(xué)的方法如紅細胞凝集試驗、血凝抑制試驗、流行病學(xué)、癥狀和病理變化來判定,它區(qū)分的標(biāo)準(zhǔn)是根據(jù)國際通用的:1.最小致死量病毒致死雞胚的平均時間(MDT);2.1日齡雛雞腦內(nèi)注射的致病指數(shù)(ICPI);3.6周齡雞靜脈注射的致病指數(shù)(IVPI);4.病毒凝集紅細胞后解脫速率;5.病毒血凝素對熱穩(wěn)定性。
按照上述標(biāo)準(zhǔn)可將新城疫病毒的毒力大小分為3大類:(1)低毒力株(弱毒株)Lentogenic;(2)中等毒力株Mesogenic;(3)強毒力株Velogenic。
最急性新城疫:病雞腹部脂肪出現(xiàn)細小的出血點
(5)、病毒在雞體內(nèi)分布
雞新城疫病毒存在于病雞的所有組織和器官內(nèi),包括病雞的血液,病雞的分泌物和排泄物均含有病毒,以腦、肺、脾含毒量最多,骨髓里病毒維持時間最長。因此分離病毒時多采用病雞的肺、脾和腦作為接種材料。
(6)、病毒的理化特性
雞新城疫病毒對熱的抵抗力較其他病毒強,一般在60℃經(jīng)30min,55℃經(jīng)45min即死亡。在37℃可存活7~9天,在-20℃經(jīng)幾個月,在-70℃經(jīng)幾年感染力不受影響。在新城疫暴發(fā)后經(jīng)2~8周,仍能從雞舍污染物、蛋殼、羽毛中分離到病毒。病毒對pH較穩(wěn)定,在pH2~12的環(huán)境下,作用1h時不受影響。病毒對化學(xué)消毒劑的抵抗力不強,一般常用的消毒劑,如苛性鈉、福爾馬林、5%漂白粉、抗毒威等在5~20min內(nèi)即可將病毒滅活。青霉素、鏈霉素和0.02%硫柳汞對新城疫病毒沒有作用,一般常用它作為病毒分離和制造疫苗時以防止細菌污染。
最急性新城疫:病雞喉頭和氣管粘膜充血、出血
流行病學(xué)
雞、火雞及野雞對本病都有易感性,其中以雞最易感,其次是野雞。不同品種的雞和年齡對本病的感受性也有差異,來航雞及雜種雞比本地雞感受性高,幼雛和中雛的感受性比老齡雞高,死亡率也高,而且在自然感染中,雛雞多表現(xiàn)為急性型。除雞外其他禽類和鳥類也能感染,火雞和珍珠雞易感性比雞低。動物園里野禽如孔雀、燕八哥、鸚鵡、烏鴉、鵪鶉等都能分離到新城疫病毒,在我國動物園里有孔雀自然感染本病的病例。據(jù)周永連報道(1990),在貴州發(fā)現(xiàn)越冬的黑頸鶴和灰鶴暴發(fā)新城疫,從病死鶴的肝、脾和腦分離到新城疫強毒株,回歸雞與自然病例相似,近幾年來,我國飼養(yǎng)的肉鴿、信鴿和鵪鶉中有流行新城疫的報道,據(jù)南京農(nóng)業(yè)大學(xué)報道(1983),以新城疫病毒的強毒株人工感染不同日齡的鵪鶉,結(jié)果幼齡鵪鶉對新城疫病毒很敏感,感染后72h死亡,成年鵪鶉耐受性較強,感染后在成年鵪鶉的血清中可測出新城疫血凝抑制抗體。水禽不能自然感染,但可從鴨、鵝、天鵝中分離到病毒,據(jù)國內(nèi)報道從外觀健康的家鴨泄殖腔內(nèi),分離到低毒力、中等毒力和強毒力株的新城疫病毒。同時鴨的卵黃和血清中,亦能檢出新城疫抗體。從麻雀體內(nèi)亦可分離出新城疫病毒和檢出抗體,在新城疫流行的雞場內(nèi),從1只麻雀的呼吸道和泄殖腔分離到1株新城疫病毒,經(jīng)生物學(xué)鑒定,證明是強毒株。哺乳動物對本病有抵抗力,人類常因接觸病雞和弱毒疫苗而被感染,主要是引起眼結(jié)膜炎。據(jù)報道,一個實驗室工作人員在收獲雞胚時,因新城疫病毒濺人眼內(nèi)而引起感染,24h內(nèi)出現(xiàn)眼結(jié)膜炎。在職業(yè)人群中,采用ELISA和HI的方法,在血清中均能檢出陽性。從上述易感性來看,新城疫病毒適應(yīng)的宿主譜較廣,特別是水禽和飛鳥,雖然還沒有發(fā)現(xiàn)自然感染病例,但是這些禽類可以排毒,也是一種威脅,所以對雞新城疫病毒的生態(tài)學(xué)方面應(yīng)引起關(guān)注。
雞新城疫的主要傳染來源是病雞和帶毒雞,受感染雞在癥狀出現(xiàn)前24h,其分泌物和排泄物中發(fā)現(xiàn)有新城疫病毒。潛伏期的病雞所生的蛋,也含有病毒。如果蛋內(nèi)含有病毒時,在孵化過程中可致死雞胚,死亡雞胚中病毒能存活數(shù)天。痊愈雞帶毒和排毒的情況則不一致,多數(shù)在癥狀消失后5~7天就停止排毒。在流行停止后的帶毒雞常呈慢性經(jīng)過,一般癥狀消失,但仍遺留有神經(jīng)癥狀的病雞,保留這些慢性病雞,是造成本病繼續(xù)流行的原因。本病傳播途徑主要是呼吸道和消化道,雞感染后2天或出現(xiàn)癥狀前1天,開始將病毒釋放出呼吸道散布在空氣中,持續(xù)幾天,當(dāng)健康雞吸入病毒后發(fā)生感染。本病傳染也可通過病雞和健康雞的直接接觸,在自然感染情況下,與病雞同群的有感受性的雞,很少能幸免感染。其次通過帶毒雞的遷移,肉蛋品的運輸以及屠宰的下腳料如羽毛、蛋殼、血、內(nèi)臟、消化道的內(nèi)容物、病雞排泄物等污染飼料和飲水、用具等都可傳播本病,如果不加妥善處理和嚴格消毒,在短時間內(nèi)即放入健康雞是極為危險的。病毒也可以通過損傷的皮膚和粘膜進入機體,還可以通過活媒介物傳播,如蚊叮咬,飼養(yǎng)員和獸醫(yī)人員串圈而傳播。野鳥在傳播本病中有一定意義,以人工感染雞新城疫的麻雀和鴿的糞便喂健康雞,可引起發(fā)病死亡,證明帶毒的麻雀和鴿能成為本病的傳播者。
近年來,在我國屢有發(fā)現(xiàn)免疫雞群仍發(fā)生新城疫的流行,其主要特征以呼吸道和神經(jīng)系統(tǒng)癥狀為主,而典型的新城疫病理變化,如腺胃粘膜出血,腸粘膜出血,盲腸扁桃體壞死等卻少見,往往須經(jīng)實驗室診斷才能確診為新城疫。發(fā)病率和死亡率波動較大,據(jù)內(nèi)蒙古農(nóng)牧學(xué)院調(diào)查4個雞群最高發(fā)病率為85%,最低為15%;病死率高者可達80%,最低為15%,從調(diào)查中發(fā)現(xiàn)免疫雞群發(fā)生新城疫的因素很多,其主要原因是疫苗接種時母源抗體過高;疫苗質(zhì)量和保存不當(dāng);免疫接種的程序不合理;其他疫病的干擾以及新城疫強毒株毒力不同,因而造成雞群免疫狀態(tài)的差異,低抗體水平的免疫雞不能抵抗強毒的侵襲,引起本病的傳播。
本病一年四季均可發(fā)生,但以春、秋兩季較多,這取決于不同季節(jié)中新雞的數(shù)量,雞只流動情況和適于病毒存活及傳播的外界條件,例如雞舍通風(fēng)不良,長期保持有較高濃度的氨氣,使雞群抵抗力下降,當(dāng)有新城疫強毒株存在時而發(fā)生本病的流行。此外,當(dāng)前引種渠道很多,購人貌似健康帶毒雞,并將其合群飼養(yǎng);就形成大量傳染源的散布。如果宰殺病雞或帶毒雞的血水、羽毛、污水、內(nèi)臟及污染的環(huán)境不經(jīng)妥善處理,也是造成本病流行的常見因素。易感雞群遭受新城疫強毒株侵害時,可迅速傳播,呈毀滅性流行,發(fā)病率和死亡率可高達90%以上。
雞新城疫在一個雞群流行時,往往在開始病死雞不多,表面上還是平靜的,實際上此時病毒已在全群中傳播,多數(shù)雞處于潛伏期中。以后的4~6天內(nèi),發(fā)病率呈直線上升,病死率也呈直線上升,且多表現(xiàn)為急性型。當(dāng)一個雞群流行疫病時,死亡數(shù)每天呈直線上升,一天死亡達數(shù)百只,應(yīng)首先懷疑為新城疫。雞買賣活動頻繁,在收購大批雞中很可能接觸到病雞,并且運輸工具也常成為病毒的攜帶者。
最急性新城疫:病雞拉稀黃綠便
臨床癥狀
潛伏期長短,與病毒毒力侵入雞體內(nèi)的病毒量以及個體的抵抗力有關(guān),人工感染為2~5天,自然感染時潛伏期一般為3~5天,毒力弱的可延至20天。根據(jù)臨診表現(xiàn)和病程長短,病雞的癥狀可分為最急性、急性、亞急性或慢性三種類型。
最急性型此型多見于流行初期,突然發(fā)病,常無特征性癥狀而突然死亡,雛雞和中雛為多見。
急性型在發(fā)病初期體溫升高,一般可達43~44"C,病雞精神沉郁,食欲減退或消失,渴欲增加。病雞不喜走動,獨棲一隅,羽毛松亂無光澤,垂頭縮頸,翅膀下垂,冠和肉髯發(fā)紺,眼半閉或全閉,似昏睡狀態(tài)。產(chǎn)蛋母雞出現(xiàn)產(chǎn)蛋下降或停止,而且軟殼蛋增多,蛋殼顏色變淺(褐色蛋)。隨著病程延長,病雞出現(xiàn)咳嗽,呼吸困難,吸氣時常伸展頭頸作開口呼吸,時常發(fā)出‘咯咯’的叫聲。
嗉囊滿脹,內(nèi)充滿多量酸臭液體及氣體,將病雞倒提起,酸臭液體即從VI中流出?谇缓捅乔环置谖镌龆,病雞為了排出其中的粘液,時時搖頭和頻頻吞咽。病雞常出現(xiàn)下痢,排出黃白色或黃綠色的稀糞,有時混有少量血液。
有的病雞出現(xiàn)神經(jīng)癥狀,如兩腿麻痹,站立不穩(wěn),共濟失調(diào)或作圓圈運動,頭頸向后仰翻,或向下扭轉(zhuǎn),有時置于背部上。最后體溫下降,不久在昏迷中死亡,1月齡雞病程較短,成年雞病程長些,病死率都很高。
亞急性或慢性型初期癥狀與急性相似,不久后癥狀漸見減輕,同時出現(xiàn)神經(jīng)癥狀。病雞翅膀和腿麻痹,表現(xiàn)跛行或站立不穩(wěn),頭頸向后或向一側(cè)扭曲。有的病雞貌視正常,但受到驚動時,突然伏地旋轉(zhuǎn),動作失調(diào),反復(fù)發(fā)作,終于癱瘓或半癱瘓。有的病雞因吃食受到影響漸漸消瘦,終歸死亡。此型多發(fā)生于流行后期的成年雞,病死率較低。
近幾年來,在免疫雞群中發(fā)生新城疫,往往表現(xiàn)亞臨床癥狀或非典型,發(fā)病率較低,一般在10%~30%,病死率也低,一般在15%~45%。主要表現(xiàn)為呼吸道癥狀和神經(jīng)系統(tǒng)障礙,當(dāng)呼吸系統(tǒng)癥狀減輕時,亦趨向于康復(fù),少數(shù)病雞遺留頭頸扭曲。產(chǎn)蛋雞(周齡大的)感染新城疫,主要出現(xiàn)產(chǎn)蛋下降,還伴有呼吸道癥狀,病死率很低。
最急性新城疫:病雞腺胃乳頭出血
病理變化
雞新城疫主要病理變化表現(xiàn)為全身敗血癥,以呼吸道和消化道最為嚴重?谇缓脱屎砀秸骋,咽部粘膜充血,偶有出血。嗉囊壁水腫或附著一層象米糠樣滲出物,嗉囊內(nèi)充滿酸臭液體及氣體。腺胃粘膜乳頭的尖端或分散在粘膜上有出血點,特別在腺胃和肌胃交界處出血更為明顯。腺胃粘膜腫脹,肌胃角質(zhì)層下有出血斑,有時形成粟粒狀不規(guī)則的潰瘍。
小腸前段出血明顯,尤其是十二指腸粘膜和漿膜出血。盲腸扁桃體腫大、出血和壞死,這種壞死呈島嶼狀隆起于粘膜表面。在慢性或非典型病例,直腸粘膜的皺褶呈條狀出血,有的在直腸粘膜上可見黃色纖維素性壞死點。
呼吸道病變見于鼻腔及喉充滿污濁的粘液和粘膜充血,偶有出血。氣管內(nèi)積有多量粘液,氣管環(huán)出血明顯,支氣管和肺沒有見到明顯肉眼變化,有時可見肺瘀血或水腫。心冠和腹部脂肪見有出血。
產(chǎn)蛋母雞的卵泡和輸卵管顯著充血,卵泡膜極易破裂以致卵黃流入腹腔引起卵黃腹膜炎,肝、脾無特殊病變,腎多表現(xiàn)充血及水腫,輸尿管內(nèi)積有大量尿酸鹽。腦膜充血或出血.而腦實質(zhì)無眼觀變化,僅于組織學(xué)檢查時,見有明顯的非化膿性腦炎病變。
病理變化與雞群免疫狀態(tài)有關(guān),有部分免疫力雞的癥狀、死亡率和病理變化與易感雞感染新城疫病毒有顯著不同。用新城疫強毒株感染易感雞時,可發(fā)生典型新城疫癥狀和病變,腺胃乳頭和粘膜出血明顯,肌胃有出血和潰瘍,腸道粘膜和漿膜有明顯出血,盲腸扁桃體出血和潰瘍,而且死亡率很高。而有部分免疫力的雞感染后,出現(xiàn)輕微臨診癥狀,主要表現(xiàn)為呼吸系統(tǒng)和神經(jīng)癥狀,腺胃出血不明顯,病變檢出率低,往往以非典型出現(xiàn)。據(jù)國內(nèi)報道,非典型新城疫的病例中,以直腸粘膜和盲腸扁桃體出血的比例增多,腸道粘膜和漿膜出血也比典型新城疫少。因此,在一個雞場發(fā)生疫情時,懷疑為非典型新城疫時,盡可能多解剖幾例病死雞,總會發(fā)現(xiàn)有腺胃乳頭和粘膜少量出血點,可作綜合診斷的補充。
本病組織學(xué)檢查時,在病雞不同器官中可見充血、水腫和出血等病變,有的還發(fā)現(xiàn)壞死變性。如用新城疫病毒以氣霧法感染雞時,在感染后4~5天,經(jīng)組織學(xué)檢查,發(fā)現(xiàn)消化道粘膜明顯充血、水腫和細胞浸潤,這種細胞以淋巴細胞為主,而且充滿粘膜層。氣囊由于結(jié)締組織增生,可見有水腫、細胞浸潤及密度增加。神經(jīng)系統(tǒng)組織學(xué)檢查見有明顯的急性非化膿性腦炎病變。腦血管呈局灶性充血,小靜脈中有血栓形成,血管周圍有淋巴細胞和膠質(zhì)細胞集聚,形成血管套。在血管和膠質(zhì)細胞反應(yīng)特別明顯的地方,可見神經(jīng)節(jié)細胞發(fā)生營養(yǎng)不良性的變化和壞死,如尼氏小體溶解,細胞體腫大或萎縮,細胞核的移位或消失,神經(jīng)細胞消失等。在感染新城疫的病雞,神經(jīng)膠質(zhì)有病灶,神經(jīng)元變性和血管周圍淋巴細胞浸潤以及內(nèi)皮細胞肥大,此病變遍布于神經(jīng)索、延髓、中腦和小腦。延髓的病變應(yīng)與雞腦脊髓炎相區(qū)別,在雞腦脊髓炎中可見延髓神經(jīng)元的中央染色質(zhì)溶解,這種現(xiàn)象在新城疫卻很少見。
最急性新城疫:病雞腺胃乳頭出血,腺胃表面有大量粘液
診斷鑒別
典型的新城疫可根據(jù)流行病學(xué)資料,癥狀和具有特征性的病理變化可作出初步診斷,但是有的雞群有部分免疫力或感染新城疫病毒的毒力不是太強,往往缺乏典型新城疫的癥狀和病理變化,因此尚須進行病原學(xué)和血清學(xué)診斷,其診斷程序有下面幾種。
(一)流行病學(xué)和臨診癥狀的診斷
本病對雞特別易感,流行特點是具有高度接觸傳染性,易感雞的發(fā)病率和病死率都很高,達90%以上。自然感染僅見雞和火雞,鴨、鵝和野禽有抵抗力,但可帶毒。非典型新城疫多發(fā)生在免疫雞群,以二免前后雞發(fā)病最多,發(fā)病率和死亡率低于典型新城疫。具有特征性癥狀,見病雞體溫升高,嗉囊滿脹內(nèi)積有多量酸臭液體,呼吸困難,并有‘咯咯’叫聲,翅和腿麻痹,病程長者有神經(jīng)癥狀,頭頸向一側(cè)或向后扭曲。產(chǎn)蛋母雞感染新城疫時,主要表現(xiàn)為產(chǎn)蛋量急劇下降,幾天內(nèi)由80%降到40%~45%,軟殼蛋明顯增多,死亡很少,僅見有拉稀。產(chǎn)蛋恢復(fù)到正常時間不一,短者2~3周,長者2個月。
(二)病理學(xué)診斷
本病病理變化主要特征為各器官粘膜充血和出血,腸道粘膜和漿膜以及腹部脂肪明顯出血,腺胃乳頭和粘膜出血,盲腸扁桃體出血和潰瘍,這一病變具有診斷意義。非典型新城疫多見不到這些典型的病理變化,只要多剖檢一些病死雞,可能見到雞新城疫固有病變,直腸段粘膜出血和盲腸扁桃體出血比例增多,因此一定要結(jié)合實驗室工作才能獲得確診。
最急性新城疫:泄殖腔充血,出血
(三)實驗室診斷
根據(jù)流行病學(xué)、癥狀和病理變化還不能確診時,必須依賴實驗診斷,如果條件許可,取病死雞的病料分別接種易感雞和免疫雞,若免疫雞不死而易感雞死亡時,便可確定為雞新城疫。若免疫雞和易感雞都死亡,細菌檢查又是陰性,可排除新城疫,可能是其他病毒性傳染病。但診斷雞新城疫最可靠的方法是進行病毒分離和鑒定。
1.病毒的分離雞出現(xiàn)癥狀后,大多數(shù)器官和分泌物含有多量的病毒,作為分離病毒的材料最好選發(fā)病初期的病雞脾、肺和腦,病料要求新鮮。發(fā)病中、后期取腦或骨髓作分離病毒的材料,如果死雞已腐敗,最好是從骨髓分離。一定要做到無菌手術(shù)取病料,將病料置于消毒的勻漿器內(nèi),研磨成乳劑,加入滅菌生理鹽水做成10倍稀釋成懸浮液,靜置或離心后取上清液,按每毫升加入青霉素和鏈霉素各500單位,置37℃溫箱作用30~60rain。以上清液0.1ml接種于9~10日齡雞胚尿囊腔內(nèi)。接種后的雞胚放在37℃溫箱內(nèi)繼續(xù)孵育,并每天檢查雞胚一次。若為強毒株,在接種后48~72h即可致死雞胚;若為弱毒株,3~6天致死雞胚。死亡的雞胚收獲尿囊液,作細菌檢查,將收集的雞胚尿囊液供作病毒鑒定。由雞新城疫病毒致死的雞胚,胚體全身充血、出血,以頭、翅和趾部尤為明顯。病毒分離是很重要的,除對發(fā)病雞場作出最后確診外,還可以對新分離的病毒進行生物學(xué)特性測定,以確定其病毒的毒力。
上述病料還可以接種到雞胚成纖維細胞培養(yǎng)上,若是新城疫病毒,在感染細胞呈融合性病變,此時紅細胞凝集反應(yīng)陽性。
病料也可以接種于體重1000g的易感雞,每雞皮下注射0.5ml。若是新城疫病毒的強毒株,在接種后3天出現(xiàn)癥狀,試驗雞精神萎頓,嗦囊脹滿積液,排出黃白色稀糞,第4~5天死亡,剖解見腺胃乳頭有出血點,腸道粘膜出血。并且還可從病死雞分泌物和實質(zhì)器管中回收到病毒。
2.病毒的鑒定前面已提到,新城疫病毒具有凝集禽類和某些哺乳動物的紅細胞的特性,所以病毒分離出來后,還須作紅細胞凝集試驗(HA),但僅憑HA還不能確定為新城疫病毒,象禽流感病毒、禽腺病毒都能凝集禽類紅細胞。于是首先檢查所分離到病毒是否有血凝特性,若出現(xiàn)HA者,必須與已知抗雞新城疫病毒的血清進行血凝抑制試驗(HI),如果所分離到病毒能被這種特異性抗體所抑制,才能最后證明該病毒是新城疫病毒。雞新城疫病毒HI方法有多種,如全量法即試管法;B-微量法;全血平板法等。HI除作為病毒鑒定外,還可利用雞新城疫病毒來鑒定感染雞群的血清中是否有抑制紅細胞凝集的抗體,如果可疑病雞的血清能抑制新城疫病毒對紅細胞的凝集,即可判定該雞患新城疫。感染雞群中出現(xiàn)HI抗體,病程在10~15天,HI抗體的效價可達1:1280。現(xiàn)在可利用HI測定,以比較雞群發(fā)病前后HI抗體效價的變化,就可以認為該雞群是否有新城疫感染。如果一個雞群在發(fā)病前HI抗體平均值為5~61og2,半個月后采血測定HI效價平均值為9~l0log2,就可證明該群雞已感染了新城疫強毒。由此可見,HI的測定在流行病學(xué)調(diào)查和判定是否新城疫有實用價值。但還應(yīng)該注意的是,HI檢測可確定疫苗免疫的效果,或可提供免疫計劃的依據(jù)。
3.血清中和試驗既可用已知抗雞新城疫病毒的血清來鑒定可疑病毒,又可用已知的新城疫病毒來測定雞血清中是否含有特異性抗體,以確定雞群是否感染過雞新城疫。中和試驗可在雞胚或細胞培養(yǎng)以及易感雞中進行。其方法是,在雞新城疫免疫血清(或待檢血清)中,加入一定量的待檢病毒(或已知病毒),兩者混合均勻后,注射9~10日齡雞胚(非免疫雞所生的蛋),或雞胚成纖維細胞,或者有易感性的雞,并設(shè)立不加血清的病毒對照。結(jié)果注射血清和病毒混合材料的雞胚或雞不死亡;雞胚成纖維細胞無病變,而對照組死亡或細胞培養(yǎng)出現(xiàn)病變,則可肯定待檢病毒是新城疫病毒。
4.熒光抗體技術(shù)本方法是將一類熒光性染料結(jié)合于抗體免疫球蛋白上,成為熒光性染料標(biāo)記抗體。當(dāng)此標(biāo)記抗體與相應(yīng)的抗原相遇,可發(fā)生免疫特異性結(jié)合,標(biāo)記在抗體上的熒光染料也被帶到抗原一抗體復(fù)合體上。此種復(fù)合體在紫外線照射下,被激發(fā)產(chǎn)生光亮的熒光(黃綠色、紅色或藍色),可以在熒光顯微鏡下看到。這種免疫熒光法對雞新城疫病毒檢查具有高度特異性和敏感性,而且其有快速的優(yōu)點。作為熒光技術(shù)檢查的材料以脾為首選,也可采肺和肝,按常規(guī)方法用冷凍切片制成標(biāo)本,然后將新城疫熒光抗體稀釋成一定工作濃度,滴加入經(jīng)固定的切片標(biāo)本上,在37℃染色30min,取出立即用PBS(pH8.0)反復(fù)洗3次,然后滴加0.1%伊文思藍,作用2~3s后,再用PBS沖洗;然后用9:1緩沖甘油封固,鏡檢。在熒光顯微鏡見熒光者為雞新城疫病毒所在部位。
5.酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)此方法能夠檢驗雞新城疫病毒在細胞培養(yǎng)中生長情況,如有新城疫病毒生長,在細胞核邊緣可見到明顯棕褐色酶染斑點,未接種新城疫病毒的細胞或新城疫病毒不能在細胞培養(yǎng)中生長,則完全看不到酶染斑點。它能直接檢出病雞或帶毒雞的泄殖腔和El腔中新城疫病毒。此方法比HA和HI、免疫熒光技術(shù)等更加敏感,特異性更強,是快速而準(zhǔn)確的診斷方法。目前辣根過氧化物酶標(biāo)記羊抗兔結(jié)合物已有商品出售,應(yīng)用比較方便,不要熒光顯微鏡。為了提高ELISA的敏感性和特異性,又發(fā)展雙夾心ELISA,斑點-ELISA法用于新城疫診斷。
6.應(yīng)用單克隆技術(shù)診斷新城疫應(yīng)用淋巴細胞雜交瘤技術(shù)成功地建立了能分泌對雞新城疫病毒特異的單克隆抗體的雜交瘤細胞株,據(jù)江蘇農(nóng)學(xué)院報道已建立有NDV—HY—23、NDV—HY—33、FNl、FN7等細胞株,用單克隆抗體對人工感染和自然病例進行免疫熒光檢查,選用腦、肺、脾和盲腸扁桃體檢出率較高。它不僅可用于新城疫的診斷,而且司以進行新城疫部分毒株的毒力定型。
最急性新城疫:產(chǎn)蛋雞患最急性雞新城疫出現(xiàn)卵泡變形、血腫和破裂
(四)鑒別診斷
雞新城疫在發(fā)病初期癥狀不典型,主要表現(xiàn)為呼吸道癥狀,這樣很可能與呼吸道傳染病如傳染性支氣管炎、傳染性喉氣管炎相混淆。有的呈現(xiàn)敗血癥很容易與禽霍亂相混淆。就新城疫癥狀和病理變化與真性雞瘟很類似應(yīng)注意區(qū)別。
1.與禽霍亂的區(qū)別禽霍亂可侵害各種家禽,鴨最易感染,呈急性敗血癥經(jīng)過時,病程短,病死率高。慢性病例有關(guān)節(jié)腫大,但無神經(jīng)癥狀,剖檢時見全身出血,肝有小點壞死,肝組織作觸片見有兩極著色的巴氏桿菌。雞新城疫在自然條件下不引起鴨發(fā)病,病程比急性禽霍亂長,但常常出現(xiàn)神經(jīng)癥狀,剖檢時肝沒有灰白色小點壞死,腺胃粘膜出血,肝組織觸片鏡檢未見細菌。
2.與傳染性喉氣管炎的區(qū)別該病傳播很快,發(fā)病率較高,死亡率低。它主要癥狀是呼吸困難,咳嗽,喉頭水腫、充血和出血,有時在喉頭附著一層黃白色假膜,消化道沒有變化,無神經(jīng)癥狀,上述這些特征可以與新城疫相區(qū)別。
3.與真性雞瘟的區(qū)別真性雞瘟與新城疫區(qū)別較為困難。根據(jù)人工感染觀察,此病的潛伏期和病程都比新城疫短,一般為18~24h,病程由10幾小時至1天,沒有顯著的呼吸困難,嗉囊內(nèi)沒有大量積液,無神經(jīng)癥狀。頭部常有水腫,眼瞼、肉髯腫脹。剖檢時常見皮下水腫和黃色膠樣浸潤。粘膜、漿膜和脂肪組織出血較新城疫更為明顯和廣泛,腸粘膜常不形成潰瘍。但確切區(qū)別還須通過病毒分離和血清學(xué)試驗等實驗室檢查。
近幾年我國有報道,當(dāng)一個雞場發(fā)生新城疫流行時,還發(fā)現(xiàn)兩種傳染病并發(fā)或繼發(fā),如傳染性法氏囊病繼發(fā)新城疫,新城疫和雞支原體病混合感染等,這樣不但病死率提高了,而且給診斷帶來一定的難度,務(wù)必加強實驗室診斷工作。
最急性新城疫:腸道出血點
最急性新城疫:腸道密集的小出血點
防治措施
雞新城疫防制,需要采取綜合防制措施,即杜絕傳染源,開展經(jīng)常性消毒,加強檢疫,定期對健康雞免疫接種,建立免疫監(jiān)測等。
(一)平時的衛(wèi)生防疫措施
對養(yǎng)雞業(yè)來說,預(yù)防本病的發(fā)生,重點做好平時的防疫工作,對集約化養(yǎng)雞更是如此,其措施有:
1.杜絕病原侵入雞群控制和消滅新城疫流行,最根本措施是杜絕新城疫病毒侵入易感雞群,這就需要有嚴格的衛(wèi)生防疫制度,防止帶毒雞(包括鳥類)和污染物品進入雞群,進出雞場的人員和車輛必須經(jīng)過消毒,飼料來源要安全,嚴禁從疫區(qū)引進種蛋和雛雞。新購進的雞需經(jīng)檢疫,并嚴格隔離飼養(yǎng)2周以上,再經(jīng)新城疫疫苗免疫接種后,證明健康者,方可與原有雞合群飼養(yǎng),隨時觀察雞群的健康情況,發(fā)現(xiàn)有可疑病雞,立即隔離,并采取緊急措施。為了杜絕傳染源傳入,有條件的雞場盡可能做到自繁自養(yǎng),種雞場、孵化廳、育雛、育成和生產(chǎn)雞群須分區(qū)域飼養(yǎng),加強種雞群疫病的監(jiān)測。
2.嚴格執(zhí)行消毒措施消毒是防止新城疫傳播的一項重要措施,其目的是切斷病原的傳播途徑,特別是大型養(yǎng)雞場,應(yīng)該有完善的消毒設(shè)施,雞場進出口應(yīng)設(shè)消毒池。飼養(yǎng)員和工作人員進入飼養(yǎng)區(qū)要經(jīng)消毒后,更換工作服和鞋靴方可進入,進入場區(qū)的車輛和用具也要經(jīng)消毒,應(yīng)該形成一個制度,做到臨時性和定期消毒相結(jié)合。
肉用雞場可以采用全進全出的飼養(yǎng)法,在進雞前對雞舍進行1~2次嚴格消毒,待全群雞出售完畢再進行1~2次雞舍清潔和徹底消毒,這樣可避免雞群疾病的傳播機會,但平時對雞舍周圍環(huán)境也應(yīng)定期進行消毒。
3.合理做好雞群預(yù)防接種免疫接種是增強雞群的特異免疫力,使雞群保持堅強的免疫狀態(tài),抵抗新城疫病毒的感染,因此給雞群合理進行疫苗接種,是防制雞新城疫關(guān)鍵措施之一。做好免疫接種應(yīng)根據(jù)當(dāng)?shù)匾卟×餍星闆r,雞場衛(wèi)生防疫制度嚴密與否,飼養(yǎng)類型,雞的種類(肉雞或蛋雞),雛雞母源抗體效價的高低以及前次免疫的HI抗體情況等,來確定采取哪類疫苗,什么日齡免疫和免疫次數(shù),免疫的方法。近年來我國對新城疫的免疫程序進行大量研究,積累了許多經(jīng)驗,使新城疫的免疫程序更加科學(xué)化和合理化,這對控制和消滅新城疫起著重要作用。
對農(nóng)村分散飼養(yǎng)的雞如何做好免疫接種,是值得研究的問題,因為雛雞來源廣泛而復(fù)雜,造成母源抗體水平差異較大,由于分散飼養(yǎng)給疫苗免疫接種帶來一定困難。以前采取春秋兩季由防疫員負責(zé)進行,這樣必定造成免疫接種密度不高,造成新城疫時有發(fā)生。有的地區(qū)采用,在孵坊里對出殼雛雞進行免疫接種,也取得良好免疫效果,到2~3月齡時再用雞新城疫I系疫苗加強免疫一次,這樣可以提高免疫接種密度,而且對農(nóng)村散養(yǎng)雞控制新城疫有實用價值。在農(nóng)村開展新城疫免疫接種時,應(yīng)注意的問題是,做好疫苗的冷藏和保管,千萬禁止使用過期的疫苗,在較短時間內(nèi)對一個村莊的雞全部接種完畢,免疫接種中特別注意針頭的更換和消毒,防止通過針頭傳播本病。在農(nóng)村開展免疫時,經(jīng)常遇到幾個村莊的雞只用一只針頭接種完畢,結(jié)果免疫后2~3天流行新城疫。
4.建立免疫監(jiān)測制度為了保證各次免疫接種獲得良好免疫效果,避免免疫接種工作的盲目性,必須通過免疫監(jiān)測的方法,檢查免疫雞群中HI抗體效價。根據(jù)HI抗體水平確定首免和再次免疫時間,是最科學(xué)的方法。免疫監(jiān)測也是制訂免疫程序的依據(jù)。
HI抗體測定,會受到許多因素的影響,同一份抗血清在不同實驗室測定其結(jié)果不同,為了獲得準(zhǔn)確結(jié)果,一方面對操作人員進行訓(xùn)練,另一方面應(yīng)設(shè)立標(biāo)準(zhǔn)抗血清做對照,從而使HI抗體測定標(biāo)準(zhǔn)化。一般在首免后10~14天,抽檢免疫雞HI抗體水平。抽樣比例大雞群按0.2%,500羽雞群按3%~5%。以后每間隔3~4周抽檢一次,使用I系疫苗免疫的雞群,每隔2個月抽檢一次,通過免疫監(jiān)測手段,可以判定疫苗的免疫效果,當(dāng)發(fā)現(xiàn)HI抗體沒有上升,應(yīng)及時檢驗疫苗的品質(zhì),或檢查是否有其他的疾病影響,并及時采取補救措施,改換疫苗或改變免疫方法以及同時注意其他病免疫接種。免疫監(jiān)測還能判定該雞場是否受到新城疫強毒的感染。因為各類疫苗免疫雞后,正常情況HI抗體效價保持一定的水平,當(dāng)發(fā)現(xiàn)該雞群HI抗體突然上升很高,比原來的抗體效價增加了3個滴度以上,說明該雞群可能感染了新城疫強毒,那么必須注意其他雞群防疫措施。
在免疫監(jiān)測中亦發(fā)現(xiàn),有些免疫雞的HI抗體效價較低,但是用新城疫強毒攻擊后獲得保護,這說明新城疫除體液免疫外,還有細胞免疫作用。國內(nèi)有報道免疫雞T淋巴細胞和B淋巴細胞數(shù)量多于對照雞。
最急性新城疫:患雞腺胃乳頭出血,肌胃粘膜(角質(zhì)膜剝?nèi)?皺襞的嵴部出血。腺胃粘膜乳頭及其周圍有小點出血;肌胃角質(zhì)膜下的粘膜面有點狀或斑狀出血
(二)發(fā)生雞新城疫時的措施
雞場里一旦發(fā)生本病,應(yīng)采取緊急措施,防止疫情的擴大。首先采取隔離飼養(yǎng),報告獸醫(yī)檢查,經(jīng)確診為新城疫后,及時報告當(dāng)?shù)卣,劃定疫區(qū)進行封鎖。其次,及時應(yīng)用新城疫疫苗進行緊急接種,接種的順序是,假定健康群→可疑群→病雞群。實踐證明,即使是病雞群及時用疫苗進行緊急接種后,也能減少一部分死亡。必要時可以用高免血清或卵黃抗體進行注射也能控制本病發(fā)展,待病情穩(wěn)定后再用疫苗接種。第三,采取緊急消毒,對雞舍、運動場以及用具等,用5%~10%漂白粉,2%燒堿溶液,或抗毒威等進行徹底消毒,待消毒后30min再清掃。垃圾、糞便和剩余飼料經(jīng)無害處理,然后再進行第二次消毒。第四,疫區(qū)內(nèi)病死雞尸體和宰殺的內(nèi)臟及排泄物應(yīng)深埋或焚燒,或者尸體和內(nèi)臟經(jīng)高溫處理后作肥料。第五,農(nóng)村發(fā)生雞新城疫時,要停止家禽市場的交易,包括家禽的產(chǎn)品。雞要關(guān)閉飼養(yǎng),禁止自由散放。第六,疫區(qū)內(nèi)當(dāng)最后一個病雞死亡或撲殺后2周,對被污染的區(qū)域通過嚴格的終末消毒后,方可解除封鎖。
最急性新城疫:患最急性雞新城疫的雞泄殖腔肛道粘膜點狀或片狀出血
最急性新城疫:盲腸小點出血,盲腸扁桃體出血,回腸粘膜出血壞死
最急性新城疫:腺胃,肌胃出血,腸棗核形出血,壞死
最急性新城疫:腺胃乳頭出血,腸棗核形出血,壞死