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實(shí)用免疫細(xì)胞與核酸:第五節(jié) “DNA指紋”與法醫(yī)鑒定

1979年Teffreys根據(jù)β珠蛋白基因座位近旁出現(xiàn)的RFLP頻率同測定的核苷酸總數(shù),推算出人體基因組的遺傳異質(zhì)性約為每100個(gè)核苷酸中有一個(gè)差異。后在人體DNA隨機(jī)片段的文庫中分離出高度變異的超變區(qū)。從1982年起,分別在人的胰島素基因,α類珠蛋白基因,肌動蛋白基因和C-Ha…

1979年Teffreys根據(jù)β珠蛋白基因座位近旁出現(xiàn)的RFLP頻率同測定的核苷酸總數(shù),推算出人體基因組的遺傳異質(zhì)性約為每100個(gè)核苷酸中有一個(gè)差異。后在人體DNA隨機(jī)片段的文庫中分離出高度變異的超變區(qū)。從1982年起,分別在人的胰島素基因,α類珠蛋白基因,肌動蛋白基因和C-Ha-ras-1基因中陸續(xù)發(fā)現(xiàn)了這些超變區(qū)。這是一些很短的順序或稱“小衛(wèi)星順序”串聯(lián)重復(fù)所組成。不同等位基因的重復(fù)數(shù)目也不相同。只要用重復(fù)順序內(nèi)不含切點(diǎn)的限制性內(nèi)切酶切割,就可產(chǎn)生長度不等的限制性片段。

短的重復(fù)順序分別長16、17、32、33、37、41、62、64和376bp,但這些重復(fù)順序幾乎都共有一種“核心順序”。“核心順序”長10~15bp。如果人工合成很短的重復(fù)順序作為DNA分子雜交的探針,同經(jīng)限制性內(nèi)切酶酶切的人體DNA作Southern印跡雜交,可以得長度不等的雜交帶。雜交帶的數(shù)目的分子量大小幾乎不可能有兩個(gè)人會完全相同的,因此把這種雜交帶的圖型稱為“DNA指紋”(DNafinger-printing),意思是DNA的雜交帶型同指紋一樣,也是每個(gè)人所特有的。

表23-8比較了用兩種探針進(jìn)行印跡雜交后,出現(xiàn)雜交帶的長度和數(shù)目bhskgw.cn/wsj/。根據(jù)計(jì)算,如果只用一種探針,則A個(gè)體DNA所呈現(xiàn)的雜交帶型,同樣出現(xiàn)在B個(gè)體DNA中的概率為3×10-11。如果同時(shí)用兩種探針進(jìn)行比較,則兩個(gè)個(gè)體完全相同的概率小于5×10-19。目前全世界人口為50億,即5×109。因此,兩個(gè)個(gè)體的DNA雜交帶型完全相同的可能性極小。

表23-8 隨機(jī)匹配的個(gè)體間“DNA指紋”相同的概率

探針DNA片段大。╧)每一個(gè)體中片段出現(xiàn)的數(shù)目±SDA個(gè)體中的片段也出現(xiàn)于B個(gè)體的概率
A10~202.8±1.00.11
 6~105.1±1.30.18
 4~65.9±1.60.28
B10~202.9±1.00.08
 6~105.1±1.10.20
 4~66.7±1.20.27

1985年Teffreys等將“DNA指紋”應(yīng)用于法醫(yī)鑒定。他們從血斑、精斑或新鮮毛發(fā)根部抽提微量DNA后作印跡雜交。從4年前的精斑、血斑樣品中仍能提取出來未降解的DNA,特別是設(shè)計(jì)出一些方法可從婦女陰道分泌物中,把混在里面的精子分離出來。從中提取DNA后可明確無誤地鑒定誰是精子的供體。為法醫(yī)鑒定提供一種新的有效方法。

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