中國(guó)幽門(mén)螺桿菌研究:我國(guó)幽門(mén)螺桿菌感染研究的現(xiàn)狀和未來(lái)

自1983年Warren和Marshall發(fā)現(xiàn)了幽門(mén)彎曲菌（Campylobacter pylori,Cp，1989年下半年開(kāi)始國(guó)際上已改名為幽門(mén)螺桿菌， Helicobacter pylori,Hp)與慢性活動(dòng)性胃炎和消化性潰瘍的關(guān)系以來(lái)，迅速引起了世界范圍的慢性胃�。�慢性胃炎和消化性潰瘍等)生物病原學(xué)的研究熱潮。我國(guó)亦于1985年11月于昆明召開(kāi)的全國(guó)第三次消化性疾病學(xué)術(shù)研究會(huì)以后逐步形成了全國(guó)范圍的研究高潮。在此期間有一些地區(qū)或單位還曾舉辦過(guò)一些Hp的專(zhuān)題學(xué)習(xí)班。1990年5月20～22日由中華消化雜志編輯部、上海市消化疾病研究所、廣州市第一軍醫(yī)大學(xué)南方醫(yī)院聯(lián)合組織在珠海召開(kāi)了全國(guó)第一次Hp專(zhuān)題學(xué)術(shù)討論會(huì)。此后不久，9月13～15日又由北京醫(yī)科大學(xué)等單位在黃山召開(kāi)了另一次全國(guó)Hp專(zhuān)題學(xué)術(shù)討論會(huì)，在這兩次會(huì)議上可以說(shuō)基本上反映了我國(guó)在Hp研究上所取得的成績(jī)和達(dá)到www.med126.com的水平。因而，現(xiàn)在有必要回顧我們以前的工作，以便確定我們進(jìn)一步的戰(zhàn)略目標(biāo)。下面從幾個(gè)方面談?wù)勎覀円恍┛捶�，以供參考�?/p>

1 病原病理學(xué)

經(jīng)過(guò)國(guó)內(nèi)外大量的從慢性胃病患者胃粘膜表面檢出Hp的工作，抗菌藥物對(duì)慢性胃病的療效觀察及部分志愿者的自身感染實(shí)驗(yàn)及動(dòng)物模型的建立等，Hp作為慢性胃病的一種重要病已經(jīng)被國(guó)內(nèi)外大多數(shù)學(xué)者所接受。人們對(duì)Hp的認(rèn)識(shí)，亦從一無(wú)所知，進(jìn)入到掌握了它的基本生物學(xué)性狀（包括它的細(xì)胞水平、亞細(xì)胞水平和分子水平)的階段。正由于對(duì)它們生物學(xué)性狀有了比較深入地了解，因此1989年下半年Goodwin提出Cp不同于彎曲菌屬的細(xì)菌，應(yīng)另歸一新屬稱(chēng)Helicobacter，并得到了國(guó)際上多數(shù)學(xué)者的支持，因而得現(xiàn)名Hp。由此對(duì)它在胃粘膜標(biāo)本中的檢出已不成為太大的問(wèn)題，對(duì)它在胃粘膜表面所引起的病理變化的基本規(guī)律亦已有所了解。雖然所用的具體方法不同，所得結(jié)果還有細(xì)微的差異，但這無(wú)妨于判定Hp與慢性胃炎和消化性潰瘍的病因密切相關(guān)的大局�，F(xiàn)在所需要解決的問(wèn)題是：Hp究竟是怎樣致病的？為什么它在人胃粘膜上的感染是那么普遍？為什么在胃粘膜上皮細(xì)胞表面幾乎只有這一種細(xì)菌能實(shí)現(xiàn)真正的寄生？為什么各種慢性胃病在適當(dāng)?shù)目咕�療法后，�?huì)有一個(gè)時(shí)期的好轉(zhuǎn)，但又很容易復(fù)發(fā)？Hp的L型菌會(huì)不會(huì)在這中間起作用？等等。所有這一切問(wèn)題靠現(xiàn)有的常規(guī)研究方法是難以解答的。這就需要我們聯(lián)合多學(xué)科，從分子生物學(xué)和微生態(tài)學(xué)的角度來(lái)解決這些問(wèn)題。例如我們?nèi)孕枰�花大力氣�?lái)提高分離培養(yǎng)的陽(yáng)性率，因?yàn)榉蛛x培養(yǎng)總還是不失為最可靠的方法、最有說(shuō)服力的方法，許多更深入的研究亦需要以分離培養(yǎng)為基礎(chǔ)。目前國(guó)內(nèi)分離培養(yǎng)的陽(yáng)性檢出率普遍還不高，只有50%～70%，或稍高一點(diǎn)，這可能與培養(yǎng)基的成分和分離培養(yǎng)條件有關(guān)。當(dāng)前迫切需要研制出一種特別適用于Hp生長(zhǎng)的培養(yǎng)基。關(guān)于菌種保存問(wèn)題，雖然冷凍干燥方法對(duì)Hp不太適宜，但深低溫（-70°C以下)保存1年以上是沒(méi)有問(wèn)題的。這對(duì)開(kāi)展深入一步的研究是非常必要的條件。除此以外，Hp究竟能產(chǎn)生哪些致病物質(zhì)？Hp有哪些特異性的抗原？人群中的Hp有沒(méi)有生物分型？它與各地區(qū)的Hp流行規(guī)律和致病性有沒(méi)有關(guān)系？Hp的基因圖譜如何？特別是Hp的一些有重要的特征的基因片段是怎樣的？它的核苷酸序列如何？它是怎樣來(lái)調(diào)控Hp的這些重要特征的？等等，這些問(wèn)題的解決均將有利于Hp感染的致病機(jī)制的研究和診斷、治療、預(yù)防方法上出現(xiàn)突破。在這些方面國(guó)外已有一些學(xué)者在探索，并取得了一些進(jìn)展，在國(guó)內(nèi)尚有待開(kāi)拓。

2 診斷學(xué)

診斷學(xué)是建立在病原病理學(xué)的發(fā)展基礎(chǔ)上，1983年Warren和Marshall用活檢標(biāo)本的印片染色檢查和病理切片檢查方法，特別是微需氧條件下的分離培養(yǎng)技術(shù)發(fā)現(xiàn)了Hp以來(lái)，世界各地已把這三種方法作為檢測(cè)胃粘膜表面Hp的常規(guī)手段。各種染色方法的選用只是更便于識(shí)別而已。1984年Langenberg確認(rèn)了某些人胃中存在的高強(qiáng)度的尿素酶是由Hp產(chǎn)生的以后引起了一個(gè)新的突破，由于Hp的尿素酶的產(chǎn)生強(qiáng)度遠(yuǎn)高于其他消化道中常見(jiàn)的尿素酶產(chǎn)生菌，再加上Hp往往是感染者空腹胃中的優(yōu)勢(shì)菌，因此一種利用檢測(cè)活檢標(biāo)本中尿素酶以判斷有無(wú)Hp存在的尿素酶快速診斷試劑盒應(yīng)運(yùn)而生。自從國(guó)外有了試劑盒供應(yīng)后，國(guó)內(nèi)各地亦爭(zhēng)相而上，這一方法雖然簡(jiǎn)單方便，但是假若沒(méi)有嚴(yán)格的制造工藝和使用方法，是很容易出現(xiàn)假陽(yáng)性和假陰性反應(yīng)的。因?yàn)樗�是靠一種非特異的酶反應(yīng)來(lái)判斷Hp的存在與否，再加上它的判斷方法靠目測(cè)，誤差比較大，因此它的實(shí)際價(jià)值有限。所有上面這些方法的最大缺點(diǎn)，就是要作胃鏡取活檢標(biāo)本，不適宜人群Hp感染率的調(diào)查，另一方面它亦不易克服Hp感染局灶性分布所造成的偏差。因而，應(yīng)用免疫學(xué)方法來(lái)取代是可行的。國(guó)外從1985年以后陸陸續(xù)續(xù)地出現(xiàn)了一些用補(bǔ)體結(jié)合、間接血凝、ELISA、免疫印跡等方法來(lái)檢測(cè)血清中各種免疫球蛋白的報(bào)道，后來(lái)用得較多的還是應(yīng)用ELISA方法檢測(cè)抗Hp-IgG，最近一二年國(guó)內(nèi)亦已有一些單位開(kāi)展了這一方面工作，且已有試劑盒生產(chǎn)供應(yīng)。測(cè)抗Hp-IgG雖然亦能反映一個(gè)人是否感染了Hp，但用它來(lái)監(jiān)測(cè)藥物療效有困難，因?yàn)榭贵w一旦產(chǎn)生后會(huì)持續(xù)相當(dāng)長(zhǎng)一段時(shí)間，不能靈敏對(duì)反映患者經(jīng)治療后胃中的實(shí)際感染狀態(tài)。為了利用免疫學(xué)的特異性診斷功能，國(guó)外已建立了一些抗Hp的單克隆抗體細(xì)胞株。國(guó)內(nèi)亦有單位建立了一些抗Hp的單克隆抗體細(xì)胞株，并已成功地應(yīng)用于對(duì)直接涂片中的Hp作特異性的鑒定，至于它的進(jìn)一步應(yīng)用正在深入研究中，由于血清抗體在Hp清除后尚可保持幾個(gè)月，因此1987年后國(guó)外一些學(xué)者根據(jù)Hp的尿素酶能使胃中尿素分解成CO₂和NH₃而設(shè)計(jì)了口服¹³C和¹⁴C標(biāo)記的尿素，然后測(cè)呼氣中的¹³C和¹⁴C標(biāo)記的CO₂的一種無(wú)創(chuàng)傷性試驗(yàn)。這類(lèi)試驗(yàn)的優(yōu)點(diǎn)不僅在于它是無(wú)創(chuàng)傷性的，還在于它能反映胃的整體感染狀態(tài)，可以克服活檢標(biāo)本的局限性�？墒沁@些檢測(cè)方法需要貴重的質(zhì)譜儀等儀器設(shè)備和費(fèi)用較貴的試劑，這樣也就限制了它的實(shí)際使用范圍。¹³C是穩(wěn)定性同位素，它需要用質(zhì)譜儀測(cè)量技術(shù)條件要求較高，而且¹³C-尿素價(jià)格較昻貴。¹⁴C是放射性同位素，它的測(cè)量技術(shù)雖然在一些大醫(yī)院是辦得到的，¹⁴C-尿素的價(jià)格也比較低一些，但是終究是有放射性的，在實(shí)際使用上有一定禁忌。呼氣試驗(yàn)類(lèi)似的原理設(shè)計(jì)了一種國(guó)際上還沒(méi)有報(bào)道過(guò)的口服穩(wěn)定性同位素¹⁵N標(biāo)記的尿素，然后測(cè)尿中排出的¹⁵NH₃來(lái)判斷胃內(nèi)Hp感染情況。所有上述的診斷方法，都各有各的優(yōu)點(diǎn)，也各有各的或大或小的局限性，因此迄今用于Hp感染的十全十美的診斷方法還沒(méi)有。相對(duì)來(lái)講尿¹⁵NH₃排出試驗(yàn)有較多的優(yōu)越性，只是目前廣泛使用尚受到條件的限制。

3治療學(xué)

自從Hp的發(fā)現(xiàn)，慢性胃病的生物學(xué)病原受到重視以來(lái)，臨床上對(duì)慢性胃炎、消化性潰瘍的治療方案亦發(fā)生了重大的轉(zhuǎn)向，過(guò)去常用的H₂受體拮抗劑如甲氰咪胍、雷尼替丁以及硫糖鋁等，雖然緩解一些癥狀，但對(duì)Hp的轉(zhuǎn)陰無(wú)效，治療復(fù)發(fā)率高。然后改用某些抗菌藥物，例如呋喃唑酮、羥氨芐青霉素以及三鉀二枸椽酸時(shí)，Hp可有一定程度的轉(zhuǎn)陰，除癥狀緩解、病理示炎癥消退外，潰瘍復(fù)發(fā)率亦明顯降低，但是總的看來(lái)，治療慢性胃病，特別是伴Hp感染的慢性胃炎，還沒(méi)有一種理想的藥物。已有藥物大都有一定的副作用，而且Hp對(duì)它的耐藥性趨勢(shì)亦在增長(zhǎng)。

4 流行病學(xué)問(wèn)題

從現(xiàn)有的國(guó)內(nèi)外資料來(lái)看，Hp在人群中的感染率非常高，發(fā)達(dá)國(guó)家的感染率要低一些，發(fā)展中國(guó)家的感染率要高得多，有人估計(jì)我國(guó)人群的感染率可達(dá)40%左右。這么高的感染率是怎么來(lái)的呢？可是直到現(xiàn)在可以說(shuō)我們對(duì)它的傳染源與傳播途徑仍然一無(wú)所知，近年來(lái)有些國(guó)外學(xué)者已開(kāi)始對(duì)這一問(wèn)題進(jìn)行一些探索，國(guó)內(nèi)還只有個(gè)別人用很不可靠的尿素酶快速診斷試驗(yàn)作一些流行因素的分析，有的正在用血清學(xué)方法作一些人群中流行病學(xué)的調(diào)查，但是這還不能解決Hp感染的傳染源與傳播途徑問(wèn)題。因?yàn)橹挥薪鉀Q這一問(wèn)題以后才能談得上可以采取什么措施預(yù)防Hp感染的流行。從現(xiàn)有的血清學(xué)資料，可以肯定Hp感染是屬于后天獲得性感染，不是天生就有的。因此只要我們掌握了Hp的感染是可以預(yù)防的。這樣也才能從根本上來(lái)減少我國(guó)和全世界慢性胃病的發(fā)生率，以普遍提高我國(guó)和全世界人群的健康水平。解決這一問(wèn)題用目前的常規(guī)方法也是不行的。必須用更加現(xiàn)代化的分子生物學(xué)、分子遺傳學(xué)、單克隆抗體等手段來(lái)檢測(cè)人和其他生物標(biāo)本以及環(huán)境中的Hp，并用動(dòng)物模型，特別是悉生動(dòng)物來(lái)證明才行。Hp與各種慢性胃病的關(guān)系從現(xiàn)有資料來(lái)看，Hp與慢性胃炎及消化性潰瘍的關(guān)系是比較清楚的、明確的，但是與胃癌的發(fā)生亦有一定的關(guān)系，有待進(jìn)一步肯定。當(dāng)前在傳染源與傳播方式未弄清以前，按照消化道疾病“病從口入”的規(guī)律，注意改善衛(wèi)生條件仍是十分重要的預(yù)防措施。