1 試劑
1.1 用（人)HBsAg（亞型ad,ay)包被的聚乙烯珠子。
1.2 125I標(biāo)記的（人)HBsAg（亞型ad,ay)試液。
1.30.01mol/L Tris緩沖液，內(nèi)含4%牛血清白蛋白，pH7.4。
1.4 抗-HBs參比標(biāo)準(zhǔn)品，含抗-HBs10～160mIU /ml。采用四點(diǎn)法 或www.med126.com五點(diǎn)法。
2 測定
先將檢品按估計(jì)效價(jià)稀釋成不同倍數(shù)，使其cpm計(jì)數(shù)落在參比標(biāo)準(zhǔn)品直線范圍內(nèi)。一般10%肌注丙種球蛋白可進(jìn)行10、20、40倍稀釋。乙型肝炎免疫球蛋白可進(jìn)行500、1000、2000倍稀釋。正式試驗(yàn)時(shí)根據(jù)預(yù)試結(jié)果調(diào)整稀釋倍數(shù)。預(yù)試驗(yàn)用3個(gè)稀釋倍數(shù)，正式試驗(yàn)用2個(gè)稀釋倍數(shù)。
2.1 各取0.2ml參比標(biāo)準(zhǔn)品及不同稀釋倍數(shù)的檢品，加入反應(yīng)盤的不同孔中。預(yù)試驗(yàn)時(shí)每個(gè)稀釋倍數(shù)檢品加1孔，正式試驗(yàn)每個(gè)稀釋倍數(shù)檢品加3孔。于每孔中小心加入一個(gè)HBsAg包被珠子，蓋上密封膠紙，振蕩或輕拍反應(yīng)盤，排出氣泡，并使珠子全部浸入液體中，置室溫（15～www.med126.com30℃)結(jié)合18小時(shí)（16～20小時(shí))。
2.2 去除膠紙，吸出孔內(nèi)液體，每珠用4～5ml蒸餾水洗3次，最后一次盡量將水吸干。
2.3 于每孔中加0.2ml125I標(biāo)記HBsAg試液，輕拍反應(yīng)盤，排出氣泡，并使珠子全部浸入液體中，蓋上新的密封膠紙，置室溫結(jié)合4小時(shí)（或45℃水浴2小時(shí))，去除膠紙，按2.2項(xiàng)沖洗。
2.4 用紙?jiān)嚬芗軐⒅樽訌姆磻?yīng)盤轉(zhuǎn)移至塑料管中，其編號(hào)應(yīng)與反應(yīng)盤孔號(hào)一致。將反應(yīng)管置適宜的井型γ計(jì)數(shù)器中計(jì)數(shù)cpm，洗后24小時(shí)內(nèi)均可使用。
3 計(jì)算
3.1 先救求出參比標(biāo)準(zhǔn)品和各稀釋倍數(shù)檢品的平均cpm計(jì)數(shù)，以參比標(biāo)準(zhǔn)品抗-HBsmIu /ml為橫座標(biāo)，以cpm計(jì)數(shù)為縱座標(biāo)在座標(biāo)紙上作圖，連接各點(diǎn)成一直線。
3.2 從標(biāo)準(zhǔn)直線上查出各稀釋倍數(shù)檢品的cpm計(jì)數(shù)點(diǎn)，并從此點(diǎn)向下作一垂直線，在橫座標(biāo)上查出抗-HBs mIU，再乘以檢品稀釋倍數(shù)，除以1000，求出2點(diǎn)或3點(diǎn)的平均值即為該檢品的抗-HBs IU/ml。
4 注意事項(xiàng)
4.1 預(yù)試驗(yàn)時(shí)應(yīng)按試劑盒要求做陽性和陰性對照。
4.2 冰箱保存的試劑，用前應(yīng)先于室溫內(nèi)放置1小時(shí)。
4.3使用不能自動(dòng)減本底的γ計(jì)數(shù)器時(shí)，應(yīng)減本底后再計(jì)算。
4.4 所有測定操作應(yīng)遵守同位素實(shí)驗(yàn)室安全防護(hù)制度。
