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免疫學(xué)和免疫學(xué)檢驗(yàn):第六節(jié) 酶免疫測定的應(yīng)用

酶免疫測定具有高度的敏感性和特異性,幾乎所有的可溶性抗原抗體系統(tǒng)均可用以檢測。它的最小可測值達(dá)ng甚至pg水平。與放射免疫分析相比,酶免疫測定的優(yōu)點(diǎn)是標(biāo)記試劑比較穩(wěn)定,且無放射性危害。因此,酶免疫測定的應(yīng)用日新月異,酶免疫測定的新方法、新技術(shù)不斷發(fā)展。但…

酶免疫測定具有高度的敏感性和特異性,幾乎所有的可溶性抗原抗體系統(tǒng)均可用以檢測。它的最小可測值達(dá)ng甚至pg水平。與放射免疫分析相比,酶免疫測定的優(yōu)點(diǎn)是標(biāo)記試劑比較穩(wěn)定,且無放射性危害。因此,酶免疫測定的應(yīng)用日新月異,酶免疫測定的新方法、新技術(shù)不斷發(fā)展。但酶免疫測定在醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)中的普及應(yīng)歸功于商品試劑盒和自動(dòng)或半自動(dòng)檢測儀器的問世。酶免疫測定步驟復(fù)雜,試劑制備困難。只有用符合要求的試劑和標(biāo)準(zhǔn)化的操作,才能獲得滿意的結(jié)果。

商品ELISA試劑盒中應(yīng)包含包被好的固相載體、酶結(jié)合物底物和洗滌液等。先進(jìn)的試劑盒不僅提供全部試劑成分,而bhskgw.cn/yaoshi/且所有試劑均已配制成應(yīng)用液,并在各種試劑中加色素,使之呈現(xiàn)不同的顏色。ELISA操作步驟多,所需試劑也多,這種有色試劑既方便操作又有利于減少操作錯(cuò)誤。ELISA所有儀器除定量測定中必需的出色儀(專用的稱為ELISA測讀儀)外,洗滌板也極有用。洗滌機(jī)的使用不僅省時(shí)省工,而且也利于操作標(biāo)準(zhǔn)化,對(duì)中小型實(shí)驗(yàn)室是實(shí)用且易于接受的。但應(yīng)注意在采用洗板機(jī)前,應(yīng)先對(duì)洗板機(jī)的性能加以檢定,確認(rèn)各孔的洗滌效果是否徹底,且重復(fù)性好。

半自動(dòng)和自動(dòng)化ELISA分析儀亦趨成熟,并在大中型臨床檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室中取得應(yīng)用。自動(dòng)化ELISA分析儀有開放系統(tǒng)(opensystem)和封閉系統(tǒng)(cbhskgw.cn/wsj/losesystem)兩類。前者適用于所有的96孔板的ELISA測定;后者只與特定試劑配套使用。

均相酶免疫測定主要用于藥物和小分子物質(zhì)的檢測。ELISA則應(yīng)用更為廣泛,可用以檢測的項(xiàng)目包括以下幾個(gè)方面:

1.病原體及其抗體廣泛應(yīng)用于傳染病的診斷。病毒肝炎病毒、風(fēng)疹病毒、皰疹病毒、輪狀病毒等;細(xì)菌如鏈球菌、結(jié)核分枝桿菌、幽門螺桿菌和布氏桿菌等;寄生蟲如弓形體、阿米巴、瘧原蟲等。

2.蛋白質(zhì)各種免疫球蛋白、補(bǔ)體組分、腫瘤標(biāo)志物(例如甲胎蛋白、癌胚抗原、前列腺特異性抗原等)、各種血漿蛋白質(zhì)、同工酶(如肌酸激酸MB)、激素(如HGG、FSH、TSH)。

3.非肽類激素如T3、T4、雌激素、皮質(zhì)醇等。

4.藥物和毒品如地高辛、苯巴比妥、慶大霉素嗎啡等。

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