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特種醫(yī)學論文:苦參堿對肝癌細胞增殖及其細胞自噬的影響

來源:本站原創(chuàng) 更新:2013-10-24 論文投稿平臺

特種醫(yī)學論文:苦參堿對肝癌細胞增殖及其細胞自噬的影響

[摘要] 目的 探索苦參堿對肝癌HepG2細胞增殖及其細胞自噬的影響,為臨床探索有效的肝癌綜合治療方案提供實驗依據(jù)。 方法 采用MTT法和流式細胞儀檢測肝癌HepG2細胞增殖抑制率及其細胞周期的變化;熒光顯微鏡定性觀察肝癌細胞自噬情況。 結果 苦參堿抑制肝癌HepG2細胞的增殖,且隨苦參堿濃度的增加和時間的延長,肝癌HepG2細胞的抑制率增加(P < 0.05)。流式細胞儀檢測示:苦參堿組細胞周期中G1期細胞增多,S期細胞減少(P < 0.05)。熒光顯微鏡檢測:肝癌HepG2細胞質中有自噬體形成,且隨苦參堿濃度的增加,自噬體越來越多。 結論 苦參堿對肝癌HepG2細胞增殖有一定的抑制作用,苦參堿抑制肝癌細胞的同時誘導了自噬的產生?鄥A誘導肝癌HepG2細胞自噬多發(fā)生在細胞周期的G1 期。

[關鍵詞] 苦參堿;肝癌細胞;自噬;細胞周期

[中圖分類號] R735.7 [文獻標識碼] A [文章編號] 1674-4721(2013)03(a)-0011-03

在中國傳統(tǒng)醫(yī)藥中,苦參堿是一種從苦參、山豆根中提取的生物堿,其分子式為C15H24N2O。而苦參堿早被廣泛用于治療病毒性肝炎、肝纖維 化、心律失常等疾病[1]。國內外研究表明[2]:無論是在體內還是體外,苦參堿具有較高的抗腫瘤活性。它可以抑制腫瘤增殖、誘導分化、誘導凋亡、抗轉移 等作用,同時又具有免疫調節(jié)、升高白細胞、緩解癌痛等許多常規(guī)化療藥物所不具備的優(yōu)勢。此外,研究發(fā)現(xiàn)苦參堿誘導了大鼠C6膠質瘤細胞的自噬[3]。而自 噬與腫瘤關系密切,同樣在抑制腫瘤中起著非常重要的作用[4-5]。細胞自噬在輔助化療藥物治療惡性腫瘤方面起著非常重要的作用。本實驗通過研究不同濃度 的苦參堿作用于肝癌HepG2細胞,探討苦參堿對肝癌HepG2細胞細胞周期以及細胞自噬的影響,為臨床化療藥物治療肝癌提供理論基礎。

1 資料與方法

1.1 一般資料

肝癌HepG2細胞由北京協(xié)和醫(yī)學院提供?鄥A(Matrine,廣州白云山明興制藥有限公司)、DMEM 4.5 g/L Glu(Gibco公司)、PBS液、胎牛血清(美國Sigma公司)、單丹磺酞戊二胺(MDC)(美國Sigma公司)、二甲基亞砜(DMSO)、熒光 顯微鏡(日本OlympuS公司)、CO2培養(yǎng)箱、離心機(北京醫(yī)用離心機廠)、流式細胞儀(美國BD公司,型號:FACSCalibur)、電熱恒溫培 養(yǎng)箱(河北省黃石市醫(yī)療器件廠)等。醫(yī).學全.在.線網(wǎng)站bhskgw.cn

1.2 方法

1.2.1 細胞培養(yǎng)及處理 將肝癌HepG2細胞培養(yǎng)在含10%胎牛血清的DMEM 培養(yǎng)液的培養(yǎng)瓶中,在37℃、5%CO2、飽和濕度下常規(guī)培養(yǎng)。顯微鏡下觀察細胞貼壁達80%時,用胰酶消化處理,取對數(shù)期細胞進行實驗。


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